Εκπαίδευση ” Βιοτεχνολογία & Ιατρική “

„Βιολογικά συστήματα και τεχνολογία Οmics“

Προχωρημένο επίπεδο

Οι εξελίξεις στις τεχνολογίες omics – όπως η γονιδιωματική, η μεταγραφική, η πρωτεϊνομική και η μεταβολική – έχουν αρχίσει να επιτρέπουν την ιατρική σε εξαιρετικά λεπτομερή μοριακό επίπεδο. Το ταχέως μειούμενο κόστος της αλληλουχίας υψηλής απόδοσης και άλλων μαζικά παράλληλων τεχνολογιών, όπως η φασματομετρία μάζας, καθιστά δυνατή τη χρήση τους στην κλινική έρευνα και την κλινική πρακτική.

Περιεχόμενα

 

Τεχνολογία OMICS στην καλυτέρευση της ποιότητας ζωής

Τεχνολογίες OMICS και Μοριακή Ιατρική

Οι εξελίξεις στις τεχνολογίες omics – όπως η γονιδιωματική, η μεταγραφική, η πρωτεϊνομική και η μεταβολική – έχουν αρχίσει να επιτρέπουν την ιατρική σε εξαιρετικά λεπτομερή μοριακό επίπεδο. Το ταχέως μειούμενο κόστος της αλληλουχίας υψηλής απόδοσης και άλλων μαζικά παράλληλων τεχνολογιών, όπως η φασματομετρία μάζας, καθιστά δυνατή τη χρήση τους στην κλινική έρευνα και την κλινική πρακτική. Η αλληλουχία εξωμίου και του γονιδιώματος χρησιμοποιείται ήδη για να βοηθήσει στη διάγνωση, ιδιαίτερα σε σπάνιες ασθένειες, για να ενημερώσει τη θεραπεία και την εξέλιξη του καρκίνου και, στις πρώτες προσπάθειες, να δημιουργήσει προγνωστικά μοντέλα ασθενειών σε υγιή άτομα. Πολυάριθμες ερευνητικές προσπάθειες και εταιρείες επικεντρώνονται σε γενετικά προφίλ γενετικών, γονιδιακών εκφράσεων και άλλων δεδομένων omics, όπως το μικροβίωμα, ως βιοδείκτες για ασθένειες. Αυτές οι τεχνικές έχουν επίσης εφαρμοστεί για τον εντοπισμό των θέσεων κινδύνου για ασθένειες, τον καθορισμό ακριβούς παθοφυσιολογίας της νόσου, καθώς και την εκτέλεση έρευνας για την Υγεία του Επαγγελματικού Περιβάλλοντος (ΥΕΠ).

Ιδανικά, διαφορετικές τεχνολογίες θα συνδυάζονταν τόσο για τη διάγνωση ασθενειών όσο και για τη δημιουργία μιας ολιστικής εικόνας των ανθρώπινων φαινοτύπων και ασθενειών. Ωστόσο, η εφαρμογή των δεδομένων πολλαπλών γνώσεων εισάγει νέες προκλήσεις πληροφορικής και ερμηνείας. Ποιοι είναι οι τρόποι με τους οποίους τα ενσωματωμένα omics μπορούν να επηρεάσουν την ιατρική βοηθώντας στη διαχείριση της υγείας, καθώς και στη διάγνωση και τη θεραπεία ασθενειών; Στην πραγματικότητα, για τη βελτίωση των αποτελεσμάτων της θεραπείας και τη μείωση των ανεπιθύμητων ενεργειών που έχουν σημασία τόσο για τον ιατρό όσο και για τον ασθενή, μία από τις προοπτικές λύσεις είναι η ανάπτυξη της εξατομικευμένης ιατρικής – εξατομικευμένης ιατρικής θεραπείας που δημιουργήθηκε για να ταιριάζει στα χαρακτηριστικά, τις ανάγκες και το μοναδικό μοριακό και γενετικό προφίλ των ατόμων ( Σχ. 1).

Σχήμα 1. Προσωποποιημένη ιατρική σε όλο το φάσμα ζωής

Τεχνολογία OMICs στην διάγνωση

Προγεννητική διάγνωση

Σχεδόν το 10% των παιδιατρικών παθήσεων και το 20% των βρεφικών θανάτων οφείλονται σε μεντελικές ασθένειες. Τα γενετικά ελαττώματα μπορεί να είναι μια σημαντική απειλή για την υγεία του μωρού. Για να ξεπεραστεί αυτό το ζήτημα, οι τελευταίες εξελίξεις στις τεχνολογίες omics χρησιμοποιούνται στη ζωή ενός ατόμου ακόμη και πριν από τη γέννηση. Ο προγεννητικός έλεγχος έχει γίνει ευρέως διαδεδομένος σε πολλές χώρες για την εξέταση όχι μόνο των ανωμαλιών ενός εμβρύου αλλά και των πιθανών κινδύνων ασθενειών ή παθολογικών καταστάσεων μετά τη γέννηση. Όταν υπάρχει γενετική προδιάθεση, όπως κυστική ίνωση ή μυϊκή δυστροφία, η συμβουλή του ειδικού ιατρού ή της εταιρείας γενετικής διάγνωσης αποκτά μεγάλη σημασία. Οι τελευταίες καινοτομίες στη μοριακή και κυτταρική βιολογία επέτρεψαν διάφορες γενετικές διαγνώσεις για τα έμβρυα. Μέχρι πρόσφατα, εφαρμόστηκαν διαφορετικές επεμβατικές τεχνολογίες όπως η αμνιοπαρακέντηση και η δειγματοληψία χοριακών λαχνών. Αν και οι διαδικασίες έχουν βελτιωθεί, εξακολουθεί να υπάρχει κίνδυνος αποβολής και σοβαρών παρενεργειών. Μία από τις καινοτόμες προσπάθειες για την αποφυγή των παρενεργειών των συμβατικών επεμβατικών τεχνολογιών είναι η απομόνωση και η ανάλυση των εμβρυϊκών πυρηνικών κυττάρων από το μητρικό αίμα. Δυστυχώς, ο αριθμός των εμβρυϊκών κυττάρων που μπορούν να απομονωθούν είναι περίπου 3-5 κύτταρα ανά 30 ml μητρικού αίματος. Το τεράστιο άλμα στον τομέα των μη επεμβατικών προγεννητικών δοκιμών (ΜΕΠΔ) έγινε μετά την πρόοδο των τεχνολογιών omics και τον συνδυασμό τους με διάφορες πειραματικές προσεγγίσεις. Η χρήση τεχνολογίας ενίσχυσης του DNA σε συνδυασμό με την NGS επέτρεψε την άμεση ανίχνευση του εμβρυϊκού DNA στο μητρικό αίμα. Επί του παρόντος, μια τέτοια προσέγγιση χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό του φύλου και του Rh τύπου αίματος και για την ανάλυση χρωμοσωμικών ανωμαλιών. Το απαλλαγμένο από κύτταρα εμβρυϊκό DNA τυπικά απελευθερώνεται στο μητρικό αίμα κατά τη διαδικασία της απόπτωσης των κυττάρων του πλακούντα. Το κατακερματισμένο εμβρυϊκό DNA χωρίς κύτταρα έχει μήκος ∼200 bp και έχει χρόνο ημιζωής ∼16 min και μπορεί να ανιχνευθεί στο πλάσμα της μητέρας από την αρχή της εγκυμοσύνης (5-7 εβδομάδες). Εκτός από το εμβρυϊκό DNA, τα εμβρυϊκά RNA μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν για τον ΜΕΠΔ. Για παράδειγμα, η εμβρυϊκή τρισωμία 21 μπορεί να διαγνωστεί ελέγχοντας την αλληλόμορφη αναλογία του mRNA PLAC4, που παράγεται από το χρωμόσωμα 21 στον πλακούντα. Εάν ένα μωρό λαμβάνει ετερογενή αλληλόμορφα από τους γονείς, μια άνιση αλληλόμορφη αναλογία (2: 1) υποδηλώνει τρισωμία.

Η ενσωμάτωση εμβρυϊκών γονιδιωματικών, μεταγραφικών, πρωτεομικών, μεταβολικών και επιγενετικών δεδομένων θα βοηθήσει στην προώθηση της προγεννητικής γενετικής διάγνωσης. Με αυτόν τον τρόπο, οποιαδήποτε γενετική διαταραχή θα μπορούσε να εντοπιστεί στις αρχές της εγκυμοσύνης με την εφαρμογή μη επεμβατικών προσεγγίσεων. Ωστόσο, προκύπτουν ορισμένες ανησυχίες σχετικά με την αύξηση σοβαρών ηθικών θεμάτων, όταν χρησιμοποιείται προηγμένη γονιδιωματική τεχνολογία. Ως εκ τούτου, θα πρέπει να εξεταστούν περαιτέρω μελέτες σχετικά με τον αντίκτυπο των νέων τεχνολογιών στην κοινωνία, όπως πιθανή διάκριση βάσει γενετικών πληροφοριών, απροσδιόριστες επιβλαβείς επιπτώσεις των νανοτεχνολογιών στον άνθρωπο και τη φύση και παραβιάσεις πνευματικών δικαιωμάτων λόγω της ανάπτυξης της τεχνολογίας των πληροφοριών (βλ. LO8).

Τεχνολογία Lab-on-a-Chip στη διάγνωση

Γρήγορα μετά την ανάπτυξη των μικρο-ηλεκτρο-μηχανικών συστημάτων (ΜΗΜ), αποκαλύφθηκε η πιθανή χρήση αυτών των μικροσκοπικών πλατφορμών για διάφορες εφαρμογές. Τις τελευταίες δεκαετίες, το ενδιαφέρον για το βιολογικό ή βιοϊατρικό ΜΗΜ (Βίο-ΜΗΜ) έχει αυξηθεί σημαντικά και έχει βρει ευρείες εφαρμογές σε διάφορους τομείς της επιστήμης της ζωής, όπως στα διαγνωστικά, στα θεραπευτικά, στην χορήγηση φαρμάκων, στους βιοαισθητήρες και στην μηχανική των ιστών. Αυτά τα ολοκληρωμένα συστήματα είναι επίσης γνωστά ως «εργαστήριο σε τσιπ» (LOC) ή «συστήματα μικρο-ολικής ανάλυσης» (μTAS) και παρέχουν έναν σταθερό τρόπο για μικρογραφία, ολοκλήρωση, αυτοματοποίηση και παραλληλισμό χημικών διεργασιών.

Οι συσκευές Lab-on-a-chip ενσωματώνουν πολλαπλές εργαστηριακές λειτουργίες σε ένα μόνο τσιπ (από λίγα τετραγωνικά χιλιοστά έως μερικά τετραγωνικά εκατοστά σε μέγεθος). Αυτές οι πλατφόρμες παρέχουν πολύπλοκες χημικές και/ή βιολογικές αναλύσεις που μπορούν να προσφέρουν φθηνότερη, ταχύτερη, ελεγχόμενη και υψηλότερη απόδοση βιοχημικών δοκιμασιών σε πολύ μικρή κλίμακα σε σύγκριση με τις συμβατικές εργαστηριακές δοκιμές. Είναι ικανά να χειρίζονται εξαιρετικά μικρούς όγκους υγρών έως και λιγότερους από πικολίτερ (λίγα μικροσταγονίδια ολικού αίματος, πλάσματος, σάλιου, δακρύων, ούρων ή ιδρώτα). Αυτό το γεγονός είναι πολύ σημαντικό σε πολλές κλινικές δοκιμές όπου συνήθως διατίθενται πολύ μικροί όγκοι δειγμάτων ασθενών. Επιπλέον, η αυτοματοποίηση με την εξάλειψη των παραμέτρων ανθρώπινης παρεμβολής μπορεί να αυξήσει την αξιοπιστία στην ανάλυση.

Το LOC έχει χρησιμοποιηθεί σε διάφορες εφαρμογές, όπως: εξαγωγή και καθαρισμός DNA, PCR, qPCR, μοριακή ανίχνευση, ηλεκτροφόρηση κ.λπ.

Το LOC για εξαγωγή και καθαρισμό DNA: Συχνά για διαγνωστικούς προσδιορισμούς το νουκλεϊκό οξύ πρέπει να καθαριστεί από τα κύτταρα. Η διαδικασία εξαγωγής του DNA περιλαμβάνει γενικά δύο στάδια: την κυτταρική λύση με διάσπαση της κυτταρικής μεμβράνης και της μεμβράνης του πυρήνα και καθαρισμός του DNA από τα λιπίδια της μεμβράνης, πρωτεΐνες και RNA. Η κυτταρική λύση σε συσκευές LOC μπορεί να επιτευχθεί με διάφορους τύπους μεθόδων λύσης: χημική, θερμική, υπερηχητική, ηλεκτρική, μηχανική ή κάποιο άλλο είδος λύσης. Αυτές οι γνωστές μέθοδοι καθαρισμού του DNA μέσω στηλών εκχύλισης, χρησιμοποιώντας την προσρόφηση DNA σε σφαιρίδια πυριτίας υπό ορισμένες συνθήκες ρυθμιστικού υγρού, είναι επίσης προσαρμόσιμες σε μικρορευστολογικές τεχνικές.

Συσκευές LOC για PCR, qPCR και Μοριακή Ανίχνευση: Μετά την εξαγωγή DNA, η πιο συχνή ανάλυση είναι η PCR. Η σημασία της PCR στη γονιδιωματική ανάλυση οδήγησε στην ανάπτυξη πολυάριθμων συσκευών LOC. Η μικρογραφία του όγκου και η υψηλή αναλογία επιφάνειας προς όγκο καθορίζουν την ταχεία θερμική μεταφορά και την ακριβέστερη PCR. Αυτή η ανάλυση απαιτεί μετα-ανάλυση και ανίχνευση μεγέθους αμπλίκων, η οποία γενικά πραγματοποιείται με ηλεκτροφόρηση. Με την εισαγωγή των LOC, η ηλεκτροφόρηση του DNA ήταν μία από τις πρώτες μοριακές διαδικασίες που ενσωματώθηκε σε ένα τσιπ. Αυτή η μικρογραφία μειώνει ακόμη περισσότερο το συνολικό χρόνο διεργασίας και μειώνει την κατανάλωση αντιδραστηρίου.

Σχήμα 2. Συσκευή Lab-on-a-Chip

Το qPCR είναι μια άλλη τεχνική που τροποποιήθηκε σε συσκευές LOC. Χρησιμοποιώντας εξαιρετικά γρήγορο ελεγκτή πίεσης και συσκευή ανάγνωσης φθορισμού, το εξαιρετικά γρήγορο μικρορευστό σύστημα qPCR είχε αναπτυχθεί για τη μοριακή ανίχνευση ασθενειών όπως ο άνθρακας και ο Έμπολα. Η αποδοτικότητα ανίχνευσης είναι πανομοιότυπη με τα εμπορικά συστήματα και τα αποτελέσματα είναι εφικτά σε λιγότερο από 8 λεπτά και είναι 7-15 φορές ταχύτερα από τα παραδοσιακά χρησιμοποιούμενα. Ένα άλλο προηγμένο πεδίο είναι η ψηφιακή μικρορευστολογία που ασχολείται με το γαλάκτωμα και τα σταγονίδια μέσα σε συσκευές LOC. Εξαιρετικά χαμηλή ποσότητα DNA μπορεί να βρεθεί εντός σταγονιδίων και τα όρια ανίχνευσης μπορούν να ενισχυθούν με μία ανίχνευση αριθμού αντιγράφου μέσα στα σταγονίδια LOC ​​qPCR.

Γονιδιωματική Εφαρμογή: Λόγω των πολυάριθμων έργων αλληλουχίας, όπως το Πρόγραμμα Ανθρώπινου Γονιδιώματος, ο τομέας της γονιδιωματικής κέρδισε τεράστια προσοχή τα τελευταία χρόνια. Η τεχνική αλληλουχίας επόμενης γενιάς του DNA που βρίσκεται σε εξέλιξη περιλαμβάνει αλληλουχία-υβριδισμό (SBH), προσδιορισμό αλληλουχίας σε νανοπόρους και σύνθεση αλληλουχίας (SBS), εκ των οποίων η τελευταία περιλαμβάνει πολλές διαφορετικές στρατηγικές εξαρτώμενες από πολυμεράση DNA. Η χρήση της προσέγγισης LOC επιτρέπει τη δραστική μείωση του κόστους και της διάρκειας της αλληλουχίας υψηλής απόδοσης.

Κατά τη μελέτη σύνθετων δειγμάτων έκφρασης DNA απαιτείται ενσωμάτωση πολλαπλών βιοαισθητήρων σε σχέση με μικροσυστοιχίες DNA. Τα πιο ουσιαστικά χαρακτηριστικά αυτών των LOC είναι η μικρογραφία, η ταχύτητα και η ακρίβεια. Αυτή η τεχνολογία προσφέρει τεράστιες δυνατότητες για ταχεία πολλαπλή ανάλυση δειγμάτων νουκλεϊνικού οξέος, συμπεριλαμβανομένης της διάγνωσης γενετικών ασθενειών, ανίχνευσης μολυσματικών παραγόντων, μετρήσεων διαφορικής γονιδιακής έκφρασης, διαλογής φαρμάκων ή ιατροδικαστικής ανάλυσης.

Βιοχημικές Εφαρμογές: Η στρατηγική LOC είναι επίσης εφαρμόσιμη για τη σύζευξη ενζυματικών και ανοσολογικών δοκιμασιών σε συσκευή μικροκαυσίμου ενός καναλιού. Χαρακτηριστικό παράδειγμα είναι η ταυτόχρονη μέτρηση γλυκόζης και ινσουλίνης. Το κλειδί για την αποτελεσματική υλοποίηση μιας τέτοιας παρακολούθησης γλυκόζης/ινσουλίνης είναι η ενσωμάτωση των σχετικών διαδικασιών προεπεξεργασίας/καθαρισμού του δείγματος που είναι απαραίτητες για την ολική ανάλυση αίματος. Αυτή η καινοτόμος προσέγγιση LOC μπορεί να εφαρμοστεί στην ενσωμάτωση άλλων αναλύσεων και πρόσθετων βημάτων χειρισμού δειγμάτων, όπως είναι επιθυμητό για τη δημιουργία μικροσκοπικών κλινικών οργάνων.

Πρωτεομικά: Η πρωτεϊονική είναι μία από τις μεγάλες επιστημονικές προκλήσεις στη μετά-γονιδιωματική εποχή. Οι συσκευές LOC είναι χρήσιμες για τη δημιουργία προηγμένων τεχνικών για την απάντηση σύνθετων αναλυτικών προβλημάτων, όπως η δημιουργία προφίλ πρωτεϊνών. Οι συσκευές LOC θα μπορούσαν να εφαρμοστούν σε τέσσερις βασικούς τομείς της πρωτεομικής: τη χημική επεξεργασία, την προεκέντρωση και τον καθαρισμό δειγμάτων, οι διαχωρισμοί χημικών και οι διεπαφές με μάζα MS. Το LOC που είναι μια μικροσκοπική συσκευή θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για διαχωρισμό και ανίχνευση πρωτεϊνών. Αυτή η διαδικασία χαρακτηρίζεται από λιγότερη κατανάλωση αντιδραστηρίου, εύκολη λειτουργία και πολύ γρήγορη ανάλυση. Ένα άλλο πλεονέκτημα είναι ότι τα δεδομένα από τις συσκευές LOC μπορούν εύκολα να συγκριθούν με αυτά που λαμβάνονται με τη χρήση 2D-PAGE. Προκειμένου να ποσοτικοποιηθούν οι πρωτεΐνες, αναπτύσσεται μια συσκευή σχηματισμού προφίλ LOC MS. Μερικοί συγγραφείς περιγράφουν συσκευές LOC που χρησιμοποιούνται για άμεση έγχυση στο φασματόμετρο μάζας, συμπεριλαμβανομένου του διαχωρισμού της τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης (CE), της πέψης του δείγματος στο τσιπ και της έγχυσης ή CE πριν από την ανάλυση MS. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν ιονισμό MS με ηλεκτροψεκασμό και επικεντρώνονται στο σχεδιασμό της διεπαφής μεταξύ του LOC και του φασματόμετρου μάζας.

Βιοαισθητήρες: Για την ανίχνευση αναλυτών στόχων αναπτύσσονται επίσης βιοαισθητήρες LOC. Τέτοιες συσκευές συνδέουν περίπλοκα ένα στοιχείο βιολογικής αναγνώρισης με έναν φυσικό μετατροπέα που μετατρέπει το συμβάν βιοανάγνωσης σε ηλεκτρικό σήμα. Υπάρχουν δύο τύποι βιοαισθητήρων LOC: η βιοσυγγένειας και οι βιοκαταλυτικές συσκευές. Οι συσκευές βιοσυγγένειας βασίζονται στην εκλεκτική δέσμευση του αναλύτη-στόχου σε έναν επιφανειακά κλειστό εταίρο συνδέτη (π.χ., αντίσωμα, ολιγονουκλεοτίδιο). Για παράδειγμα, στους βιοαισθητήρες υβριδισμού, υπάρχουν ακινητοποιημένοι μονόκλωνοι (ss) ανιχνευτές DNA στην επιφάνεια του μορφοτροπέα. Όταν σχηματίζεται ένα διπλό μπορεί να ανιχνευθεί μετά από τη συσχέτιση ενός κατάλληλου δείκτη υβριδισμού. Από την άλλη πλευρά, στις βιοκαταλυτικές συσκευές, χρησιμοποιείται ένα ακινητοποιημένο ένζυμο για την αναγνώριση του υποστρώματος στόχου. Ένα παράδειγμα είναι οι ταινίες αισθητήρα με ακινητοποιημένη οξειδάση γλυκόζης για παρακολούθηση του διαβήτη (για περισσότερες πληροφορίες βλέπε LO3).

Κυταρρική Έρευνα: Χρησιμοποιώντας συσκευές LOC, θα μπορούσε επίσης να πραγματοποιηθεί ένα πείραμα μικρής κλίμακας με κύτταρα. Το μεμονωμένο κελί τοποθετείται εντός του μικροκαναλιού σε μια προκαθορισμένη θέση, καθιστώντας εύκολο τον χειρισμό και την αλλαγή του. Το μικροσύστημα επιτρέπει τον χειρισμό μικρών όγκων ρευστού που περιέχουν μικρές ποσότητες αναλύτη. Τα συστήματα LOC ​​παρέχουν επίσης ακριβή έλεγχο του τοπικού περιβάλλοντος γύρω από το κύτταρο, παρακολουθώντας τη φυσική ή χημική φύση της επιφάνειας στην οποία προσκολλάται το κύτταρο, το τοπικό pH και τη θερμοκρασία. Όταν το κύτταρο πρόκειται να εκτεθεί σε διαφορετικό τύπο ερεθισμάτων, μπορούν να χρησιμοποιηθούν πολυάριθμα και συχνά πολύπλοκα συστατικά χειρισμού υγρών. Εάν το κύτταρο αποτελεί αντικείμενο περαιτέρω ανάλυσης, η λύση και οι απαραίτητες αναλυτικές μέθοδοι θα μπορούσαν επίσης να εισαχθούν στην ίδια πλατφόρμα. Έτσι, αποφεύγεται η απώλεια ή η αραίωση του δείγματος, η οποία θα γινόταν αναπόφευκτα εάν χρησιμοποιούνταν πολλές συσκευές.

Ανάπτυξη φαρμάκων: Η βιομηχανία χρειάζεται ανάπτυξη νέων φαρμάκων και πρόβλεψη της πιθανής συμπεριφοράς τους σε ζώα και κύτταρα που ενεργοποιούν άλλες αναλυτικές εφαρμογές συστημάτων LOC: π.χ., αναλυτικά συστήματα για την παρακολούθηση και βελτιστοποίηση της παραγωγής πρωτεϊνικών φαρμάκων, όπως θεραπευτικά αντισώματα, δοκιμασίες βασισμένες σε πρωτογενή ανθρώπινα κύτταρα που θα μπορούσαν να προβλέψουν την απόδοση σε ανθρώπινες κλινικές δοκιμές και αναστατωτές. Αυτά τα συστήματα LOC ​​είναι αποδεδειγμένα εξαιρετικά αναπαραγώγιμα, χειρίζονται εύκολα και θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν τακτικά.

Ανάλυση OMICs για την διάγνωση της γενετικής αρχιτεκτονικής σπάνιων ασθενειών

Ο εντοπισμός γενετικών δεικτών που σχετίζονται με ένα συγκεκριμένο χαρακτηριστικό της νόσου είναι βασικό ζήτημα κατά την εκτίμηση του κινδύνου της νόσου. Καθώς οι γενετικές πληροφορίες ενός ατόμου παραμένουν ως επί το πλείστον αμετάβλητες, οι μεταλλαγμένες αλληλουχίες μπορούν να είναι αξιόπιστοι δείκτες για ορισμένες ασθένειες. Από αυτή την άποψη, μια από τις σημαντικές εφαρμογές της τεχνολογίας omics είναι οι μελέτες συσχέτισης σε όλο το γονιδίωμα (GWAS). Μπορούν να εντοπίσουν κοινές γενετικές παραλλαγές, γενικά μεμονωμένους νουκλεοτιδικούς πολυμορφισμούς (SNPs), που σχετίζονται με ορισμένα χαρακτηριστικά της νόσου. Γενικά, οι πληροφορίες SNP συλλέγονται από δύο ομάδες, μια ομάδα ασθενών και μια ομάδα υγιούς ελέγχου. Στη συνέχεια αναλύεται στατιστικά και τα SNP που σχετίζονται με τα συγκεκριμένα χαρακτηριστικά της νόσου της αντίστοιχης ομάδας ασθενών επαναπροσδιορίζονται.

Για παράδειγμα, οι παραλλαγές στο γονίδιο απολιποπρωτεΐνης Ε (APOE) είναι ένας γνωστός γενετικός παράγοντας που συσχετίζεται με τη νόσο Αλτσχάιμερ (LOAD). Μετά την αξιολόγηση 502.627 SNPs σε 1086 ασθενείς με Αλτσχάιμερ., αποδείχθηκε ότι το rs4420638 στο χρωμόσωμα 19 είναι ο ισχυρότερος δείκτης που διαφοροποιεί τους ασθενείς με νόσο Αλτσχάιμερ από την ομάδα ελέγχου. Άλλη σημαντική επιτυχία επιτυγχάνεται κατά τη διερεύνηση κληρονομικών καρκίνων. Τα γονίδια BRCA1 και BRCA2 είναι ένας από τους σημαντικότερους γενετικούς δείκτες για κληρονομικούς καρκίνους του μαστού και των ωοθηκών. Αυτά τα γονίδια κωδικοποιούν πρωτεΐνες καταστολείς όγκων, οι οποίες βοηθούν στην επιδιόρθωση του κατεστραμμένου DNA μέσω κατευθυνόμενης επισκευής ομολογίας. Ορισμένες μεταλλάξεις στο BRCA1 και/ή BRCA2 αυξάνουν σημαντικά τον κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του μαστού και/ή των ωοθηκών. Για το BRCA1, ανιχνεύθηκαν δύο μεταλλάξεις: 185delAG και 5382insC. Περίπου το 55-65% των γυναικών που κληρονομούν μία από τις επιβλαβείς μεταλλάξεις BRCA1 και περίπου το 45% των γυναικών που φέρουν τη μετάλλαξη BRCA2 έχουν αναπτύξει καρκίνο του μαστού μέχρι την ηλικία των 70 ετών. Πολλοί άλλοι δείκτες ασθενειών όπως ο αυτοσωματικός κυρίαρχος καρκίνος του παχέος εντέρου, Li – Το σύνδρομο πολλαπλού καρκίνου Fraumeni, η βλεννολιπίδωση IV και η υπερτροφική μυοκαρδιοπάθεια, έχουν επίσης ταυτοποιηθεί με επιτυχία χρησιμοποιώντας NGS.

Ωστόσο, για τις πιο κοινές ασθένειες όπως ο διαβήτης, την παχυσαρκία, τη σχιζοφρένεια και τον αυτισμός, ευθύνεται ένας συνδυασμός πολλαπλών γενετικών και περιβαλλοντικών παραγόντων. Ένας αυξανόμενος αριθμός στοιχείων υποδεικνύει ότι οι γενετικοί δείκτες συνήθως εξηγούν μόνο ένα μέρος της συνολικής διακύμανσης των χαρακτηριστικών. Ένας από τους σημαντικούς παράγοντες που λείπουν είναι οι επιγενετικές παραλλαγές. Διάφορες επιγενετικές τροποποιήσεις έχουν αναφερθεί ότι σχετίζονται με το αρχικό στάδιο διαφορετικών καρκίνων (ανώμαλη ανάπτυξη ενός όγκου). Επιπλέον, είναι γνωστό ότι ο καρκίνος του παχέος εντέρου εντοπίζεται συχνότερα στους άνδρες παρά στις γυναίκες. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο έχει προταθεί ότι τα οιστρογόνα μπορούν να βοηθήσουν στην καταστολή του καρκίνου του παχέος εντέρου. Επιπλέον, τα επιγενετικά προφίλ του παρακείμενου βλεννογόνου και δείγματα μη γειτονικών βλεννογόνων 95 ασθενών με καρκίνο του παχέος εντέρου αποκάλυψαν ότι ο προαγωγέας του MGMT, ενός γονιδίου επιδιόρθωσης του DNA, ήταν συχνά μεθυλιωμένος. Μέχρι τώρα, χιλιάδες γονιδιωματικοί τόποι έχουν εντοπιστεί και σχετίζονται με διάφορες ανθρώπινες ασθένειες. Ωστόσο, οι δυσκολίες προκύπτουν όταν αυτά τα γονίδια πρέπει να χαρακτηριστούν στο πλαίσιο της μοριακής παθοφυσιολογίας και των αντίστοιχων αλληλεπιδρώντων γονιδίων και οδών.

Εφαρμογή της τεχνολογίας OMICs στην θεραπεία ασθενειών

Ο κύριος στόχος της εξατομικευμένης ιατρικής είναι να αποφασίσει για την πιο αποτελεσματική θεραπευτική επιλογή για ένα άτομο. Από αυτή την άποψη, η ταυτόχρονη ποσοτικοποίηση πολλαπλών δεικτών πρωτεΐνης μπορεί να παίξει σημαντικό ρόλο στην υποτύπωση των όγκων και στην επιλογή βελτιστοποιημένων θεραπειών για κάθε υποτύπο. Τεχνικές ποσοτικοποίησης πρωτεϊνών με υψηλή απόδοση, μεμονωμένα κύτταρα, όπως το CyTOF, μπορούν να είναι εξαιρετικές εναλλακτικές για μεθόδους που βασίζονται σε ανοσοϊστοχημεία.

Για παράδειγμα, την τελευταία δεκαετία εμφανίστηκε μια νέα προσέγγιση για τη θεραπεία καρκίνων – επιτρέποντας στο ανοσοποιητικό σύστημα του ασθενούς να καταπολεμήσει τον καρκίνο του, που ονομάζεται υιοθετική μεταφορά κυττάρων (ACT). Το πολύμορφο γλοιοβλάστωμα (GBM) είναι ο πιο συχνός και επιθετικός τύπος κακοήθους όγκου στον εγκέφαλο. Αν και το GBM έχει αντιμετωπιστεί με χειρουργική αφαίρεση, ακτινοθεραπεία και μεθόδους χημειοθεραπείας, δεν υπήρξαν αξιοσημείωτα αποτελέσματα. Τα τελευταία 20 χρόνια, έχουν πραγματοποιηθεί πολυάριθμες κλινικές δοκιμές για τη χρήση του ανοσοποιητικού συστήματος για τη θεραπεία καρκίνων όπως η GBM. Μεταξύ των πολυάριθμων προσεγγίσεων ACT, έχει δοθεί ιδιαίτερη προσοχή στα εμβόλια με βάση τα δενδριτικά κύτταρα (DC) και τα Τ -λεμφοκύτταρα. Μπορούν να διεισδύσουν και να προκαλέσουν αντικαρκινική αντίδραση στον εγκέφαλο και να δείξουν μεγάλες δυνατότητες για αποτελεσματική εξόντωση διαφόρων καρκίνων, συμπεριλαμβανομένων των κακοήθων και προχωρημένων τύπων. Τα αυτόλογα DCs, που λαμβάνονται από ιστό όγκου ή με τη μορφή λύματος όγκου ασθενούς, μπορούν να αναπτυχθούν in vitro παρουσία αντιγόνων που σχετίζονται με τον όγκο (TAAs), μια μέθοδος που ονομάζεται «παλμός». Τα παλμικά, αυτόλογα DC επανεισάγονται στον ασθενή για να διεγείρουν ειδική, κυτταρική, αντικαρκινική κυτταροτοξικότητα έναντι GBM και άλλων κακοήθων καρκίνων. Υπάρχουν και πιο επαναστατικές προσεγγίσεις, π.χ. έχουν επίσης επιχειρηθεί μηχανικά ειδικά ανοσοκύτταρα χρησιμοποιώντας νουκλεάσες δακτύλου ψευδαργύρου (ZFNs) και τεχνολογία CRISPR.

Κάθε χρόνο, χιλιάδες ασθενείς υποβάλλονται σε μεταμόσχευση οργάνων ή αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων. Ωστόσο, η θνησιμότητα μεταξύ αυτών των ασθενών παραμένει πολύ υψηλή. Μια τυπική διαδικασία αντιστοίχισης των δοτών με τους παραλήπτες περιλαμβάνει την αντιστοίχιση του ανθρώπινου λευκοκυττάρου αντιγόνου (HLA). Ωστόσο, γίνεται σαφές ότι οι παράγοντες μη-HLA μπορούν επίσης να επηρεάσουν σημαντικά την πρόγνωση και την ανάπτυξη της νόσου του μοσχεύματος έναντι του ξενιστή (GVHD). Για να ξεπεραστεί αυτό, πολλές εφαρμογές omics μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον προσδιορισμό των βέλτιστων αγώνων του δότη -παραλήπτη, καθώς και για την εξέταση διαφορετικών δεικτών απόρριψης. Για παράδειγμα, η αλληλουχία DNA μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εκτίμηση της σοβαρότητας της απόρριψης οργάνου καθώς και για ταυτόχρονη ανίχνευση της ενδεχόμενης παρουσίας ιικού DNA ως δείκτη μόλυνσης. Πρόσθετα στοιχεία omics, όπως έκφραση RNA ή πρωτεΐνης, μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν για την αξιολόγηση της συμβατότητας δότη -λήπτη. Έτσι, η ενσωμάτωση μεταξύ πολλών τεχνολογιών omics μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως χρήσιμο εργαλείο για τη βιολογία μεταμοσχεύσεων.

Επιπλέον, το μικροβίωμα έχει συσχετιστεί με πολλές κοινές ανθρώπινες ασθένειες. Ενώ η αιτιότητα είναι απλή στα γονιδιωματικά δεδομένα, όπου το DNA επηρεάζει τους φαινότυπους, είναι πιο δύσκολο να αποκαλυφθεί εάν η σύνθεση του μικροβιώματος είναι αιτία ή αποτέλεσμα ασθένειας. Παρ ‘όλα αυτά, είναι προφανές ότι οι ασθενείς με φλεγμονώδη νόσο του εντέρου, διαβήτη τύπου 2 και παχυσαρκία, έχουν διαφορετικά προφίλ μικροβιώματος από αυτά των υγιών ανθρώπων. Επιπλέον, το μικροβίωμα έχει μεγάλη επιρροή στη λειτουργία του ανοσοποιητικού συστήματος, η οποία σε ορισμένες περιπτώσεις έχει υποθετική αιτιώδη σχέση με ασθένειες σε ζωικά μοντέλα. Καθώς προχωρά η κατανόησή μας για το μικροβίωμα, η ολοκληρωμένη αξιολόγηση αυτών και άλλων δεδομένων τεχνολογιών omics θα βοηθήσει στην καλύτερη κατανόηση των ανθρώπινων ασθενειών. Πρόσφατα, έχει αποδειχθεί ότι τα ανθρώπινα γενετικά προφίλ επηρεάζουν τη συνολική σύνθεση των μικροβίων του εντέρου. Επιπλέον, οι αλληλεπιδράσεις μεταξύ της ανθρώπινης γενετικής και των μικροβιωμάτων έχουν αποδειχθεί ότι επηρεάζουν την εκδήλωση της νόσου. Ομοίως, η μεταβολική σηματοδότηση μεταξύ των ξενιστών και των μικροβιωμάτων τους έχει γίνει τομέας ενεργού έρευνας και υπάρχουν αυξανόμενες ενδείξεις ότι ένας αριθμός μεταβολιτών που εκκρίνονται από τα βακτήρια του εντέρου μπορεί να διαδραματίσουν ρόλο στις ανθρώπινες ασθένειες. Ως εκ τούτου, είναι προφανές ότι η ολοκληρωμένη ανάλυση μεταξύ προφίλ του γονιδιώματος, του μεταβολώματος και του μικροβιώματος θα παρέχει τα μέσα για τη διαχείριση της υγείας και την καταπολέμηση των ασθενειών.

Τεχνολογία OMICs στην πρόληψη ασθενειών- μελλοντικές προοπτικές

Ένας άλλος σημαντικός στόχος της εξατομικευμένης ιατρικής είναι να αποτρέψει την ανάπτυξη διαφόρων ασθενειών πριν από την εμφάνισή τους. Οι τρέχουσες προληπτικές θεραπείες περιορίζονται στη χειρουργική επέμβαση – αφαίρεση ιστού ή οργάνου εάν ένα άτομο διαθέτει σχετικούς δείκτες καρκίνου. Ωστόσο, αυτή η προσέγγιση δεν ισχύει για ασθένειες όπως το Αλτσχάιμερ, η νόσος του Χάντινγκτον και η συγγενής μυϊκή δυστροφία. Μία από τις πρόσφατες προσεγγίσεις για την αντιμετώπιση τέτοιων ζητημάτων είναι η θεραπεία διατροφής που βασίζεται στη θρεπτογονιδιωματική. Η διαμόρφωση του προφίλ μέσω τεχνολογίας Omics μπορεί να είναι μια αποτελεσματική προσέγγιση στην ανίχνευση αλλαγών μεγάλης κλίμακας ή επιπέδου πορείας, μπορεί να δείξει τάσεις για τον ασθενή και να προσθέσει στατιστική υποστήριξη μέσω επαναλαμβανόμενων μετρήσεων.

Εφαρμογές της τεχνολογίας OMICS στην Τοξικολογία

Η χρήση των εργαλείων omics για την αξιολόγηση της κατάστασης της περιβαλλοντικής υγείας γίνεται όλο και πιο σημαντική στη διαχείριση του περιβάλλοντος και την εκτίμηση κινδύνων. Η τεχνολογία Omics επιτρέπει τη σύνδεση μοριακών συμβάντων και δυσμενών επιπτώσεων με βιολογικά επίπεδα οργάνωσης που σχετίζονται με τα συστήματα εκτίμησης του κινδύνου. Η ανάλυση του επιπέδου των μεταγραφών RNA ή της κυτταρικής πρωτεομικής έχει ήδη αποκτήσει ιδιαίτερο ενδιαφέρον. Αυτές οι μελέτες βοήθησαν στην καλύτερη κατανόηση των αλληλεπιδράσεων μεταξύ των παραγόντων στρες και του οργανισμού, αλλά και στην αποκάλυψη των τρόπων δράσης (ΜΟΑ) διαφόρων τοξικών ουσιών. Επομένως, από τοξικολογικής άποψης, οι τεχνικές omics επιτρέπουν την αποτελεσματική και ακριβή παραγωγή σημαντικών πληροφοριών σχετικά με μοριακές διαταραχές που προκαλούνται από ουσίες σε κύτταρα και ιστούς και που σχετίζονται με δυσμενείς συνέπειες.

Οι κυτταρικές ρυθμιστικές διαδρομές περιλαμβάνουν μια σειρά διαφορετικών (βιο) μορίων, τα οποία χαρακτηρίζονται με διαφορετικές φυσικοχημικές ιδιότητες και εμφανίζουν περίπλοκες μη γραμμικές αλληλεπιδράσεις. Μια τεχνική μονής ομολογίας μπορεί να μετρήσει βιομόρια ενός συγκεκριμένου τύπου, RNA ή πρωτεΐνες, και συχνά αυτά δεν είναι ούτε το σύνολο των βιομορίων ενός τύπου, αλλά ένα μικρότερο υποσύνολο αυτών. Για παράδειγμα, η ανίχνευση βραχέων και μακρών RNAs, ή βραχυπεπτιδίων και πρωτεϊνών απαιτεί διαφορετικές μεταγραφικές ή πρωτεομικές προσεγγίσεις. Μόνο η χρήση πολυομικών, γνωστών και ως προσεγγίσεις διασταυρώσεων, επιτρέπει τον άμεσο προσδιορισμό ενός σημαντικού κλάσματος της απόκρισης των οδών στη χημική έκθεση. Ως εκ τούτου, η χρησιμοποίηση στρατηγικών πολλαπλών γνώσεων για τοξικολογικά ερευνητικά ερωτήματα έχει μεγαλύτερη σημασία.

Μια τέτοια τοξικολογική προσέγγιση συστήματος, που ενσωματώνει την κλασική τοξικολογία με την ποσοτική ανάλυση μεγάλων μοριακών δικτύων και τις λειτουργικές αλλαγές που συμβαίνουν σε πολλαπλά επίπεδα βιολογικής οργάνωσης, είναι ελπιδοφόρα στην ανάλυση του πλήρους φάσματος τοξικότητας των ξενοβιοτικών. Μια τοξικολογική προσέγγιση συστημάτων περιλαμβάνει τα ακόλουθα στοιχεία:

  • Απορρόφηση και κατανομή των ξενοβιοτικών στο βιολογικό σύστημα.
  • Μετασχηματισμός του ξενοβιοτικού και δημιουργία τοξικών και/ή μη τοξικών ενδιάμεσων.
  • Αλληλεπίδραση του ξενοβιοτικού και/ή των προϊόντων του με τους κυτταρικούς στόχους.
  • Τροποποιήσεις στα κυτταρικά μόρια συμπεριλαμβανομένων γονιδίων, πρωτεϊνών και λιπιδίων.
  • Δομικές εκδηλώσεις τοξικότητας των οργάνων -στόχων.
  • Λειτουργικές εκδηλώσεις τοξικότητας, και
  • Εξάλειψη του ξενοβιοτικού ή/και των ενδιάμεσων του από το βιολογικό σύστημα.

Τοξικολογικές μελέτες μέσω ανάλυσης OMICs

Για καλύτερη κατανόηση της κυτταρικής απόκρισης στη χημική έκθεση, οι μελέτες θα πρέπει να επικεντρωθούν σε διαφορετικά επίπεδα: μεταγραφικά, πρωτεομικά, φωσφοπρωτεομικά και μεταβολικά. Η επιγονιδιωματική θα πρέπει επίσης να λαμβάνεται υπόψη για συγκεκριμένες περιπτώσεις.

Μεταγραφική. Ο κύριος στόχος της μεταγραφικής είναι η ολοκληρωμένη ανίχνευση RNAa στο κύτταρο. Μια απόκριση μονοπατιού στη μεταγραφική ανιχνεύεται κυρίως μέσω ενός γνωστού συνόλου γονιδίων στόχων που βρίσκονται διαφορετικά εκφρασμένα. Οι τεχνικές που εφαρμόζονται για τον προσδιορισμό των αλλαγών στην γονιδιακή έκφραση ως απάντηση στην έκθεση σε ξενοβιοτικά περιλαμβάνουν: τον υβριδισμό, τον ποσοτικό PCR σε πραγματικό χρόνο (QRT-PCR), τον αφαιρετικό υβριδισμό, τη σειριακή ανάλυση της γονιδιακής έκφρασης, την ανάλυση μικροσυστοιχιών και την αλληλουχία επόμενης γενιάς. Ανάλογα με τον σκοπό της μελέτης, μία ή περισσότερες από αυτές τις τεχνικές μπορούν να εφαρμοστούν για τον καθορισμό είτε μερικών είτε σφαιρικών προφίλ έκφρασης στο δοκιμαζόμενο βιολογικό δείγμα. Ωστόσο, οι πιο συχνά χρησιμοποιούμενες τεχνικές κατάρτισης γονιδιακής έκφρασης είναι η QRT-PCR, η ανάλυση μικροσυστοιχιών και το NGS. Εάν ο στόχος είναι να διερευνηθεί το προφίλ έκφρασης ενός μόνο ή περιορισμένου αριθμού μεταγραφών, η ανάλυση QRT-PCR είναι η μέθοδος εκλογής. Η ανάλυση QRT-PCR είναι μια σχετικά απλή τεχνική που περιλαμβάνει την αντίστροφη μεταγραφή των mRNAs ακολουθούμενη από ενίσχυση PCR των cDNA που προκύπτουν χρησιμοποιώντας εκκινητές ειδικούς για το στοχευόμενο γονίδιο καθώς και για ένα ή περισσότερα γονίδια που διατηρούν το σπίτι. Η ποσότητα των ενισχυμένων με PCR γονιδιακών προϊόντων υπερβαίνει την ποσότητα. Καθώς το QRT-PCR μπορεί να προσδιορίσει με ακρίβεια την έκφραση ενός μεμονωμένου ή περιορισμένου αριθμού μεταγραφών, έχει κάποιους περιορισμούς από την άποψη της τοξικολογίας του συστήματος. Προκειμένου να μελετηθεί η τοξικότητα σε επίπεδο συστήματος ενός δεδομένου ξενοβιοτικού, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιηθούν τεχνικές υψηλής απόδοσης που είναι ικανές να καθορίσουν τα επίπεδα έκφρασης ολόκληρου του μεταγραφικού. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο η μικροσυστοιχία και η αλληλουχία επόμενης γενιάς είναι οι πιο δημοφιλείς παγκόσμιες τεχνικές ανάλυσης μεταγραφής που εφαρμόζονται στην έρευνα τοξικολογίας.

Η τεχνική της μικροσυστοιχίας αντιπροσωπεύει μια σημαντική ανακάλυψη στην εποχή της αλληλουχίας του ανθρώπινου γονιδιώματος. Όπως και η τεχνική υβριδισμού Southern, η προσέγγιση μικροσυστοιχιών βασίζεται στην ικανότητα των μορίων DNA να δεσμεύονται ή να υβριδοποιούνται με συγκεκριμένο τρόπο νουκλεοτιδικής αλληλουχίας. Η μικροσυστοιχία μπορεί να θεωρηθεί ως υβριδισμός υψηλής απόδοσης κηλίδας Northern, στον οποίο σχεδόν όλα τα γονίδια που εκφράζονται σε βιολογικό δείγμα σε δεδομένη στιγμή μπορούν να ανιχνευθούν ταυτόχρονα. Ως εκ τούτου, επιτρέπει την ανίχνευση μικρών διαφορών στα συνολικά προφίλ γονιδιακής έκφρασης σε ένα δεδομένο βιολογικό δείγμα ως απάντηση στην έκθεση των ξενοβιοτικών. Η τεχνική της μικροσυστοιχίας περιλαμβάνει την απομόνωση υψηλής ποιότητας RNA, την αντίστροφη μεταγραφή του mRNA για τη σύνθεση του cDNA, τη σύνθεση του cRNA και την επισήμανση για τη δημιουργία «ανιχνευτών», τον υβριδισμό των «ανιχνευτών» με τους «στόχους» που υπάρχουν στη μικροσυστοιχία, την ανίχνευση της έντασης του σήματος του υβριδοποιημένου συμπλέγματος ανιχνευτή-στόχου και ανάλυση των δεδομένων που προκύπτουν για τον προσδιορισμό των επιπέδων έκφρασης των γονιδίων που μας ενδιαφέρουν. Η ανάλυση με βάση τη μικροσυστοιχία έχει χρησιμοποιηθεί σε διάφορους τομείς όπως η τοξικολογία του περιβάλλοντος, η ανάπτυξη φαρμάκων και η επαγγελματική τοξικολογία. Τα δεδομένα που λαμβάνονται παρέχουν ένα στιγμιότυπο όλων των γονιδίων των οποίων τα επίπεδα έκφρασης επηρεάζονται ως απόκριση στην ξενοβιοτική έκθεση.

Η αλληλουχία επόμενης γενιάς (NGS) είναι η πιο πρόσφατα αναπτυγμένη παγκόσμια ανάλυση μεταγραφής. Αυτή η τεχνική μπορεί να εφαρμοστεί για τον προσδιορισμό ενός γενικού προφίλ γονιδιακής έκφρασης σε RNA που λαμβάνεται από διαφορετικά βιολογικά δείγματα. Τα βασικά βήματα που εμπλέκονται στο NGS είναι η απομόνωση RNA, η απομάκρυνση άφθονων μορίων RNA όπως το ριβοσωμικό RNA και η σφαιρίνη RNA, η προετοιμασία βιβλιοθηκών αλληλουχίας, η ενίσχυση PCR και η αλληλουχία των βιβλιοθηκών. Τα δεδομένα που προκύπτουν αναλύονται και προσδιορίζεται η ποσότητα των επιμέρους μεταγραφών.

Πρωτεομικά: Η μεταγραφική μέθοδος είναι συχνά η πρώτη επιλογή για έρευνες σε επίπεδο συστήματος καθώς έχουν αναπτυχθεί πολυάριθμες καθιερωμένες μέθοδοι μέτρησης κατά τη διάρκεια των ετών. Ωστόσο, οι πρωτεϊνικές αλλαγές μπορούν να θεωρηθούν ότι είναι πιο κοντά στη σχετική λειτουργική επίδραση ενός ερεθίσματος που μελετήθηκε. Αν και η έκφραση του mRNA και της πρωτεΐνης συνδέονται στενά μέσω της μετάφρασης, ο συσχετισμός τους είναι περιορισμένος. Τα επίπεδα μεταγραφής mRNA εξηγούν μόνο περίπου το 50% της διακύμανσης των επιπέδων πρωτεΐνης. Αυτό οφείλεται στα επιπλέον επίπεδα ρύθμισης της πρωτεΐνης, συμπεριλαμβανομένου του ρυθμού μετάφρασης και αποδόμησής τους. Επιπλέον, η ρύθμιση της πρωτεϊνικής δραστηριότητας δεν σταματά στο επίπεδο έκφρασής της αλλά συχνά ελέγχεται περαιτέρω μέσω μετα -μεταφραστικών τροποποιήσεων. Από την άποψη της τοξικολογίας, τέτοια παραδείγματα για σημαντική μετα-μεταγραφική ρύθμιση περιλαμβάνουν: τη στενή ρύθμιση των επιπέδων της πρωτεΐνης ρ53 και τον επαγώγιμο σε υποξία παράγοντα (HIF) και την ταχεία μετα-μεταγραφική τους σταθεροποίηση, π.χ. τη ρύθμιση πολλών κυτταρικών αποκρίσεων στρες (π.χ. οξειδωτικό στρες) στο επίπεδο της μετάφρασης πρωτεϊνών και τη ρύθμιση της απόκρισης του κυτταρικού στρες μέσω καταρράκτη φωσφορυλίωσης πρωτεϊνών. Οι πιο συχνά εφαρμοζόμενες αναλύσεις πρωτεομικής σημασίας για την τοξικολογία περιλαμβάνουν: την ηλεκτροφόρηση πηκτής πολυακρυλαμιδίου 2D, την υγρή χρωματογραφία χωρίς γέλη, τη φασματομετρία μάζας και την ανάλυση των μετα-μεταφραστικών τροποποιήσεων.

Η ηλεκτροφόρηση της γέλης 2D πολυακρυλαμιδίου (2DGE) χρησιμοποιείται για τη μελέτη διαταραχών στο πρωτέωμα με βάση τις αλλαγές στην έκφραση της πρωτεΐνης. Η τεχνική 2DGE βασίζεται στον διαχωρισμό των πρωτεϊνών με βάση το pH τους (φορτίο) καθώς και το μέγεθός τους. Έχει την ικανότητα να διαχωρίζει και να απεικονίζει έως και 2000 πρωτεΐνες σε ένα τζελ. Η πρώτη διάσταση είναι γνωστή ως ισοηλεκτρική εστίαση (IEF) χωρίζει τις πρωτεΐνες από το ισοηλεκτρικό σημείο τους (pI). Η δεύτερη διάσταση διαχωρίζει περαιτέρω τις πρωτεΐνες με τη μάζα τους. Το υπερσύγχρονο λογισμικό λήψης και ανάλυσης εικόνας επιτρέπει τη σύγκριση των δειγμάτων ελέγχου και επεξεργασίας που βοηθούν στον εντοπισμό των διαφοροποιημένων πρωτεϊνών με τη σχετική τους ένταση. Μια παραλλαγή του 2DGE είναι η ηλεκτροφόρηση πηκτής διαφοράς (DIGE) η οποία βασίζεται στην επισήμανση των πρωτεϊνών με φθορίζουσες χρωστικές κυανίνης (Cy2, Cy3 και Cy5). Αν και το 2DGE είναι ένα ισχυρό εργαλείο για τον εντοπισμό πολλών πρωτεϊνών, η προσέγγιση έχει τους περιορισμούς της. Ο κύριος περιορισμός είναι ότι δεν μπορούν όλες οι πρωτεΐνες να διαχωριστούν με IEF, όπως μεμβρανικές, βασικές, μικρές (<10 kDa) και μεγάλες (> 100 kDa) πρωτεΐνες. Ο δεύτερος περιορισμός είναι ότι οι λιγότερο άφθονες πρωτεΐνες συχνά καλύπτονται από τις άφθονες πρωτεΐνες στο μείγμα.

Άλλες συχνά χρησιμοποιούμενες τεχνικές είναι η φασματομετρία μάζας υγρής χρωματογραφίας χωρίς γέλη (LC MS/MS). Η προσέγγιση LC χρησιμοποιεί τις διαφορές στις φυσιοχημικές ιδιότητες των πρωτεϊνών και των πεπτιδίων, δηλαδή, το μέγεθος, το φορτίο και την υδροφοβία. Το 2D-LC μπορεί να εφαρμοστεί για κλασμάτωση πρωτεϊνικών μιγμάτων σε δύο στήλες με διαφορετικές φυσιοχημικές ιδιότητες και μεγιστοποίηση του διαχωρισμού πρωτεϊνών και πεπτιδίων σε πολύπλοκα μίγματα. Η φασματομετρία μάζας πιστεύεται ευρέως ότι είναι η βασική τεχνολογική πλατφόρμα για τοξικοπρωτεομικά. Τα κύρια πλεονεκτήματά του περιλαμβάνουν την αξεπέραστη ευαισθησία, τη βελτιωμένη ταχύτητα και την ικανότητα παραγωγής συνόλων δεδομένων υψηλής απόδοσης. Λόγω της υψηλής ακρίβειας του MS, στους ιστούς και τις βιολογικές μήτρες μπορούν να ανιχνευθούν πεπτίδια στην περιοχή του θηλομοριακού (10−15) έως του αττομοριακού (10−18). Αυτό είναι εξαιρετικά επωφελές στη συγκριτική ανάλυση όπου πραγματοποιείται ταυτόχρονη ανάλυση των δειγμάτων ελέγχου και επεξεργασίας. Έτσι, μπορεί να επιτευχθεί ολοκληρωμένη κατανόηση του τρόπου με τον οποίο τα ερεθίσματα επηρεάζουν το πρωτείο και η επακόλουθη ταυτοποίηση πιθανών βιοδεικτών.

Καθώς η βιολογία του συστήματος απαιτεί ακριβή ποσοτικοποίηση ενός συγκεκριμένου συνόλου πεπτιδίων/πρωτεϊνών σε πολλά δείγματα, έχουν επίσης αναπτυχθεί στοχευμένες προσεγγίσεις για τον ποσοτικό προσδιορισμό των βιοδεικτών. Μια τέτοια τεχνική είναι η επιλεγμένη παρακολούθηση της αντίδρασης (SRM). Το SRM μετρά τα πεπτίδια που παράγονται από την ενζυματική πέψη του πρωτεώματος σε τριπλό τετράπολο MS. Ένα πρωτεϊμικό πείραμα βασισμένο σε SRM ξεκινά με την επιλογή μιας λίστας πρωτεϊνών στόχων, που προέρχονται από προηγούμενα πειράματα ή αναζήτηση δεδομένων, όπως χάρτη διαδρομής ή βιβλιογραφία. Αυτό το βήμα ακολουθείται από 1) επιλογή των πρωτεότυπων πεπτιδίων -στόχων που αντιπροσωπεύουν βέλτιστα και μοναδικά τον στόχο της πρωτεΐνης, 2) επιλογή ενός συνόλου κατάλληλων μεταβάσεων SRM για κάθε πεπτίδιο στόχο, 3) ανίχνευση των επιλεγμένων πεπτιδικών μεταβάσεων σε ένα δείγμα, 4 ) βελτιστοποίηση των παραμέτρων ανάλυσης SRM και 5) εφαρμογή των δοκιμασιών στην ανίχνευση και ποσοτικοποίηση των πρωτεϊνών/πεπτιδίων. Τα κυριότερα πλεονεκτήματα της τεχνικής SRM είναι: 1) δυνατότητες παρακολούθησης δεκάδων έως εκατοντάδων πρωτεϊνών κατά την ίδια πορεία, 2) δυνατότητες για την απόλυτη και τη σχετική ποσοτικοποίηση, 3) υψηλή αναπαραγωγιμότητα δεδομένων και 4) απόδοση απόλυτης μοριακής ειδικότητας. Ωστόσο, υπάρχουν επίσης ορισμένοι περιορισμοί αυτής της τεχνικής: 1) μόνο ένας περιορισμένος αριθμός μετρήσιμων πρωτεϊνών μπορεί να συμπεριληφθεί στην ίδια σειρά και 2) ακόμη και με την υψηλή ευαισθησία του δεν μπορεί να ανιχνεύσει όλες τις πρωτεΐνες που υπάρχουν σε έναν οργανισμό.

Έχει επίσης χρησιμοποιηθεί μια στοχευμένη προσέγγιση βασισμένη σε MS γνωστή ως παρακολούθηση παράλληλης αντίδρασης (PRM). Επικεντρώνεται στη χρήση εργαλείων μάζας υψηλής ανάλυσης και ακριβείας νέας γενιάς, εξοπλισμένων με τετράπολο (κυρίως το σύστημα Orbitrap MS). Αυτή η τεχνική σχετίζεται στενά με το SRM αλλά επιτρέπει τη μέτρηση όλων των προϊόντων κατακερματισμού ενός δεδομένου πεπτιδίου παράλληλα.

Μια άλλη βασική προσέγγιση είναι η ανάλυση των μετα -μεταφραστικών τροποποιήσεων (PTM) που συνέβησαν λόγω της τοξικής έκθεσης. Αντιπροσωπεύουν έναν ουσιαστικό μηχανισμό ρύθμισης του κυτταρικού πρωτεώματος. Τα PTM είναι χημικές τροποποιήσεις που έχουν σημαντικό ρόλο στη ρύθμιση της δραστηριότητας, του εντοπισμού και των αλληλεπιδράσεων των κυτταρικών βιομορίων. Η ταυτοποίηση και ο χαρακτηρισμός των πρωτεϊνών και των θέσεων PTM τους είναι πολύ σημαντικά για τη βιοχημική κατανόηση των οδών PTM. Αυτή η γνώση παρέχει βαθύτερες γνώσεις σχετικά με την πιθανή ρύθμιση της κυτταρικής φυσιολογίας που προκαλείται από το PTM. Μερικά παραδείγματα PTM περιλαμβάνουν την φωσφορυλίωση, τη γλυκοζυλίωση, την πανταχού παρουσία, τη νιτροσυλίωση, τη μεθυλίωση, την ακετυλίωση, τη λιπιδίωση και την πρωτεόλυση. Κατά την τελευταία δεκαετία, η πρωτεϊνομετρική με βάση το MS έχει αποδειχθεί ότι είναι ένα ισχυρό εργαλείο για τον εντοπισμό και τη χαρτογράφηση των PTM. Επιπλέον, οι προσεγγίσεις που βασίζονται σε MS αξιοποίησαν το μεγάλο πλεονέκτημα από την πρόοδο στα όργανα MS που καθιστούν την ανάλυση πιο ευαίσθητη, ακριβή και με υψηλότερη ανάλυση για την ανίχνευση λιγότερο άφθονων πρωτεϊνών.

Μεταβολική: Η μεταβολική τεχνική είναι διαφορετική από την άλλη ανάλυση omics, καθώς ασχολείται με μια συλλογή χημικά εξαιρετικά ετερογενών μορίων. Η μεταβολική ορίζεται συνήθως ως η πλήρης ισορροπία όλων των μεταβολιτών μικρών μορίων (<1500Da) που βρίσκονται σε ένα συγκεκριμένο κύτταρο, όργανο ή οργανισμό. Χάρη σε πρωτοβουλίες όπως το Human Metabolome Project, ο ενδογενής μεταβολισμός ανθρώπινων και ζωικών μοντέλων οργανισμών έχει χαρτογραφηθεί σε μεγάλο βαθμό. Οι μετρήσεις του μεταβολώματος χρησιμοποιούν είτε ανίχνευση με βάση πυρηνικό μαγνητικό συντονισμό (NMR) είτε αέρια ή υγρή χρωματογραφία ενωμένη σε MS. Οι προσεγγίσεις που βασίζονται σε NMR έχουν την ικανότητα να ποσοτικοποιούν τους μεταβολίτες που μελετήθηκαν και αποτελούν το χρυσό πρότυπο για τη δομική διαλεύκανση άγνωστων μεταβολιτών. Οι προσεγγίσεις που βασίζονται σε MS ξεπερνούν το NMR όσον αφορά την ευαισθησία και μπορούν να εκτελεστούν με μη στοχευμένο ή στοχευμένο τρόπο.

Η μεταβολική τεχνική διαφέρει από την πρωτεϊνομετρική και τη μεταγραφική σε πολλές απόψεις:

(i) ανιχνεύει την απόκριση σε πολύ διαφορετικά επίπεδα μιας διαδρομής, και

(ii) την ταυτόχρονη σύλληψη μορίων μιας οδού που ανταποκρίνονται σε εξαιρετικά διαφορετικές χρονικές κλίμακες.

Η εξέλιξη της μεταβολικής έχει γίνει συστηματικά και είναι ιδιαίτερα χρήσιμη σε πολλές μελέτες που σχετίζονται με την τοξικολογία. Έχει αξιοσημείωτες δυνατότητες για τον έλεγχο κυτταρικής ή οργανικής τοξικότητας που προκαλείται από φάρμακα. Η ταχεία αξιολόγηση των βιολογικών δειγμάτων, μαζί με τη μαθηματική και στατιστική ανάλυση (χημειομετρία) των ληφθέντων δεδομένων χρησιμεύει ως ένα ισχυρό εργαλείο για την αξιολόγηση της ασφάλειας των φαρμάκων. Για παράδειγμα, εάν ένα φάρμακο ή χημική ουσία μπορεί να προκαλέσει ηπατική τοξικότητα προκαλώντας κυτταρικό οξειδωτικό στρες, η μεταβολική ανάλυση του βιολογικού δείγματος που εκτίθεται στο φάρμακο μπορεί να παράσχει άμεσες πληροφορίες σχετικά με τους μεταβολίτες που είναι δείκτες του οξειδωτικού στρες. Μπορεί επίσης να εντοπίσει μεταβολίτες που θεωρούνται ως γνωστοί βιοδείκτες ηπατικής βλάβης, υποδηλώνοντας έτσι ηπατική παθολογία. Επιπλέον, η μεταβολική ανάλυση μπορεί επίσης να παρέχει πληροφορίες για μεταβολίτες που σχετίζονται έμμεσα με τοξικότητα.

Η μεταβολική τεχνική έχει πολλά πλεονεκτήματα έναντι της συμβατικής κλινικής εκτίμησης παθολογίας. Για παράδειγμα, μια μελέτη που εξέτασε μια άγνωστη ένωση έδειξε ότι αυτή η ένωση αυξάνει τα επίπεδα χοληστερόλης στον ορό. Κατά τη χρήση της μεταβολικής, έχει παρατηρηθεί ότι, εκτός από τη χοληστερόλη, η ίδια ένωση αυξάνει επίσης αρκετές φυτοστερόλες, υποδεικνύοντας ότι η υψηλότερη χοληστερόλη είναι αποτέλεσμα της απορρόφησης της στερόλης στο έντερο. Τέτοια ευρήματα δείχνουν σαφώς ότι η μεταβολική έχει πολύ υψηλότερες δυνατότητες όσον αφορά τον εντοπισμό ακριβών τοξικολογικών τελικών σημείων.

Επιγονιδωματική. Κύριος στόχος της επιγονιδιωμτικής είναι η μελέτη των χημικών τροποποιήσεων του DNA και των πρωτεϊνών που οργανώνουν την τρισδιάστατη δομή του γονιδιωματικού DNA. Σήμερα, η μεθυλίωση του DNA αξιολογείται με μια τροποποιημένη προσέγγιση προσδιορισμού αλληλουχίας γονιδιώματος (μεθυλομή-seq). Ωστόσο, αυτή η προσέγγιση εξακολουθεί να απαιτεί υψηλή κάλυψη που σχετίζεται με ακόμη σημαντικό κόστος αλληλουχίας. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο οι στοχευμένες προσεγγίσεις με βάση τη μικροσυστοιχία χρησιμοποιούνται συχνότερα. Η μεθυλίωση του DNA περιλαμβάνει δύο διαφορετικές χημικές τροποποιήσεις με ξεχωριστές λειτουργικές συνέπειες-την 5-μεθυλκυτοσίνη και την 5-υδροξυ-μεθυλκυτοσίνη. Οι τροποποιήσεις ιστόνης αναλύονται χρησιμοποιώντας μέθοδο χρωματίνης-ανοσοκαταβύθισης εφαρμόζοντας αντισώματα ειδικά για τη στοχευμένη τροποποίηση ακολουθούμενη από αλληλουχία (ChIP-seq). Συνήθως, για να έχετε μια ολοκληρωμένη εικόνα, πρέπει να εντοπιστούν πολλές τροποποιήσεις. Αυτό απαιτεί ταυτόχρονη εκτέλεση πολλών αναλύσεων ChIP-seq. Καθώς το ChIP-seq χρειάζεται περισσότερο δείγμα υλικού από τις άλλες επιγενωμικές προσεγγίσεις, μια τέτοια στρατηγική μπορεί να είναι δύσκολο να εφαρμοστεί σε τοξικολογικές μελέτες. Το ATAC-seq είναι μια εναλλακτική προσέγγιση που δεν διερευνά άμεσα τις χημικές τροποποιήσεις, αλλά μάλλον μια από τις κύριες συνέπειες των τροποποιήσεων, την προσβασιμότητα στο DNA.

Ωστόσο, η γνώση σχετικά με τη συμμετοχή ρυθμιστικών οδών και συγκεκριμένων επιγονιδιωματικών τροποποιήσεων είναι ακόμη σπάνια. Η επιγονιδιωματική είναι επομένως περιορισμένης αξίας όταν χρησιμοποιείται μια προσέγγιση ενσωμάτωσης δεδομένων που βασίζεται σε μονοπάτια. Ωστόσο, τα επιγονιδιβματικά δεδομένα αποδείχθηκαν εξαιρετικά πολύτιμα για μελέτες μεταξύ γενεών ή όταν προσπαθούσαν να προβλέψουν μακροπρόθεσμες επιπτώσεις της χημικής έκθεσης με βάση τα στοιχεία omics της βραχυπρόθεσμης έκθεσης.

Εφαρμογές της OMICs για τοξικολογική εκτίμηση κινδύνου και κανονιστικές υποβολές

Τις τελευταίες δεκαετίες, οι τεχνολογίες omics έχουν χρησιμοποιηθεί εκτενώς στην έρευνα και αποδείχθηκε ότι είναι σε θέση να παρέχουν μια βαθιά εικόνα για τη βιοχημεία και τη φυσιολογία του κυττάρου και οποιαδήποτε βλαβερή επίδραση των ξενοβιοτικών. Αυτό οδήγησε σε ενθουσιώδη έγκριση από ερευνητές τοξικολόγους. Εκφράστηκαν οι ελπίδες ότι οι τεχνολογίες omics θα παρέχουν τα εργαλεία για τον εντοπισμό ενός συνόλου βιοδεικτών δυσμενών επιπτώσεων και τους τρόπους δράσης τους. Έτσι, θα βελτιωθεί η πρόβλεψη των επιπτώσεων στον άνθρωπο κατά την εκτίμηση επικινδυνότητας ουσιών και θα συμβάλλει στην ανάπτυξη εναλλακτικών μεθόδων σε δοκιμές σε ζώα. Παρόλα αυτά, η μετάφραση των omics στον κανονιστικό τομέα παραμένει στην καλύτερη περίπτωση επιφυλακτική.

Ως εκ τούτου, το Ευρωπαϊκό Κέντρο Οικοτοξικολογίας και Τοξικολογίας των Χημικών (ECETOC) διοργάνωσε μια σειρά εργαστηρίων για την αξιολόγηση των δυνατοτήτων και των προκλήσεων των τεχνικών omics στην εκτίμηση χημικών κινδύνων. Το πιο πρόσφατο εργαστήριο κατέληξε στο συμπέρασμα ότι οι προσεγγίσεις omics συμβάλλουν στην απάντηση σχετικών ερωτήσεων στην εκτίμηση κινδύνου, όπως:

(i) την ταξινόμηση ουσιών και τον ορισμό της ομοιότητας,
(ii) την αποσαφήνιση του τρόπου δράσης των ουσιών, και
(iii) τον εντοπισμό επιπτώσεων για συγκεκριμένα είδη και την απόδειξη της συνάφειας της ανθρώπινης υγείας.

Ωστόσο, εντοπίστηκε η ανάγκη για αύξηση της αναπαραγωγιμότητας της απόκτησης δεδομένων και της ανάλυσης δεδομένων, καθώς και για τον καθορισμό των βέλτιστων πρακτικών. Επιπλέον, η κανονιστική χρήση οποιασδήποτε μεθόδου δοκιμής σχετίζεται στενά με το συγκεκριμένο νομικό πλαίσιο που σχετίζεται με την υπό διερεύνηση ουσία. Λαμβάνοντας υπόψη τον κανονισμό REACH (ΕΚ και Συμβούλιο της ΕΕ, 2006), “τα δεδομένα που βασίζονται σε ομόλογα θα μπορούσαν δυνητικά να χρησιμοποιηθούν για κανονιστικές υποβολές”. Για τη χρήση των omics σε φακέλους REACH, ο κανονισμός REACH απαριθμεί διαφορετικές απαιτήσεις: συγκεκριμένες τυπικές πληροφορίες που καλύπτουν συγκεκριμένα φυσικοχημικά, τοξικολογικά και οικοτοξικολογικά όρια. Αυτά τα δεδομένα αξιολογούνται κατά την εκτίμηση επικινδυνότητας και κινδύνου και αναλύονται για τον προσδιορισμό εναλλακτικών λύσεων διαχείρισης κινδύνου, αντίστοιχα. Η εφαρμογή και η ενσωμάτωση εργαλείων omics μπορεί να είναι χρήσιμη σε διαφορετικά επίπεδα κανονιστικής αναγνώρισης και αξιολόγησης κινδύνων συμβάλλοντας σε:

  1. Ταξινόμηση και επισήμανση (C&L) των ουσιών.
  2. Προσεγγίσεις βάρους-αποδεικτικών στοιχείων (WoE) για τη διευκρίνιση του ΜΣ της υπό διερεύνηση ουσίας.
  3. Τεκμηρίωση χημικής ομοιότητας.
  4. Προσδιορισμός των σημείων αναχώρησης (PoD) για την εκτίμηση κινδύνου.
  5. Επίδειξη επιπτώσεων για συγκεκριμένα είδη και συνάφεια με την ανθρώπινη υγεία.

Η ταχεία ανάπτυξη των τεχνολογιών omics θέτει πολλές προκλήσεις για τη διευκόλυνση της χρήσης τους για την αξιολόγηση κινδύνων, ιδιαίτερα από την άποψη της κανονιστικής υποβολής. Τα σύνολα «μεγάλων δεδομένων» πρέπει να συμπυκνωθούν εφαρμόζοντας πολύπλοκες προσεγγίσεις και εφαρμόζοντας συγκεκριμένες γνώσεις για τη λήψη πληροφοριών που είναι συναφείς για την εκτίμηση κινδύνου. Επιπλέον, η γνώση σε αυτόν τον ταχέως εξελισσόμενο τομέα δεν είναι απαραίτητα γνωστή σε πολλούς ερευνητές που εργάζονται στις ρυθμιστικές ρυθμίσεις. Κατά συνέπεια, η έλλειψη κανονιστικής έγκρισης τεχνολογιών omics δεν συνδέεται μόνο με την έλλειψη πλαισίων βέλτιστων πρακτικών και κριτηρίων ποιότητας, αλλά και με την έλλειψη εμπιστοσύνης στην ανάλυση και το επίπεδο αβεβαιότητας ως προς το τι συνιστά αρκετά δεδομένα. Οι επιστήμονες και οι ρυθμιστικές αρχές πρέπει πρώτα να αποκτήσουν εμπειρία με τα δεδομένα που λαμβάνονται από αυτή τη νέα τεχνολογία και στη συνέχεια να χτίσουν εμπιστοσύνη στην εφαρμογή της.

Περιβαλλοντική τεχνολογία OMICS και Βιοποικιλότητα

Γενικά, οι περισσότερες περιβαλλοντικές μελέτες περιλαμβάνουν καλλιέργεια απομονωμένων μικροοργανισμών ή ενίσχυση και αλληλουχία διατηρημένων γονιδίων. Ωστόσο, υπάρχουν ορισμένες δυσκολίες στην κατανόηση της πολυπλοκότητας μεγάλου αριθμού διαφόρων μικροοργανισμών σε ένα περιβάλλον. Αυτό οδήγησε στην ανάπτυξη νέων τεχνικών που επιτρέπουν τον εμπλουτισμό ειδικών μικροοργανισμών για ανάλυση, όπως απομόνωση και αναλύσεις μονοκυττάρων. Προηγμένα εργαλεία στη μεταγονιδιωματική και τη μονογονιδιακή γονιδιωματική (SCG) ανοίγουν το δρόμο σε νέες μεθόδους μελέτης και κατανόησης του περιβάλλοντός μας.

Οι πρώτες περιβαλλοντικές μελέτες της ποικιλομορφίας των οργανισμών απαιτούσαν την καλλιέργεια δειγμάτων για να αυξήσει την ποσότητα του DNA πριν από τη δημιουργία γονιδιωματικών βιβλιοθηκών. Εκείνη την εποχή, η αλληλουχία του 16R και 18S rRNA ήταν η καλύτερη διαθέσιμη επιλογή για τον καθορισμό της περιβαλλοντικής ποικιλομορφίας. Ωστόσο, κατέστη σαφές ότι η πλειοψηφία των δειγμάτων κοινοτήτων αντιπροσωπεύει ακαλλιέργητα είδη. Ευτυχώς, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) του rRNA επιτρέπει την πρόσβαση τόσο στην καλλιεργήσιμη όσο και στην μη καλλιεργήσιμη ποικιλία δειγμάτων. Επειδή η PCR μπορεί να πραγματοποιηθεί απευθείας σε περιβαλλοντικά δείγματα χωρίς κλωνοποίηση, μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ενίσχυση στοχευμένων γονιδίων απευθείας από το περιβάλλον.

Η σημασία της αλληλουχίας τόσο των μη κωδικοποιητικών rRNA όσο και των πρωτεϊνικών κωδικοποιητικών γονιδίων αυξάνεται, με ιδιαίτερο ενδιαφέρον για την ανασυγκρότηση βακτηριακών γονιδιωμάτων. Μια ολοκληρωμένη δειγματοληψία όλων των γονιδίων από όλους τους οργανισμούς που υπάρχουν σε ένα πολύπλοκο δείγμα είναι εφικτή μέσω της μεταγονιδιακής αλληλουχίας κυνηγετικού όπλου. Η χρήση αυτής της μεθόδου καθιστά δυνατή την αξιολόγηση της ποικιλίας των βακτηρίων και τον εντοπισμό της αφθονίας μικροοργανισμών σε ένα συγκεκριμένο περιβάλλον. Επιπλέον, επιτρέπει την ανασύσταση πλήρων γονιδιωμάτων μη καλλιεργήσιμων μικροοργανισμών. Εκτός από την ανακάλυψη νέων αρχαίων βακτηρίων, πρωτόζωων, φυκιών, μυκήτων και ευκαρυωτικών ειδών, αυτή η τεχνική είναι ζωτικής σημασίας για την ανασύσταση των γονιδιωμάτων ιών. Αυτή ήταν μια κρίσιμη πρόοδος λαμβάνοντας υπόψη ότι οι ιοί δεν διαθέτουν κοινό γενικό φυλογενετικό δείκτη, όπως βακτηριακό 16S rRNA ή ευκαρυωτικό 18S rRNA.

Μια άλλη προσέγγιση είναι η μετα -μεταγραφική προσέγγιση, η οποία αντί να χρησιμοποιεί γονιδιωματικό DNA (gDNA) περιλαμβάνει τη συλλογή ολόκληρου RNA. Το πιο πρόσφατο χρησιμοποιείται για την κατασκευή cDNA βιβλιοθηκών. Αν και το RNA είναι λιγότερο σταθερό από το DNA, δίνει ένα στιγμιότυπο της τρέχουσας κατάστασης της κοινότητας αποκαλύπτοντας πάνω και κάτω ρυθμιζόμενα γονίδια. Μέχρι σήμερα, μία από τις σημαντικότερες μελέτες μετα- μεταγραφής πραγματοποιείται για τις κοινότητες θαλάσσιων υδάτων.

Μονοκυτταρική γονιδιωματική

Η μεταγονιδιακή αλληλουχία είναι ένα χρήσιμο εργαλείο για την κατανόηση των περιβαλλοντικών κοινοτήτων. Ωστόσο, η συναρμολόγηση καταλόγων γονιδίων και σύνθετων γονιδιωμάτων μπορεί να είναι δύσκολη. Επιπλέον, είναι δύσκολο να γίνει διάκριση μεταξύ γονιδίων που προέρχονται από τον ίδιο ή διαφορετικό οργανισμό σε γονιδιώματα που έχουν ήδη συναρμολογηθεί (Σχμ. 3). Ως εκ τούτου, υπάρχει σημαντικό ενδιαφέρον για την ανάπτυξη ενός συστήματος για την κατανόηση της οργάνωσης των ανακαλυφθέντων γονιδίων και των οδών εντός των γονιδιωμάτων.

Σχημα 3. Μεταγονιδιακή έναντι μονοκυτταρικής γονιδιακής

Η πρόκληση της ετερογένειας του δείγματος θα μπορούσε να λυθεί εν μέρει χρησιμοποιώντας δύο τεχνικές και βαθιά αλληλουχία. Απαιτούνται διαφορετικές προσεγγίσεις για τη σύγκριση μεταγονιδιακών δειγμάτων που συλλέγονται από διαφορετικά περιβάλλοντα και για την αποκάλυψη της σύνθεσης και της οργάνωσης των γονιδιωμάτων μικροοργανισμών στο περιβάλλον. Μία από τις προσεγγίσεις είναι ο εμπλουτισμός της καλλιέργειας ενός συγκεκριμένου οργανισμού με βάση τις συγκεκριμένες περιβαλλοντικές τους λειτουργίες. Αυτός ο τύπος στοχευμένης μεταγονιδιωματικής προσέγγισης επιτρέπει την ανάπτυξη σύνθετων μικροβιακών γονιδιωμάτων. Επιπλέον, λόγω της έλλειψης καλλιέργειας πολλών οργανισμών, άλλα προβλήματα εμφανίζονται όταν οι ταχύτερα αναπτυσσόμενοι μικροοργανισμοί ξεπεράσουν τους πιο αργούς, εισάγοντας στη συνέχεια πρόσθετες παραμέτρους.

Ως εκ τούτου, αντί για καλλιέργεια, ένα πολύπλοκο δείγμα μπορεί να εμπλουτιστεί για έναν πληθυσμό κυττάρων-στόχων χρησιμοποιώντας ταξινόμηση κυττάρων ενεργοποιημένου με φθορισμό (FACS). Η χρήση αυτής της προσέγγισης βοηθά στην ταξινόμηση των κυττάρων με βάση το σχήμα, το μέγεθος και την πυκνότητα τους. Εναλλακτικά, συγκεκριμένοι οργανισμοί ενδιαφέροντος μπορούν να εμπλουτιστούν χρησιμοποιώντας ένα μικρό αριθμό κυττάρων που έχουν συγκεκριμένη λειτουργία στο περιβάλλον. Με την ανάπτυξη τεχνικών ενίσχυσης ολόκληρου του γονιδιώματος (WGA) (π.χ. ενίσχυση πολλαπλής μετατόπισης (MDA) ή ενίσχυση του κυλιόμενου κύκλου (RCA)), το gDNA περιορισμένου αριθμού κυττάρων μπορεί να ενισχυθεί και να προσδιοριστεί η αλληλουχία του. Ωστόσο, οι τεχνικές WGA δημιουργούν πιθανές αποκλίσεις επειδή η αφθονία συγκεκριμένων αλληλουχιών ποικίλλει και ως εκ τούτου δεν ενισχύονται εξίσου. Ως εκ τούτου, η ενίσχυση του gDNA καθορισμένων πληθυσμών με περιορισμένο αριθμό κυττάρων θέτει σε κίνδυνο την ποσοτική ανάλυση της μεταγονιδιωματικής.

Οι τελευταίες εξελίξεις στις τεχνικές ενίσχυσης ενός γονιδιώματος επιτρέπουν την SCG χρησιμοποιώντας φυσικό διαχωρισμό κυττάρων (συνήθως με FACS σε πλάκες 96 φρεατίων), κυτταρική λύση και WGA. Ένα ενισχυμένο γονιδίωμα από ένα μόνο κύτταρο μπορεί στη συνέχεια να αναλυθεί. Ενώ η μεταγονιδιωματική επιτυγχάνεται με τη συλλογή της κοινότητας μικροοργανισμών, την εξαγωγή και τον προσδιορισμό αλληλουχίας του συνολικού DNA, η SCG διαχωρίζει και μελετά μεμονωμένα κύτταρα από την κοινότητα μικροοργανισμών. Τα ληφθέντα δεδομένα αλληλουχίας παρέχουν ποσοτικές πληροφορίες για τη γονιδιωματική μεταβλητότητα σε πληθυσμούς μικροοργανισμών. Οι εισαγωγές γονιδίων, οι διαγραφές, οι διπλές και οι ανακατατάξεις γονιδιώματος μπορούν να μελετηθούν σε μονοκύτταρικό επίπεδο. Με αυτόν τον τρόπο οι πολύπλοκες μεταβολικές οδοί μπορούν να αναλυθούν για ένα μεμονωμένο κύτταρο.

Μονοκυτταρική απομόνωση και επεξεργασία

Η μελέτη του γονιδιώματος και η ρύθμισή του σε επίπεδο πληθυσμού γίνεται με την ανάλυση εκατομμυρίων κυττάρων ταυτόχρονα. Ωστόσο, τέτοιες έρευνες δεν επιτρέπουν την προβολή της ετερογένειας στα βιολογικά συστήματα, ούτε χαρακτηρίζουν την τρέχουσα κατάσταση του πληθυσμού. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο η SCG κερδίζει όλο και περισσότερη δημοτικότητα για τη μελέτη τόσο των καλλιεργήσιμων όσο και ιδιαίτερα των μη καλλιεργήσιμων μικροοργανισμών. Η διαδικασία λήψης, πολλαπλασιασμού και αλληλουχίας γενετικού υλικού είτε από ζωντανά είτε από νεκρά κύτταρα είναι σχετικά απλή. Πρώτα πρέπει να απομονωθεί και να λυθεί το κύτταρο και στη συνέχεια να ενισχυθεί το γενετικό υλικό που απελευθερώνεται και να δημιουργηθεί η γονιδιωματική βιβλιοθήκη.

Μία από τις προσεγγίσεις για την απομόνωση ενός κυττάρου είναι η μικροεπεξεργασία. Τα κύτταρα ενδιαφέροντος προσδιορίζονται, απομονώνονται και εξετάζονται μικροσκοπικά. Τα κατάλληλα κύτταρα απομονώνονται χρησιμοποιώντας μικροπιπέτα, πηγή λέιζερ, οπτικές λαβίδες ή με μικρορευστότητα σε πραγματικό χρόνο. Με τη χρήση μικρορευστών, μπορεί να επιλεγεί ένας επιθυμητός φαινότυπος που σχετίζεται με ένα συγκεκριμένο γονιδίωμα. Επιπλέον, τα κύτταρα μπορούν εύκολα να παρατηρηθούν πριν από τη σύλληψη.

Μια άλλη προσέγγιση είναι η τυχαία ενθυλάκωση. Τα κύτταρα επιλέγονται τυχαία με σειριακή αραίωση. Το αραιωμένο δείγμα μπορεί στη συνέχεια να μεταφερθεί σε μικροκύτταρα ή τα κύτταρα μπορούν να ενθυλακωθούν με μικροσταγονίδια. Χρησιμοποιώντας αυτήν την τεχνική, μεμονωμένα κύτταρα μπορούν να διαχωριστούν, να υποβληθούν σε επεξεργασία και να υποβληθούν σε γονιδιωματική ανάλυση.

Η κυτταρομετρία ροής είναι η πιο δημοφιλής διαδικασία τυχαίας ενθυλάκωσης. Το FACS επιτρέπει την απομόνωση κυττάρων που διαθέτουν συγκεκριμένα κριτήρια, όπως το μέγεθος, το σχήμα, το χρώμα ή ακόμη και η παρουσία συγκεκριμένων νουκλεϊκών οξέων ή δραστηριοτήτων, χρησιμοποιώντας φθορίζουσες βαφές (Σχμ. 4). Ένα από τα κύρια πλεονεκτήματα του FACS είναι η υψηλή απόδοση, η υψηλή ταχύτητα ταξινόμησης και η ικανότητα διάκρισης ζωντανών κυττάρων. Επιπλέον, το FACS μπορεί να ανιχνεύσει την παρουσία κυττάρων σε ένα σταγονίδιο, να απορρίψει τα κενά σταγονίδια και να μεταφέρει τα κύτταρα με τις επιθυμητές ιδιότητες σε πλάκες πολλαπλών φρεατίων / μικροτιτλοδότησης. Στη συνέχεια, τα κύτταρα μπορούν να διαλύονται και τα γονιδιώματα μπορούν να ενισχυθούν σε μεμονωμένα φρεάτια.

Μια άλλη δυνατότητα για απομόνωση ενός κυττάρου είναι η τεχνολογία μικροσταγονιδίων (Σχμ. 4). Τα μικροσταγονίδια είναι το γαλάκτωμα που σχηματίζεται όταν τα κύτταρα στην υδατική φάση αναμειγνύονται έντονα με λάδι. Σταγονίδια λαδιού περικλείουν τα κύτταρα στην υδατική φάση. Αρχικά, η PCR που πραγματοποιήθηκε σε ένα γαλάκτωμα θεωρήθηκε ότι ήταν πολύ πιο συγκεκριμένη από την ανάλυση κυττάρων μόνο στην υδατική φάση. Προτάθηκε ότι οι αποδόσεις των προϊόντων αντίδρασης είναι μεγαλύτερες και σχηματίζονται λιγότερα χιμαιρικά υποπροϊόντα. Επιπλέον, τα σταγονίδια που σχηματίστηκαν περικλείουν περιορισμένο αριθμό προτύπων μορίων (ιδανικά μόνο ένα). Οι τελευταίες εξελίξεις στα μικρορευστά επιτρέπουν τον έλεγχο του μεγέθους των σταγονιδίων (νανολίτρο ή ακόμα και του πικολίθου), παρέχοντας υδατικά ομοιόμορφα (μονοδιάσπαρτα) σταγονίδια στο λάδι. Ένα από τα κύρια πλεονεκτήματα του διφασικού συστήματος μικροσταγονιδίων έναντι του FACS είναι η δυνατότητα χειρισμού μεμονωμένων κυττάρων ως διαχωρισμένων μονάδων. Κάθε σταγονίδιο λειτουργεί ως ανεξάρτητο φρεάτιο όπου τα κύτταρα μπορούν να αναπτυχθούν και αργότερα να υποβληθούν σε διαλογή για τα προϊόντα που εκφράζονται. Το απελευθερωμένο gDNA μπορεί να ενισχυθεί αποτελεσματικά σε μικροσταγονίδια και να χρησιμοποιηθεί για την προετοιμασία της βιβλιοθήκης αλληλουχίας. Τα κύτταρα βακτηρίων, ζυμομυκήτων, φυτών, εντόμων και θηλαστικών μπορούν εύκολα να μελετηθούν χρησιμοποιώντας την τεχνολογία μικροσταγονιδίων σε αγαρόζη ή άλλα μικροπηκτώματα. Ακόμα και πολυκύτταροι οργανισμοί μπορούν να εγκλωβιστούν και να αναπτυχθούν σε σταγονίδια. Υποθετικά, είναι δυνατόν να μετρηθεί οποιοδήποτε εκκρινόμενο μόριο για το οποίο υπάρχει ένας προσδέτης με φθορισμό επισημασμένο. Επιπλέον, οι δραστηριότητες διαφόρων κυτταρικών πρωτεϊνών μπορούν να παρακολουθούνται.

Σχήμα 4. Μονοκυτταρικές τεχνικές απομόνωσης

Προσεγγίσεις για τη μελέτη διαφόρων κυττάρων

Τα ζωντανά κύτταρα μπορούν γενικά να ταξινομηθούν σε βακτήρια, αρχαιά και ευκαρυώτες. Αν και οι ιοί δεν θεωρούνται «ζωντανοί», αποτελούν σημαντικό μέρος των μελετών της επιστήμης της ζωής. Υπάρχουν διάφορες μονοκυτταρικές αναλύσεις που είναι κατάλληλες για διαφορετικούς οργανισμούς.

Οι ιοί υπάρχουν σχεδόν σε κάθε περιβάλλον. Είναι οι πιο άφθονες και ποικίλες βιολογικές οντότητες. Ωστόσο, για την απομόνωση ενός ιού και την αλληλουχία του γονιδιώματός του, πρέπει πρώτα να δημιουργηθεί ένα κατάλληλο καλλιεργήσιμο σύστημα ξενιστή ιού. Για παράδειγμα, τα ευκαρυωτικά φύκια είναι ένας ξενιστής μιας απίστευτης ποικιλίας ιών. Ωστόσο, χρησιμοποιώντας τόσο τα συστήματα FACS όσο και τα σταγονίδια, οι ιοί θεωρητικά μπορούν να απομονωθούν χωρίς εξάρτηση από το σύστημα του ιού-ξενιστή.

Τα αρχαία και τα βακτήρια έχουν παρόμοια κυτταρική δομή. Μόνο οι διαφορές στη σύνθεση και την οργάνωση των κυττάρων διαχωρίζουν αυτούς τους δύο μικροοργανισμούς. Τα βακτηριακά κύτταρα έχουν συνήθως διάμετρο 0,5-5,0 μm, ενώ τα αρχαιά μπορεί να είναι μεγαλύτερα και να φτάνουν τα 15 μm σε διάμετρο. Βασικά, όλες οι μέθοδοι που περιγράφονται παραπάνω μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον διαχωρισμό και την επεξεργασία μεμονωμένων αρχαίων και βακτηριακών κυττάρων. Ωστόσο, κατά τη διάρκεια του FACS υψηλά ρεύματα μπορεί να επιβραδύνουν την ανάπτυξη αυτών των οργανισμών.

Οι ευκαρυώτες διαφοροποιούνται από τους άλλους τομείς ζωής από τον πυρήνα που συνδέεται με τη μεμβράνη και τα οργανίδια που συνδέονται με τη μεμβράνη. Μπορεί να είναι πολυκύτταροι ή μονοκύτταροι οργανισμοί. Το μέγεθος των κυττάρων κυμαίνεται συνήθως από περίπου 10-100 μm ή είναι δέκα φορές μεγαλύτερο από τα βακτήρια. Η αραίωση, το FACS και η διαλογή σταγονιδίων είναι όλες οι κατάλληλες μέθοδοι για την απομόνωση των ευκαρυωτικών κυττάρων.

Οι πολυκύτταροι οργανισμοί θεωρητικά μπορούν επίσης να απομονωθούν και να υποστούν επεξεργασία με διάφορες μεθόδους. Το FACS για παράδειγμα μπορεί εύκολα να ταξινομήσει πολυκύτταρους οργανισμούς. Εάν επωαστούν σε σταγονίδια για αρκετό χρονικό διάστημα, οι μονοκύτταροι οργανισμοί μπορούν να συνθέσουν μια πρωτεΐνη ή ένα πρόσδεμα και να έχουν την ευκαιρία να πολλαπλασιαστούν, δημιουργώντας δυνητικά μια πολυκυτταρική δομή.

Οι μοριακές μελέτες του περιβάλλοντος και της οικολογίας μας αποκτούν όλο και περισσότερες γνώσεις για τις ζωντανές κοινότητες. Με την ανάπτυξη μοριακών εργαλείων, ειδικά μηχανών αλληλουχίας, κατέστη δυνατή η ταξινόμηση ολόκληρων κοινοτήτων από επιλεγμένα περιβάλλοντα. Οι πρόσφατες εξελίξεις στις τεχνολογίες ενός κυττάρου διευκολύνουν την απομόνωση και την ενίσχυση του γονιδιωματικού υλικού από μεμονωμένα κύτταρα και επιτρέπουν τη δομή πολυάριθμων βιβλιοθηκών που βασίζονται σε αλληλουχίες. Επιπλέον, τα δεδομένα που λαμβάνονται από το SCG συμπληρώνουν δεδομένα που λαμβάνονται από τη μεταγονιδιωματική.

Προσεγγίσεις Omics στην βιομηχανική Βιοτεχνολογία και Μηχανική Βιοεπεξεργασίας

Η βιοτεχνολογία χρησιμοποιεί βιολογικές διαδικασίες, οργανισμούς ή συστήματα για τη δημιουργία προϊόντων και τεχνολογιών που βελτιώνουν τις ανθρώπινες ζωές. Η χρήση βιολογικών συστημάτων για την παραγωγή βιοπροϊόντων εμπορικής σημασίας αποτελεί βασικό συστατικό της βιομηχανίας βιοτεχνολογίας. Αυτή η βιοτεχνολογική προσέγγιση έχει βρει εφαρμογή σε διάφορους τομείς: βιομηχανίες ενέργειας, υλικών, φαρμάκων, τροφίμων, γεωργίας και καλλυντικών. Τα βιοπροϊόντα που παράγονται από διαδικασίες βιοκατασκευής είναι συνήθως μεταβολίτες και πρωτεΐνες, οι οποίες λαμβάνονται από κύτταρα, ιστούς και όργανα. Τα βιολογικά συστήματα που συνθέτουν αυτά τα βιοπροϊόντα μπορεί να είναι φυσικά ή να τροποποιηθούν με γενετική μηχανική, μεταβολική μηχανική, συνθετική βιολογία και μηχανική πρωτεϊνών. Οι τεχνολογίες Omics έχουν μεγάλη σημασία για τη βιοτεχνολογία και τη μεταβολική μηχανική βοηθώντας στον χαρακτηρισμό και την κατανόηση των μεταβολικών δικτύων. Ο σημαντικός όγκος της γνώσης που αποκτήθηκε από πειράματα που βασίζονται στην τεχνολογία Omics μπορεί να εφαρμοστεί στην ανάπτυξη βιοτεχνολογικών εργαλείων και στην πρόοδο της μεταβολικής μηχανικής. Αυτό επιτρέπει τη χειραγώγηση πολύπλοκων βιολογικών συστημάτων προς τη δημιουργία ισχυρών βιομηχανικών στρατηγικών βιοκατασκευής.

Βιοτεχνολογία καθοδηγούμενη από την τεχνολογία Omics

Τα εργαλεία Omics χρησιμοποιούνται όλο και περισσότερο στην ανάπτυξη βιοτεχνολογικών διαδικασιών και στην παραγωγή πολλών ζωτικών προϊόντων. Η εφαρμογή τεχνολογιών omics στον χαρακτηρισμό και την κατανόηση των βιολογικών συστημάτων επέτρεψε την επιλογή και πρόβλεψη φαινοτύπων, γεγονός που διευκολύνει τη βελτιστοποίηση των βιοτεχνολογικών διαδικασιών προς την κατεύθυνση της ενισχυμένης παραγωγής (σε ποιότητα και ποσότητα) εμπορικά συναφών προϊόντων (Σχήμα 5).

Fig. Σχήμα 5. Εργαλεία Omics στην Βιοτεχνολογία

Παραγωγή Βιοκαυσίμων και Βιοπροιόντων

Η μικροβιακή παραγωγή φυσικών ενώσεων αντιπροσωπεύει μια ελκυστική και πιο βιώσιμη εναλλακτική λύση στα παραδοσιακά πετροχημικά. Η εφαρμογή του οδήγησε σε έναν αυξανόμενο κατάλογο φυσικών προϊόντων και χημικών προϊόντων υψηλής αξίας. Αμέσως, η χρήση λιγνοκυτταρινικής βιομάζας αντιπροσωπεύει μια οικονομική προσέγγιση για την παραγωγή βιοκαυσίμων και βιοπροϊόντων. Ωστόσο, για να επιτευχθεί σταθερή μετατροπή πρώτων υλών χαμηλού κόστους σε προϊόντα προστιθέμενης αξίας σε βιομηχανικά επίπεδα χρειάζονται συστηματικά σχέδια μηχανικής. Ο κύκλος Σχεδιασμός-Δημιουργία-Δοκιμή-Μάθηση (DBTL) γίνεται μια ολοένα και περισσότερο εφαρμόσιμη προσέγγιση για πειράματα μεταβολικής μηχανικής. Αντιπροσωπεύει ένα συστηματικό και αποτελεσματικό εργαλείο για να αναγκάσει τις αναπτυξιακές προσπάθειες για βιοκαύσιμα και βιολογικά προϊόντα. Ο κύκλος DBTL χρησιμοποιεί σε προσέγγιση πυριτίου τον σχεδιασμό και την κατασκευή γενετικών κατασκευών σε μικροβιακούς ξενιστές. Στη συνέχεια, οι πληροφορίες που λαμβάνονται από τεχνολογίες omics, κατά τη φάση δοκιμής του κύκλου, μεταφέρονται στις διαδικασίες εκμάθησης (Σχήμα 6). Αυτό που μαθαίνεται στη συνέχεια επιστρέφει σε νέους κύκλους σχεδίασης για να επιτευχθεί περαιτέρω ανάπτυξη και βελτιστοποίηση. Έτσι, διευκολύνεται η ταχεία βελτιστοποίηση των μικροβιακών στελεχών που παράγουν οποιαδήποτε χημική ένωση ενδιαφέροντος. Το πιο αδύναμο σημείο στη ροή εργασιών του κύκλου DBTL είναι η διαδικασία εκμάθησης, καθώς τα μαθηματικά μοντέλα είναι τόσο καλά όσο και οι υποθέσεις τους. Ως εκ τούτου, απαιτούνται τόσο υψηλής ποιότητας όσο και μεγάλα σύνολα δεδομένων omics για τη βελτίωση των μοντέλων εκπαίδευσης, εξασφαλίζοντας αυξημένη ακρίβεια και αξιοπιστία της διαδικασίας Μάθησης.

Σχήμα 6. Κύκλος DBTL για βελτιστοποίηση των βιοκαυσίμων και των βιοπροιόντων

Συχνά στον κύκλο DBTL οι πληροφορίες γονιδιωματικής αλληλουχίας είναι η παραδοσιακή προσέγγιση που χρησιμοποιείται στα αρχικά στάδια μιας μελέτης. Για παράδειγμα, η αλληλουχία γραμμωτού κώδικα (Bar-seq) (μέθοδος που χρησιμοποιεί ένα σύντομο τμήμα DNA από συγκεκριμένο γονίδιο ή γονίδια) μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη της δυναμικής του πληθυσμού των βιβλιοθηκών διαγραφής Saccharomyces cerevisiae κατά την καλλιέργεια βιοαντιδραστήρων, επιτρέποντας τον προσδιορισμό των παραγόντων που επηρεάζουν την ποικιλομορφία μιας μεταλλαγμένης δεξαμενής. Η καθοδηγούμενη προσέγγιση αλληλουχίας με ένα κύτταρο μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό βασικών μεταλλαγμένων υποκινητών για τη ρύθμιση των επιπέδων έκφρασης, διευκολύνοντας έτσι τη δυναμική ρύθμιση της μικροβιακής ανάπτυξης. Εφαρμόστηκαν προσεγγίσεις καθοδηγούμενες από πρωτεομικά για να κατασκευάσουν πλατφόρμες βιοσύνθεσης πολυκετιδίου για in vitro παραγωγή αδιπικού οξέος σε ζύμη. Επιπλέον, η μεταβολική επιτρέπει την εκτίμηση της ροής των οδών, τη χρήση της πηγής άνθρακα και την ανισορροπία συμπαράγοντα, τα οποία συμβάλλουν στην ταυτοποίηση των σημείων συμφόρησης. Αυτή η κατευθυνόμενη μεταβολική προσέγγιση χρησιμοποιείται ήδη για τον χαρακτηρισμό της παραγωγής κανναβινοειδών σε μηχανική S. cerevisiae. Τα ανάλογα κανναβινοειδών έχουν εντοπιστεί που παράγονται από πολλά γονίδια τυχαίων μονοπατιών. Επιπλέον, η εφαρμογή των μεταβολικών βοήθησε τον σχεδιασμό και τη βελτιστοποίηση μιας νέας οδού μεβαλονικού διποφενικού διφωσφορικού ισοπεντενυλίου στο Ε. Coli για παραγωγή αλκοόλης C5. Πρόσφατα, ορισμένοι συγγραφείς χρησιμοποίησαν τον κύκλο DBTL για να σχεδιάσουν το Rhodosporidium toruloides, ένα ελαιώδες είδος ζύμης που αναπτύσσεται σε λιγνοκυτταρινικά υλικά και παράγει το διτερπένιο εντα-καυρένιο, ένα πιθανό θεραπευτικό, που παρουσιάζει αντιμικροβιακά, αντιφλεγμονώδη, καρδιαγγειακά, διουρητικά, αντι-HIV και κυτταροτοξικές επιδράσεις.

Γεωργία και Τροφική Βιοτεχνολογία

Πρόσφατες καινοτομίες στη γεωργική βιοτεχνολογία έχουν οδηγήσει σε νέες ποικιλίες φυτών, που έχουν σχεδιαστεί από τεχνολογία ανασυνδυασμένου DNA και ανταποκρίνονται καλύτερα στις απαιτήσεις της αγοράς και στις περιβαλλοντικές προκλήσεις. Στην πραγματικότητα, τα εργαλεία omics στη γεωργική βιοτεχνολογία έχουν χρησιμοποιηθεί για την ενίσχυση των επιθυμητών φαινοτυπικών χαρακτηριστικών (π.χ. χρώμα, γεύση, ανοχή στην ξηρασία, αντοχή στα φυτοφάρμακα κ.λπ.). Η τεχνολογία Omics παίζει ρόλο όχι μόνο στη βελτίωση της ποιότητας, της συνέπειας και της παραγωγικότητας των καλλιεργειών, αλλά και στην ανάπτυξη καλλιεργειών τροφίμων με ενισχυμένη θρεπτική σύνθεση. Επιπλέον, η βιολογία συστημάτων που βασίζονται σε ομόλογα βοηθά στην κατανόηση των αλληλεπιδράσεων μεταξύ των «ΟΜΕ» και παρέχει συνδέσεις μεταξύ γονιδίων και συγκεκριμένων χαρακτηριστικών.

Σε καλλιεργήσιμες εκτάσεις το έδαφος είναι πιο επιρρεπές σε απώλεια δομής, οργανικής ύλης, ορυκτών και διάβρωσης. Συνεπώς, καταβάλλονται προσπάθειες, μέσω της γεωργικής βιοτεχνολογίας, να παρέχεται μια συνεχής παροχή θρεπτικών συστατικών απαραίτητων για την ανάπτυξη των καλλιεργειών. Αναπόσπαστο μέρος αυτής της προσέγγισης είναι η χρήση βιολιπασμάτων. Αυτά είναι σκευάσματα που περιέχουν εξειδικευμένα μικροβιακά εμβόλια που μπορούν να διορθώσουν, να κινητοποιήσουν, να διαλυτοποιήσουν ή να αποσυνθέσουν θρεπτικές πηγές. Τα βιολιπάσματα εφαρμόζονται γενικά μέσω σπόρων ή εδάφους και ενισχύουν την πρόσληψη θρεπτικών συστατικών από τα φυτά. Η ευρεία εφαρμογή αυτής της προσέγγισης, ωστόσο, παρεμποδίστηκε από τις διακυμάνσεις των απαντήσεων των μικροβιακών εμβολιασμών σε χωράφια και καλλιέργειες. Ως αποτέλεσμα, υπάρχει επιτακτική ανάγκη να κατανοηθούν καλύτερα οι μηχανισμοί που διέπουν τις αλληλεξαρτήσεις μεταξύ των μικροβιακών κοινοτήτων του εδάφους και της παραγωγικότητας των φυτών ξενιστών. Πρόσφατες μελέτες γονιδιωματικής και μεταβολικής έδειξαν ότι συγκεκριμένα βακτήρια ριζόσφαιρας προτιμούν φυσικά ορισμένα αρωματικά οργανικά οξέα που εκκρίνονται από τα φυτά. Αυτό το γεγονός πρότεινε ότι τα χαρακτηριστικά εξώθησης των φυτών και τα χαρακτηριστικά πρόσληψης μικροβιακού υποστρώματος αλληλεπιδρούν και σχηματίζουν συγκεκριμένα πρότυπα δημιουργείας μιας μικροβιακής κοινότητας. Επιπλέον, η εφαρμογή της γονιδιωματικής και της μεταγραφής στη μελέτη της πρόσληψης φωσφορικών από διάφορα μικροφύκη αποκάλυψε μια σειρά μεταφορέων Pi που έχουν συγκεκριμένα πρότυπα έκφρασης σε σχέση με τη διαθεσιμότητα του Ρ. Επί του παρόντος, χρησιμοποιούνται τεχνικές omics για τη μελέτη σύνθετων ριζοσφαιρικών ενδοεπικοινωνιών, που είναι ζωτικής σημασίας για την ανάπτυξη νέων βιολιπασμάτων, προωθώντας έτσι τη σταθερή ανάπτυξη των φυτών, την καλύτερη παραγωγικότητα και την απόδοση των καλλιεργειών.

Στον σχετικό τομέα της βιοτεχνολογίας τροφίμων, η εφαρμογή μεταγραφικών και μεταβολικών έδειξε ότι το Bacillus pumilus LZP02 προάγει την ανάπτυξη των ριζών του ρυζιού ενισχύοντας τον μεταβολισμό των υδατανθράκων και τη βιοσύνθεση φαινυλοπροπανοειδών. Επιπλέον, η εφαρμογή τεχνικών omics στη βιομηχανική αμύλου παρέχει καλύτερη κατανόηση των σημαντικότερων ενζύμων για τη βιοσύνθεσή του. Αυτό διευκολύνει την πρόβλεψη για τον τρόπο τροποποίησης των φαινοτύπων που σχετίζονται με το άμυλο και εξασφαλίζει περαιτέρω πρόοδο στον ερευνητικό τομέα της βιοτεχνολογίας αμύλου ρυζιού. Το “Omics” βοηθά επίσης στην επίλυση ζητημάτων που σχετίζονται με την ποιότητα και την ιχνηλασιμότητα των τροφίμων, την προστασία της προέλευσης των τροφίμων και την ανακάλυψη βιοδεικτών πιθανών προβλημάτων ασφάλειας τροφίμων. Η εκ των προτέρων διερεύνηση του μικροβιώματος του κρασιού έχει μεγάλη επιρροή για τη βιομηχανία κρασιού βοηθώντας στην καλύτερη κατανόηση των παραγόντων που μετατρέπουν τα σταφύλια σε κρασί, συμπεριλαμβανομένης της γεύσης και του αρώματος. Ο χαρακτηρισμός, χρησιμοποιώντας τεχνικές Omics, των πολύπλοκων σχέσεων μεταξύ αυτών των μικροοργανισμών, του υποστρώματος και του περιβάλλοντος, είναι απαραίτητος για τη διαμόρφωση της παραγωγής κρασιού. Τέλος, ο συνδυασμός τεχνολογιών omics με την  γονιδιωματική επεξεργασία μικροοργανισμών τροφίμων μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη δημιουργία βελτιωμένων στελεχών προβιοτικών, την ανάπτυξη καινοτόμων βιοθεραπευτικών και την τροποποίηση της δομής της μικροβιακής κοινότητας σε μήτρες τροφίμων.

Τεχνολογίες OMICs” και COVID-19

Η ασθένεια του κορωνοϊού 2019 (COVID-19) χαρακτηρίζεται από σοβαρό οξύ αναπνευστικό σύνδρομο κορωνοϊού 2 [δηλαδή, SARS-CoV-2, ο οποίος συνδέεται με τον υποδοχέα ACE2 στον πνεύμονα και άλλα όργανα]. Λόγω της παγκόσμιας εξάπλωσής της έχει ανακοινωθεί παγκόσμια πανδημία και έχει επιβραδυνθεί μεγάλο μέρος της παγκόσμιας οικονομίας. Μέχρι τον Απρίλιο του 2021 υπάρχουν περισσότερα από 138 εκατομμύρια επιβεβαιωμένα κρούσματα και 2,5 εκατομμύρια επιβεβαιωμένοι θάνατοι παγκοσμίως (https://www.worldometers.info/coronavirus/). Έτσι, υπάρχει επείγουσα ανάγκη για ένα αποτελεσματικό αντίμετρο για τον μετριασμό της εξάπλωσης της πανδημίας.

Συνεπώς, συνεχίζονται οι προσπάθειες για την ταχεία παρακολούθηση της ανάπτυξης και παραγωγής ασφαλών και αποτελεσματικών εμβολίων κατά του SARS-CoV-2. Η προηγούμενη γνώση του SARS και του αναπνευστικού συνδρόμου της Μέσης Ανατολής (MERS) διευκόλυνε τη στόχευση της πρωτεΐνης αιχμής ως ιικού αντιγόνου (μέσω του υποδοχέα ACE2). Επιπλέον, η αλληλουχία γονιδιώματος του SARS-CoV-2 τον Ιανουάριο του 2020 επέτρεψε την επιτάχυνση της ανάπτυξης mRNA επόμενης γενιάς και πλατφορμών εμβολίων που κωδικοποιούν το αντιγόνο. Μόλις εγχυθεί σε έναν ξενιστή, το mRNA, εγκλωβισμένο σε λιπιδικά νανοσωματίδια, παραμένει στο κυτταρόπλασμα. Όταν χρησιμοποιείται DNA, εγκλωβισμένο σε εξασθενημένο φορέα αδενοϊού, εισέρχεται στον πυρήνα. Το κύτταρο ξενιστής μεταφράζει αυτά τα γενετικά υλικά στην πρωτεΐνη αιχμής. Εγκαθίσταται στην επιφάνεια του κυττάρου και προκαλεί μια προσαρμοστική ανοσοαπόκριση που αντιμετωπίζεται από τα Τ κύτταρα (π.χ., CD4+ και CD8+) και Β κύτταρα (δηλαδή, αντισώματα). Αυτά τα εμβόλια αναφέρθηκαν ότι ήταν αποτελεσματικά έναντι του SARS-CoV-2 σε πρόσφατες κλινικές δοκιμές, γεγονός που υπογραμμίζει τη σημασία των γονιδιωματικών στη νέα εποχή ανάπτυξης εμβολίων.

Από την αρχή του ξεσπάσματος του SARS-CoV-2 δημιουργήθηκε ένας χάρτης αλληλεπίδρασης πρωτεΐνης και αποκαλύφθηκαν στόχοι με βάση την πρωτεϊνομετρική προσέγγιση για επαναχρησιμοποίηση φαρμάκων. Εφαρμόζοντας πρωτεϊνομετρική ανάλυση κλωνοποιήθηκαν 26 από τις 29 πρωτεΐνες SARS-CoV-2, επισημάνθηκαν η συγγένεια και εκφράστηκαν σε ανθρώπινα κύτταρα και ταυτοποιήθηκαν οι σχετικές πρωτεΐνες. Συνολικά 66 ανθρώπινες πρωτεΐνες ή παράγοντες ξενιστές ανακαλύφθηκαν ως πιθανοί στόχοι φαρμάκων 69 ενώσεων. Δύο σετ αυτών των φαρμακολογικών παραγόντων έδειξαν αντιική δράση. Επιπλέον, πραγματοποιήθηκαν υπολογιστικές ανοσοπρωτεομικές μελέτες υποστηρίζοντας τις εργαστηριακές έρευνες και επιτρέποντας την αξιολόγηση της ειδικότητας των διαγνωστικών προϊόντων, την πρόβλεψη πιθανών ανεπιθύμητων ενεργειών των εμβολίων και τη μείωση της χρήσης ζωικών μοντέλων.

Επιπλέον, πρόσφατα αναπτύχθηκε μια μέθοδος βασισμένη στη μεταβολική που είναι σε θέση να διακρίνει τους ασθενείς με COVID-19 από υγιείς μάρτυρες μέσω ανάλυσης 10 μεταβολιτών πλάσματος. Επιπλέον, τα δεδομένα από τη μελέτη της λιπιδωμικής υποδηλώνουν ότι εμπλουτισμένα εξωσωμικά γαγγλιοσιδικά εξωσωμίδια θα μπορούσαν να εμπλέκονται σε παθολογικές διεργασίες. Οι έρευνες για πρωτεϊνομεταλλικές και μεταβολικές επιδράσεις σε ορούς ασθενών με COVID-19 αποκάλυψαν ότι η μόλυνση από SARS-CoV-2 προκαλεί μεταβολική δυσρύθμιση του μεταβολισμού των μακροφάγων και των λιπιδίων, αποκοκκίωση των αιμοπεταλίων, οδούς του συστήματος συμπληρώματος και μαζική μεταβολική καταστολή. Η ανάλυση των μεταβολικών υπογραφών πλάσματος έδειξε παρόμοιο προφίλ με εκείνο που περιγράφεται για το σύνδρομο σήψης. Επιπλέον, τα αποτελέσματα της μεταγραφής έδειξαν αυξημένη ρύθμιση των γονιδίων που σχετίζονται με την οξειδωτική φωσφορυλίωση τόσο σε περιφερειακά μονοπύρηνα λευκοκύτταρα όσο και σε βρογχοκυψελιδικό υγρό πλύσης. Όλες αυτές οι πληροφορίες υποδηλώνουν έναν κρίσιμο ρόλο της μιτοχονδριακής δραστηριότητας κατά τη διάρκεια της μόλυνσης από SARS-CoV-2. Η κατανόηση της κλινικής παρουσίασης του COVID-19 καθώς και των μεταβολικών, πρωτεομικών και γενετικών προφίλ θα μπορούσε να βοηθήσει στην ανακάλυψη συγκεκριμένων διαγνωστικών, προγνωστικών και προγνωστικών βιοδεικτών, εξασφαλίζοντας την ανάπτυξη πιο επιτυχημένης ιατρικής θεραπείας. Επιπλέον, η διαφοροποίηση των μεταβολικών βιοδεικτών σοβαρών και ήπιων καταστάσεων ασθένειας στον πνεύμονα κατά τη διάρκεια λοιμώξεων του αναπνευστικού θα μπορούσε να οδηγήσει στην ανακάλυψη νέων θεραπευτικών που ρυθμίζουν τα συμπτώματα και τη σοβαρότητα της νόσου.

Διατροφική έρευνα βασιζόμενη στην τεχνολογία Omics

Πάνω από μια δεκαετία έχει περάσει από τότε που πρωτοεμφανίστηκε η ιδέα της διατροφογενομικής. Η διατροφογενομική, που αναφέρεται επίσης ως διατροφική γονιδιωματική, διατροφική omics ή nutri-omics, μπορεί να οριστεί ως ένας τομέας έρευνας για τα τρόφιμα και τη διατροφή χρησιμοποιώντας βαθιές αναλύσεις μορίων ή άλλα φυσικά φαινόμενα.

Λαμβάνοντας υπόψη την πολυπλοκότητα του ανθρώπινου σώματος και τις διάφορες αλληλεπιδράσεις του με τα τρόφιμα, είναι κατανοητό ότι οι ολιστικές αναλύσεις των αλληλεπιδράσεων τροφίμων-σώματος αποτελούν σημαντική προϋπόθεση για την καλύτερη κατανόηση της επίδρασης των συστατικών της διατροφής. Η κύρια υπόθεση είναι ότι ο συνδυασμός διαφορετικών πλατφορμών omics θα δώσει μια βαθύτερη εικόνα για την επιρροή των συστατικών των τροφίμων και τον μηχανισμό των ενεργειών τους.

Γονιδιωματική και διατροφή

Τα ανθρώπινα γονίδια έχουν διαφορετικές παραλλαγές στον πληθυσμό. Έχοντας υπόψη ότι η ανταπόκριση στη διατροφή είναι μια πολυγονιδιακή διαδικασία, δεν αποτελεί έκπληξη το γεγονός ότι τα μη συγγενικά άτομα μπορεί να ανταποκριθούν διαφορετικά. Η βασική τους υπόθεση που προτάθηκε τα τελευταία χρόνια ανέφερε ότι η γενετική διακύμανση βασίζεται στη διακύμανση των διαταραχών που σχετίζονται με τη διατροφή και τον κίνδυνο για ασθένειες. Στην πραγματικότητα, η διατροφογενετική προσπαθεί να εξηγήσει πώς και σε ποιο βαθμό τα χαρακτηριστικά και οι διαταραχές που σχετίζονται με τη διατροφή επηρεάζονται από τη γενετική διακύμανση. Με άλλα λόγια, τα βασικά ερωτήματα της διατροφογενετικής είναι:

  • Ποια γονίδια εμπλέκονται στον προσδιορισμό ενός καθορισμένου χαρακτηριστικού;
  • Ποια είναι η λειτουργική ταυτότητα της παραλλαγής με την οποία οι άνθρωποι διαφέρουν για αυτό το χαρακτηριστικό;
  • Πώς μπορεί να χρησιμοποιηθεί αυτή η γνώση προς όφελος του πληθυσμού;

Συνήθως, οι ερευνητές ορίζουν «υποψήφια γονίδια» για ένα χαρακτηριστικό ή διαταραχή και αναζητούν παραλλαγή σε αυτά τα γονίδια. Αυτό περιγράφεται ως η προσέγγιση «βασισμένη σε υποθέσεις» επειδή η επιλογή των γονιδίων βασίζεται στην υποτιθέμενη λειτουργία τους. Για παράδειγμα, τα γονίδια για τις λιποπρωτεΐνες χρησιμοποιούνται ως υποψήφια για παχυσαρκία και τα γονίδια για τη σηματοδότηση της ινσουλίνης – ως υποψήφια για διαβήτη. Άλλοι ελκυστικοί υποψήφιοι στους ανθρώπους είναι τα ορθολογικά γονίδια που κρύβονται στα ζωικά μοντέλα με Μεντελιανό διαχωρισμό ενός χαρακτηριστικού. Ένα πολύ γνωστό παράδειγμα είναι το ποντίκι db/db. Είναι ένα μοντέλο για τον διαβήτη στο οποίο ταυτοποιήθηκε το γονίδιο για τον υποδοχέα λεπτίνης. Ο ανθρώπινος ομόλογος δοκιμάστηκε στη συνέχεια σε άτομα με μειωμένη ανοχή γλυκόζης. Μια παραλλαγή (αλληλόμορφο) του γονιδίου εντοπίστηκε και αποδείχθηκε ότι σχετίζεται με σημαντικά υψηλότερη συχνότητα εμφάνισης διαβήτη σε σύγκριση με τον γενικό πληθυσμό.

Άλλες μέθοδοι που εφαρμόζονται σχετίζονται με τη μελέτη του προτιμώμενου διαχωρισμού ενός αλληλόμορφου από τους γονείς σε ένα προσβεβλημένο παιδί (δοκιμή ανισορροπίας μετάδοσης) ή σε πιο επηρεασμένα αδέλφια (ανάλυση ζεύγους αδελφών). Εάν διαπιστωθεί ότι ένα γονίδιο συνδέεται με το χαρακτηριστικό, μένει να αποδειχθεί εάν το σχετικό ή συνδεδεμένο αλληλόμορφο είναι ο ίδιος ο παράγοντας κινδύνου ή αν θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί μόνο ως δείκτης για μια κοντινή αιτιολογική παραλλαγή. Εάν η γενετική παραλλαγή συνδέεται με τη διακύμανση των αμινοξέων στην πρωτεΐνη, θα μπορούσε να αναπτυχθεί μια λειτουργική δοκιμή και οι αλληλικές πρωτεΐνες μπορούν να συγκριθούν για την ενζυματική τους δράση, τη συγγένεια που συνδέει το DNA κ.λπ.

Μια άλλη προσέγγιση για την αναζήτηση γονιδίων που προκαλούν κίνδυνο για ένα συγκεκριμένο χαρακτηριστικό ή διαταραχή είναι η σάρωση συνολικού γονιδιώματος. Εκατοντάδες πολυμορφισμοί ανιχνεύονται με τυχαία κατανομή στο γονιδίωμα αλλά με γνωστή χρωμοσωμική θέση. Για κάθε πολυμορφική θέση τότε προσδιορίζεται αν υπάρχει συσχέτιση μεταξύ του αλληλόμορφου και του χαρακτηριστικού. Χρησιμοποιώντας αυτήν την προσέγγιση οι τόποι κινδύνου μπορούν να εντοπιστούν για πολλές διαταραχές που σχετίζονται με τη διατροφή του ανθρώπου, όπως η παχυσαρκία και ο διαβήτης.

Μετά τον Δεύτερο Παγκόσμιο Πόλεμο σε πολλές δυτικές χώρες, παρατηρήθηκε ότι τα περιστατικά της δισχιδής ράχης μειώθηκαν σταδιακά. Προτάθηκε ότι η βελτίωση της δίαιτας είχε φέρει αυτό το αποτέλεσμα. Ξεκίνησε μια μεγάλη επιδημιολογική μελέτη. Τα αποτελέσματα που προέκυψαν έδειξαν ότι ο εμπλουτισμός της δίαιτας με βιταμίνες ήταν σε θέση να αποτρέψει την εμφάνιση και την επανεμφάνιση της δισχιδής ράχης σε ανθρώπους με ποσοστό άνω του 50%. Το φολικό οξύ ανακαλύφθηκε ότι είναι η δραστική ουσία και τώρα σε πολλές χώρες η προ-σύλληψη συμπλήρωση φολικού οξέος συνιστάται ως γενικό προληπτικό μέτρο. Ταυτόχρονα, έχει γίνει σαφές ότι όσον αφορά τον κίνδυνο για ένα παιδί με ραχιαία ρίζα, οι γυναίκες στον πληθυσμό μπορούν να χωριστούν σε τρεις ομάδες: [δεν] δεν κινδυνεύουν ακόμη και σε χαμηλή πρόσληψη φυλλικού οξέος, [β] σε κίνδυνο χαμηλά διαιτητικό φυλλικό οξύ αλλά μπορεί να βοηθηθεί από την αυξημένη πρόσληψη φυλλικού οξέος και [c] σε κίνδυνο παρά την επιπλέον πρόσληψη φυλλικού οξέος. Η γενετική προδιάθεση θεωρήθηκε και τα υποψήφια γονίδια που ελήφθησαν από το μεταβολισμό του φυλλικού οξέος εξετάστηκαν για γενετική παραλλαγή. Αυτό οδήγησε στην ανίχνευση των αλληλόμορφων 667C-> T και 1298A-> C στο γονίδιο για μεθυλενοτετραϋδροφολική αναγωγάση (MTHFR) ως παράγοντες κινδύνου. Ωστόσο, αυτά τα αλληλόμορφα κινδύνου ανακαλύπτονται σε κάποιο βαθμό και στις τρεις ομάδες γυναικών, αποδεικνύοντας ότι ο γενετικός έλεγχος στο πλαίσιο μιας εξατομικευμένης διατροφής θα ήταν ανεπαρκής. Επιπλέον, κατέστη σαφές ότι δεν μπορούσαν να εξηγηθούν όλοι οι σχετικοί κίνδυνοι με αυτά τα αλληλόμορφα. Συνεπώς, η αναζήτηση για γενετική παραλλαγή σε άλλα γονίδια συνεχίζεται και μπορεί να βρεθούν νέα υποψήφια γονίδια.

Επί του παρόντος, αρκετές εκατοντάδες γονίδια που σχετίζονται με συγκεκριμένα χαρακτηριστικά και διαταραχές που σχετίζονται με τη διατροφή έχουν ήδη αναγνωριστεί με τη χρήση γενετικών πειραμάτων σε διάφορους πληθυσμούς και τη διερεύνηση συστημάτων μοντέλων σε ζώα και in vitro. Τέλος, η έρευνα για τη διατροφογονιδιωματική και τη διατροφογενετική θα πρέπει να οδηγήσει στην ολοκληρωμένη κατανόηση της αιτιολογίας αυτών των χαρακτηριστικών και διαταραχών σε σχέση με τα αλληλεπιδρώντα γονίδια, τα συστατικά της διατροφής και τον σχετικό κίνδυνο που επιφέρει τόσο η γενετική διακύμανση όσο και η διατροφή. Αυτή η συνδυασμένη γνώση θα επιτρέψει το γενετικό προφίλ κάθε ατόμου και θα εκτιμήσει έτσι τον κίνδυνο του για ανάπτυξη διαταραχών που σχετίζονται με τη διατροφή. Με βάση αυτό το προσωπικό προφίλ κινδύνου γενετικών παραγόντων, θα μπορούσε στη συνέχεια να προταθεί μια «εξατομικευμένη διατροφή» με την οποία θα μπορούσε να προληφθεί ή τουλάχιστον να καθυστερήσει η εμφάνιση μιας διαταραχής. Δη ορισμένες εταιρείες προσφέρουν γενετικές δοκιμές για αλληλόμορφα που διαπιστώθηκε ότι σχετίζονται με ορισμένα χαρακτηριστικά. Για παράδειγμα, το αλληλόμορφο ApoE δοκιμάζεται ως παράγοντας κινδύνου για καρδιαγγειακές διαταραχές και ένα αλληλόμορφο του γονιδίου αφυδρογονάσης αλκοόλης χρησιμοποιείται για να προβλέψει πιθανή ευαισθησία στο αλκοόλ και (ab) χρήση. Ωστόσο, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι η παρουσία συγκεκριμένου αλληλόμορφου μπορεί να ειπωθεί ότι αυξάνει τον κίνδυνο για διαταραχή κατά 100%, ενώ σε απόλυτους όρους ο κίνδυνος θα ήταν συνήθως πολύ μικρός, όπως μια αύξηση από 0,001 σε 0,002. Επιπλέον, η δοκιμή μόνο ενός γενετικού παράγοντα μπορεί να δώσει μια ατελή ή ακόμη και μια λανθασμένη εικόνα της κατάστασης. Σήμερα, δεν έχουμε ιδέα για όλους τους γενετικούς παράγοντες και πώς αλληλεπιδρούν. Μέχρι να συγκεντρωθούν περισσότερες πληροφορίες, οι συμβουλές που βασίζονται σε απλές δοκιμές πρέπει πιθανώς να παραμείνουν απλές, να ακούγονται σαν «πίνετε λιγότερο αλκοόλ» ή «τρώτε λιγότερο κορεσμένο λίπος».

Μεταγραφικά (Transcriptomics) και διατροφή

Η Transcriptomics είναι η πιο ευρέως χρησιμοποιούμενη στην έρευνα τροφίμων λόγω των πολλών πλεονεκτημάτων της τεχνολογίας μικροσυστοιχιών DNA, συμπεριλαμβανομένης της πληρότητας των δεδομένων έκφρασης, των καθιερωμένων πρωτοκόλλων και της υψηλής αξιοπιστίας και αναπαραγωγιμότητας των δεδομένων. Έχει επίσης αναφερθεί η εναλλαγή της παγκόσμιας γονιδιακής έκφρασης ως απάντηση σε διαφορετικές διατροφικές αλλαγές όπως η διατροφική ανεπάρκεια, η νηστεία, η υπερκατανάλωση τροφής και η κατάποση συγκεκριμένων τροφικών παραγόντων. Ως ένα παράδειγμα των προσπαθειών που πραγματοποιήθηκαν για την απόκτηση δεδομένων αναφοράς, πραγματοποιήθηκε μεταγραφική ανάλυση του ήπατος αρουραίων που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με ήπιο θερμιδικό περιορισμό. Κατά τη χρήση πειραμάτων σε ζώα, αποδείχθηκε ότι μια μέτρια μείωση της πρόσληψης τροφής ή ένα τροποποιημένο πρότυπο πρόσληψης θα μπορούσε να είναι επαρκής για την εμφάνιση σημαντικών μεταβολικών μεταβολών. Ως εκ τούτου, είναι σημαντικό να γίνει διάκριση μεταξύ των άμεσων επιδράσεων του συστατικού τροφίμων και των δευτερογενών επιδράσεων που προκαλούνται από την αλλαγή στη διατροφική συμπεριφορά. Όταν οι αρουραίοι έλαβαν δίαιτα με 5 έως 30 % λιγότερη τροφή από εκείνη που καταναλώθηκε από μια ομάδα που έτρωγε κατά βούληση για 1 εβδομάδα ή 1 μήνα, παρατηρήθηκαν αλλαγές στο επίπεδο έκφρασης του cyp4a14 που εξαρτώνται από περιορισμούς. Στην πραγματικότητα, το γονίδιο cyp4a14 προκλήθηκε από ακόμη και χαμηλό επίπεδο θερμιδικών περιορισμών. Αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι το γονίδιο μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως βιοδείκτης για τις ευεργετικές επιδράσεις των τροφίμων στον ενεργειακό μεταβολισμό.

Πρωτεομικά και διατροφή

Πολλές έρευνες για τα τρόφιμα και τη διατροφή έχουν διεξαχθεί χρησιμοποιώντας πρωτεομικές προσεγγίσεις. Αμέσως, η επίδραση του ήπιου θερμιδικού περιορισμού που περιγράφηκε παραπάνω εξετάστηκε επίσης από την πρωτεομική. Εννέα σημαντικά αυξημένες πρωτεΐνες και εννέα μειωμένες πρωτεΐνες έχουν ανιχνευθεί μετά από τη σύγκριση πρωτεϊνών του ήπατος αρουραίων που υποβλήθηκαν σε αγωγή με περιορισμό τροφής 30% με εκείνες ελέγχου. Ο περιορισμός δέκα τοις εκατό προκάλεσε την άνω ρύθμιση 9 πρωτεϊνών και την κάτω ρύθμιση 2 πρωτεϊνών. Μια ενδιαφέρουσα ανακάλυψη ήταν η ρύθμιση της απαγοτίνης, της οποίας η συμμετοχή στη ρύθμιση της μακροζωίας αποκαλύφθηκε πρόσφατα. Αυτό το αποτέλεσμα υποδηλώνει ότι η απαβητίνη μπορεί να εφαρμοστεί ως αποτελεσματικός βιοδείκτης των ευεργετικών επιδράσεων των παραγόντων των τροφίμων. Παρόλο που το τρέχον στάδιο της έρευνας πρωτεομικής είναι πολύ λιγότερο εκτεταμένο σε σύγκριση με εκείνο της μεταγραφικής, η μελέτη που περιγράφεται εδώ μαζί με άλλα ευρήματα της διατροφικής πρωτεομικής δείχνει ότι η πρωτεϊνομετρική είναι ένα πολλά υποσχόμενο εργαλείο για την ανακάλυψη βιοδεικτών.

Μεταβολικά και διατροφή

Περίπου δέκα χιλιάδες διαφορετικοί τύποι κύριων μεταβολιτών υπάρχουν στα σώματα των ζώων, ενώ ο αριθμός των πρωτεϊνών θεωρείται ότι υπερβαίνει τις 100.000. Αυτό το χαρακτηριστικό των μεταβολιτών αναμένεται να έχει ως αποτέλεσμα πιο περιεκτικά χαρακτηριστικά μεταβολικής ανάλυσης από αυτά των πρωτεομικών. Ωστόσο, η ανάλυση των μεταβολιτών είναι στην πραγματικότητα γεμάτη δυσκολίες και συνήθως απαιτεί τη χρήση εξελιγμένων τεχνικών και προσωπικού υψηλού επιπέδου. Μια άλλη δυσκολία προέρχεται από την αφθονία των μεταβολιτών. Ανεξάρτητα από αυτά τα εμπόδια, η μεταβολική είναι ένα ισχυρό εργαλείο στην επιστήμη των τροφίμων και της διατροφής.

Πολλές έρευνες έδειξαν ότι ο μεταβολισμός του εντέρου και του ορού του αίματος επηρεάζεται από την αλλαγή στη σύνθεση του μικροβιώματος του εντέρου. Το μικροβίωμα του εντέρου και η εναλλαγή του σε σχέση με τη δίαιτα είναι απαραίτητα κατά την αξιολόγηση των δοκιμών διαιτητικής παρέμβασης με μεταβολικές τελικές επιδράσεις. Η σύγκριση μεταξύ ποντικών χωρίς μικρόβια που αποικίστηκαν από ανθρώπινη χλωρίδα και συμβατικά ποντίκια έδειξε την πολυπλοκότητα της τροποποίησης της διατροφής με τροποποίηση μικροβιώματος/μεταβολισμού. Σε αυτή τη μελέτη, μελετήθηκε η επίδραση του εντερικού μικροβιώματος στους μεταβολίτες του πλάσματος. Τα δεδομένα αποκάλυψαν ότι περισσότερο από το 10% του μεταβολισμού πλάσματος εξαρτάται άμεσα από το μικροβίωμα. Ορισμένα παραδείγματα για μικροβιακά εξαρτώμενες ενώσεις στο πλάσμα περιλαμβάνουν κιναμικό οξύ, ενώσεις συζευγμένες με γλυκίνη, ιππουρικό οξύ και άλλους μεταβολίτες πλάσματος. Το μικροβίωμα του εντέρου επηρεάζει επίσης άμεσα την ικανότητα του ξενιστή να μεταβολίζει λιπίδια, υδατάνθρακες και πρωτεΐνες και μπορεί να πραγματοποιήσει αρκετές αντιδράσεις αποτοξίνωσης φάσης II. Υπάρχουν επίσης ενδείξεις ότι οι μικροοργανισμοί του εντέρου χρησιμοποιούν μη θρεπτικά φυτοχημικά. Για παράδειγμα, αρκετές έρευνες κατέδειξαν ότι τα επίπεδα τριών μεταβολιτών που εξαρτώνται από το μικροβίωμα, της διατροφής, της χολίνης, της τριμεθυλαμίνης Ν και της βεταΐνης, θα μπορούσαν να προβλέψουν τον κίνδυνο καρδιαγγειακής νόσου σε ποντίκια.

Διατροφή και άλλες τεχνικές OMICs

Πολλές άλλες τεχνικές omics είναι επίσης ένα επίκεντρο της έρευνας για τις θρεπτική ουσίες. Αποδείχθηκε ότι η επιγενετική αλλοίωση μπορεί να προκληθεί από τη διατροφή κατά τη διάρκεια της εμβρυϊκής ανάπτυξης και μπορεί να επηρεάσει την προδιάθεση για ασθένειες που σχετίζονται με τον τρόπο ζωής στη μετέπειτα ζωή. Για παράδειγμα, τα παιδιά μητέρων που υπέστησαν υπερφαγία ή υποσιτισμό κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης έχουν αυξημένο κίνδυνο ανάπτυξης παχυσαρκίας, διαβήτη, υπέρτασης, καρδιαγγειακών παθήσεων κλπ. Πολλές μελέτες έχουν αποδείξει τη συμμετοχή επιγενετικών τροποποιήσεων σε τέτοια επίκτητη ευαισθησία. Ένας άλλος πολλά υποσχόμενος στόχος των προσεγγίσεων omics στην επιστήμη των τροφίμων σχετίζεται με τις μεταγραφές RNA που δεν κωδικοποιούν πρωτεΐνες. Το MicroRNA (miRNA) είναι ένας υπότυπος αυτών των μη κωδικοποιητικών RNA. Οι πρόδρομοι των miRNA (pri-miRNA) είναι μακρά προϊόντα τα οποία διασπώνται για να δώσουν ώριμα miRNA με 22 νουκλεοτίδια σε μήκος. Τα ώριμα miRNA ρυθμίζουν τα επίπεδα αποικοδόμησης του mRNA, τη μετάφραση του mRNA, ακόμη και τη γονιδιακή μεταγραφή. Στην περίπτωση των ανθρώπινων κυττάρων, αναγνωρίζονται περίπου 1.000 miRNA και υποτίθεται ότι ρυθμίζουν την έκφραση περισσότερων από το ήμισυ των γονιδίων που κωδικοποιούν τις πρωτεΐνες. Λαμβάνοντας υπόψη τα συσσωρευμένα δεδομένα που υποστηρίζουν τον βασικό ρόλο του miRNA στην ανάπτυξη ασθενειών και τη διατήρηση της υγείας, οι πληροφορίες σχετικά με την κατάσταση των miRNA είναι αναμφίβολα ζωτικές για την κατανόηση της αλληλεπίδρασης μεταξύ των συστατικών των τροφίμων και του σώματος. Η παγκόσμια ανάλυση miRNA μπορεί τώρα να πραγματοποιηθεί εύκολα με τη χρήση εμπορικών συστοιχιών miRNA.
Με την εισαγωγή των νέων τεχνολογιών και την αποκτηθείσα γνώση, ο αριθμός των τεχνολογιών omics και οι εφαρμογές τους σε διάφορους τομείς αυξάνονται ραγδαία στη μεταγεννετική εποχή. Τέτοια αναδυόμενα πεδία – συμπεριλαμβανομένης της φαρμακογονιδιωματικής, της τοξικογονιδιωματικής, της κανονικής, της σπλικεομικής, της μεταγονιδιωματικής και της περιβαλλοντικής – παρουσιάζουν πολλά υποσχόμενες λύσεις για την καταπολέμηση των παγκόσμιων προκλήσεων στη βιοϊατρική, τη γεωργία και το περιβάλλον.

Test: LO1-Προχωρημένο επίπεδο

Name

Βιβλιογαρφικές Αναφορές

  • Amer B, Baidoo EEK. 2021. Omics-Driven Biotechnology for Industrial Applications. Frontiers Bioeng. Biotech., 9, Art. 613307: 1-19.
  • Azizipour N, Avazpour R, Rosenzweig DH, Sawan M, Ajji A. 2020. Evolution of Biochip Technology: A Review from Lab-on-a-Chip to Organ-on-a-Chip. Micromachines, 11: 599.
  • Canzler S, · Schor J, · Busch W, et al. · 2020. Prospects and challenges of multi omics data integration in toxicology. Archives of Toxicology, 94:371–388.
  • Horgan RP, Kenny LC. 2011. ‘Omic’ technologies: genomics, transcriptomics, proteomics and metabolomics. The Obstetrician & Gynaecologist, 13:189–195.
  • Joseph P. 2017. Transcriptomics in toxicology. Food Chem Toxicol., 109(1): 650–662.
  • Karahalil B. 2016. Overview of Systems Biology and Omics Technologies. Curr. Med. Chem., 23, 1-10.
  • Karczewski KJ, Snyder MP. 2018. Integrative omics for health and disease. Nat Rev Genet., 19(5): 299–310.
  • Kato H, Takahashi S, Saito K. 2011. Omics and Integrated Omics for the Promotion of Food and Nutrition Science. J. Trad. Complement. Medicine, 1 (1): 25-30.
  • Kim DH, Kim YS, Son NI, Kang CK, Kim AR. 2017. Recent omics technologies and their emerging applications for personalized medicine. IET Syst. Biol.,11 (3): 87-98.
  • Kodzius R, Gojobori T. 2016. Single-cell technologies in environmental omics. Gene 576: 701–707.
  • Mariman ECM. 2006. Nutrigenomics and nutrigenetics: the ‘omics’ revolution in nutritional science. Biotechnol Appl Biochem., 44(3):119-28.
  • Mousumi D, Prasad GBKS, Bisen PS. 2010. Omics technology. In: Molecular Diagnostics: Promises and Possibilities, Dordrech Heidelberg London, Springer, pp 11-31.
  • Ryan EP, Heuberger AL, Broeckling CD, Borresen EC, Tillotson C, Prenni JE. 2013. Advances in Nutritional Metabolomics. Current Metabolomics, 1: 109-120.
  • Sauer UG, Deferme L, Gribaldo L, et al. 2017. The challenge of the application of ‘omics technologies in chemicals risk assessment: Background and outlook. Regulatory Toxicology and Pharmacology, 91: S14 – S26
  • Simões T, Novais SC, Natal-da-Luz T, et al. 2018. An integrative omics approach to unravel toxicity mechanisms of environmental chemicals: effects of a formulated herbicide. Scientific Reports 8:11376
  • Titz B, Elamin A, Martin F, et al. 2014. Proteomics for systems toxicology. Computational and Structural Biotechnology Journal, 11: 73–90.
  • Vlaanderen J, Moore LE, Smith MT, et al. 2010. Application of Omics Technologies in Occupational and Environmental Health Research; Current Status and Projections. Occup Environ Med., 67(2): 136–143.
  • Yılmaz B, Yılmaz F. 2018. Lab-on-a-Chip Technology and Its Applications. In: Omics Technologies and Bio-engineering: Towards Improving Quality of Life, pp. 145, Elsevier Inc.
  • Amer B, Baidoo EEK. 2021. Omics-Driven Biotechnology for Industrial Applications. Frontiers Bioeng. Biotech., 9, Art. 613307: 1-19.
  • Azizipour N, Avazpour R, Rosenzweig DH, Sawan M, Ajji A. 2020. Evolution of Biochip Technology: A Review from Lab-on-a-Chip to Organ-on-a-Chip. Micromachines, 11: 599.
  • Canzler S, · Schor J, · Busch W, et al. · 2020. Prospects and challenges of multi omics data integration in toxicology. Archives of Toxicology, 94:371–388.
  • Horgan RP, Kenny LC. 2011. ‘Omic’ technologies: genomics, transcriptomics, proteomics and metabolomics. The Obstetrician & Gynaecologist, 13:189–195.
  • Joseph P. 2017. Transcriptomics in toxicology. Food Chem Toxicol., 109(1): 650–662.
  • Karahalil B. 2016. Overview of Systems Biology and Omics Technologies. Curr. Med. Chem., 23, 1-10.
  • Karczewski KJ, Snyder MP. 2018. Integrative omics for health and disease. Nat Rev Genet., 19(5): 299–310.
  • Kato H, Takahashi S, Saito K. 2011. Omics and Integrated Omics for the Promotion of Food and Nutrition Science. J. Trad. Complement. Medicine, 1 (1): 25-30.
  • Kim DH, Kim YS, Son NI, Kang CK, Kim AR. 2017. Recent omics technologies and their emerging applications for personalized medicine. IET Syst. Biol.,11 (3): 87-98.
  • Kodzius R, Gojobori T. 2016. Single-cell technologies in environmental omics. Gene 576: 701–707.
  • Mariman ECM. 2006. Nutrigenomics and nutrigenetics: the ‘omics’ revolution in nutritional science. Biotechnol Appl Biochem., 44(3):119-28.
  • Mousumi D, Prasad GBKS, Bisen PS. 2010. Omics technology. In: Molecular Diagnostics: Promises and Possibilities, Dordrech Heidelberg London, Springer, pp 11-31.
  • Ryan EP, Heuberger AL, Broeckling CD, Borresen EC, Tillotson C, Prenni JE. 2013. Advances in Nutritional Metabolomics. Current Metabolomics, 1: 109-120.
  • Sauer UG, Deferme L, Gribaldo L, et al. 2017. The challenge of the application of ‘omics technologies in chemicals risk assessment: Background and outlook. Regulatory Toxicology and Pharmacology, 91: S14 – S26
  • Simões T, Novais SC, Natal-da-Luz T, et al. 2018. An integrative omics approach to unravel toxicity mechanisms of environmental chemicals: effects of a formulated herbicide. Scientific Reports 8:11376
  • Titz B, Elamin A, Martin F, et al. 2014. Proteomics for systems toxicology. Computational and Structural Biotechnology Journal, 11: 73–90.
  • Vlaanderen J, Moore LE, Smith MT, et al. 2010. Application of Omics Technologies in Occupational and Environmental Health Research; Current Status and Projections. Occup Environ Med., 67(2): 136–143.
  • Yılmaz B, Yılmaz F. 2018. Lab-on-a-Chip Technology and Its Applications. In: Omics Technologies and Bio-engineering: Towards Improving Quality of Life, pp. 145, Elsevier Inc.

Η εφαρμογη τησ 3d εκτυπωσησ και τπε για πρασινα προϊοντα και διεργασιεσ

 B A S I C  L E V E L

Η τρισδιάστατη εκτύπωση δημιουργεί ένα απτό αντικείμενο προσθέτοντας διαδοχικά στρώματα που αντιπροσωπεύουν διατομές του αντικειμένου.

Περιεχόμενα

 

Αρχές λειτουργίας της τρισδιάστατης εκτύπωσης

Ορισμοί

Η τρισδιάστατη εκτύπωση δημιουργεί ένα απτό αντικείμενο προσθέτοντας διαδοχικά στρώματα που αντιπροσωπεύουν διατομές του αντικειμένου. Ο πιο απλός υπαινιγμός εκεί είναι η δημιουργία ενός στρώματος κέικ (Εικ. 1), μόνο τα στρώματα είναι πολλά και τυπικά πολύ λεπτά, μόνο περίπου το 1/5 του χιλιοστού.

A.

B.

Εικόνα 1. Στρώματα και στρώσεις σε τρισδιάστατη εκτύπωση
A – Πολυστρωματικό κέικ, που αντιπροσωπεύει τη βασική αρχή της τρισδιάστατης εκτύπωσης. Πηγή: Caroline&#039;s Cakes – Own work, CC BY-SA 3.0, https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=12799030
B – Τρισδιάστατη εκτύπωση κάστρο σοκολάτας. Πηγή: FM1418, CC BY-SA 4.0, via Wikimedia Commons

Η τρισδιάστατη εκτύπωση είναι κοντά, τόσο στη διαδικασία όσο και στο υλικό, στη συνηθισμένη εκτύπωση μελανιού και χαρτιού σε 2D.

Παρ ‘όλα αυτά, στην τυπική εκτύπωση 2D δημιουργείται μόνο μια ψευδαίσθηση βάθους χρησιμοποιώντας προοπτική και χρώμα ή κλίμακα του γκρι, ενώ η τρισδιάστατη εκτύπωση δημιουργεί απτά τρισδιάστατα αντικείμενα. Αυτά μπορεί να έχουν μυριάδες σκοπούς, από την ταχεία δημιουργία πρωτοτύπων για την έρευνα και τη βιομηχανία έως τα έντυπα αντικείμενα για καθημερινή ή ειδική χρήση, ανταλλακτικά μηχανών, μαγειρικά είδη κατά παραγγελία, όπως το σοκολατένιο κάστρο που παρουσιάζεται στο Εικόνα. 1Β, τυπωμένα εμφυτεύσιμα υλικά για την αναγεννητική ιατρική και, ενδεχομένως, «ανταλλακτικά» για το ανθρώπινο σώμα · και νέες μορφές τέχνης.

Ένας βασικός επιτραπέζιος εκτυπωτής 3D με υπολογιστή παρουσιάζεται στην Εικόνα. 2.

Εικόνα 2. LulzBot TAZ (FAME 3D, Fargo, ND, USA), μια μηχανή τρισδιάστατης εκτύπωσης ανοιχτού κώδικα βασισμένη στην τεχνολογία FDM. Πηγή: Ochs, J. – College, CC BY 4.0, https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=59898086

Συνήθως, η διαδικασία τρισδιάστατης εκτύπωσης ενός αντικειμένου είναι πρόσθετη (επομένως η τρισδιάστατη εκτύπωση είναι επίσης γνωστή ως “κατασκευή πρόσθετων”). Επιτυγχάνεται με την εναπόθεση στρωμάτων σε στρώματα εκτυπώσιμου υλικού (που συνήθως ονομάζεται «τρισδιάστατο μελάνι») μέχρι να ολοκληρωθεί το αντικείμενο.

Τα τρισδιάστατα εκτυπωμένα αντικείμενα δεν χρειάζεται να είναι συμπαγή μέσα (αν και μπορεί να είναι). Μπορεί να περιέχουν οποιονδήποτε τύπο κοιλοτήτων που έχει δημιουργηθεί στο αρχείο δεδομένων που χρησιμοποιείται για εκτύπωση, επειδή κάθε επίπεδο αντιπροσωπεύει μια διατομή σε ένα συγκεκριμένο επίπεδο στο κατασκευασμένο αντικείμενο.

Ένα σύντομο gif time-lapse που απεικονίζει τη βασική διαδικασία της τρισδιάστατης εκτύπωσης μπορείτε να το δείτε εδώ:

https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/e/ed/Robot_3D_print_timelapse_on_RepRapPro_Fisher.gif

Η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη τρισδιάστατη εκτύπωση στις μέρες μας είναι η μοντελοποίηση συντηγμένης εναπόθεσης (FDM), αν και άλλοι τύποι κερδίζουν γρήγορα δημοτικότητα.

Σύντομη ιστορία του πεδίου

Κοινώς πιστεύεται (και αναφέρεται) ότι η ίδια η ιδέα της τρισδιάστατης εκτύπωσης δεν υπήρχε μέχρι τη δεκαετία του 1950, όταν ο συγγραφέας επιστημονικής φαντασίας Raymond F. Jones δημοσίευσε μια μικρή ιστορία που περιγράφει τη χρήση του «μοριακού ψεκασμού» που κατευθύνεται από πληροφορίες από μια προ-ηχογραφημένη κασέτα δεδομένων. Παρ ‘όλα αυτά, η δυνατότητα για ελεγχόμενη δημιουργία ενός πολύπλοκου απτού αντικειμένου ακολουθώντας εικονικές οδηγίες, είχε προβλεφθεί περίπου 50 χρόνια νωρίτερα από τον μεγάλο οραματιστή Τζόζεφ Ράντγιαρντ Κίπλινγκ στην παιδική του ιστορία “Πώς η καμήλα πήρε την καμπούρα της”. Η πρώτη απόπειρα τρισδιάστατης εκτύπωσης, ωστόσο, δεν ήρθε μέχρι τη δεκαετία του 1970 και συνεπαγόταν τη δημιουργία και την αφαίρεση αντικειμένων. Συγκεκριμένα, αυτό ήταν το κατοχυρωμένο με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας «Liquid metal recorder» του Johannes F. Gottwald (US3596285A) χρησιμοποιώντας ηλεκτρικά αγώγιμο μεταλλικό μελάνι που προωθείται υπό πίεση σε μια επιφάνεια. Το λιωμένο μελάνι θα ρέει σε θερμοκρασία εκτύπωσης αλλά θα στερεοποιηθεί καθώς έρχεται σε επαφή με την επιφάνεια, τότε θα μπορούσε να αφαιρεθεί αυξάνοντας τη θερμοκρασία πάνω από το σημείο τήξης, επιτρέποντας την επαναχρησιμοποίηση του μελανιού και της επιφάνειας για περαιτέρω χρήση.

Όπως και με τις περισσότερες πρωτότυπες έννοιες, η ιδέα της τρισδιάστατης εκτύπωσης δεν γνώρισε πρόωρη επιτυχία. Στις αρχές της δεκαετίας του 1980, κατατέθηκε δίπλωμα ευρεσιτεχνίας από τον Hideo Kodama στην Ιαπωνία για πρόσθετη κατασκευή «στερεοσκοπικής συσκευής σχεδίασης» χρησιμοποιώντας πολυμερές σκληρυντικό με υπεριώδη ακτινοβολία, όπου οι περιοχές ακτινοβολίας UV ελέγχονταν με προκαθορισμένο σχέδιο κάλυψης (JP S56144478 A). Παρά την άμεση δημοσίευση των αποτελεσμάτων του, ο Kodama δεν μπόρεσε να αυξήσει το ενδιαφέρον για το έργο του και στη συνέχεια ακυρώθηκε.

Τέσσερα χρόνια αργότερα στη Γαλλία η ίδια μοίρα συνάντησε την έννοια της στερεολιθογραφίας που παρουσίασαν οι Le Méhauté, de Witte και André και το μετέπειτα δίπλωμα ευρεσιτεχνίας τους για τη διαδικασία, δήθεν “λόγω έλλειψης επιχειρηματικής προοπτικής” [http://www.primante3d.com/ εφευρέτης/].

Εκείνη την εποχή, ο Αμερικανός William E. Masters κατέθεσε την πρώτη από τη σειρά διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας του (συγκεκριμένα, το δίπλωμα ευρεσιτεχνίας για τη διαδικασία και το σύστημα αυτοματοποιημένης κατασκευής υπολογιστών (US 4665492) που έθεσε τελικά τα θεμέλια της τρισδιάστατης εκτύπωσης όπως τη γνωρίζουμε.

Μόλις δύο χρόνια αργότερα ο Αμερικανός Τσαρλς Χαλ έλαβε δίπλωμα ευρεσιτεχνίας για τη δική του «συσκευή για την παραγωγή στερεολιθογραφιών» (US4575330A), ίδρυσε τη δική του εταιρεία και τελικά κυκλοφόρησε τον πρώτο εμπορικό τρισδιάστατο εκτυπωτή, τον SLA-1, το 1987. Το δίπλωμα ευρεσιτεχνίας για τον πιο συχνά χρησιμοποιούμενο τύπο τρισδιάστατης εκτύπωσης – το FDM – κατατέθηκε το 1989 στις ΗΠΑ από τον S. Scott Crump (US5340433A) και ο πρώτος εξοπλισμός FDM κυκλοφόρησε το 1992. Το Hull έδωσε επίσης το πιο απλό και ταυτόχρονα πλήρες ορισμός της τρισδιάστατης εκτύπωσης μέχρι σήμερα, και συγκεκριμένα: “Ένα σύστημα για τη δημιουργία τρισδιάστατων αντικειμένων με τη δημιουργία ενός σχεδίου διατομής του αντικειμένου που πρόκειται να σχηματιστεί …”, στην περιγραφή της πατέντας του για “Μέθοδος παραγωγής τρισδιάστατων αντικειμένων” με στερεολιθογραφία »(US5174943A).

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της τρισδιάστατης εκτύπωσης ως μέθοδος παραγωγής

Υπάρχουν πολλά πλεονεκτήματα στη χρήση τρισδιάστατης εκτύπωσης παρά στις παραδοσιακές μεθόδους κατασκευής. Μερικά από αυτά παρατίθενται παρακάτω:

  1. Σύνθετος σχεδιασμός

Δεδομένου ότι το αντικείμενο δεν είναι κομμένο από ένα μπλοκ, η τρισδιάστατη εκτύπωση μπορεί να χειριστεί διαφορετικά σχέδια με πολύ περίπλοκη δομή.

  1. Δυνατότητες για τροποποιήσεις της τελευταίας στιγμής.

Ο σχεδιασμός είναι εύκολα τροποποιήσιμος και μια ποικιλία διαφορετικών πρωτοτύπων ενός αντικειμένου μπορεί να κατασκευαστεί και να δοκιμαστεί γρήγορα.

  1. Εύκολη και γρήγορη προσαρμογή του σχεδιασμού που ταιριάζει στις ατομικές ανάγκες

Σε αντίθεση με τις παραδοσιακές μεθόδους κατασκευής, η εισαγωγή των απαραίτητων τροποποιήσεων αφορά τα αρχεία δεδομένων και όχι το ίδιο το μηχάνημα και μπορεί να πραγματοποιηθεί με πολύ λίγη προειδοποίηση.

  1. Αποδίδει ελαφριά και ανθεκτικά αντικείμενα

Αυτό εξαρτάται από το υλικό που χρησιμοποιείται, αλλά οι περισσότεροι εμπορικοί τρισδιάστατοι εκτυπωτές χρησιμοποιούν πλαστικό, αν και είναι δυνατή η χρήση άλλων υλικών όπως γύψος, μέταλλο, μεταλλικά κράματα κ.λπ.

  1. Σχετικά γρήγορη παραγωγή σε μικρότερες κλίμακες

Ανάλογα με το μέγεθος και την πολυπλοκότητα του σχεδιασμού, τα περισσότερα αντικείμενα μπορεί να κατασκευαστούν μέσα σε λίγες ώρες, αν και τα μεγαλύτερα μπορεί να χρειαστούν περισσότερο χρόνο.

  1. Χαμηλά (σε σύγκριση με τις παραδοσιακές μεθόδους κατασκευής) απόβλητα υλικού

Και πάλι, δεδομένου ότι δεν υπάρχει κοπή, διάτρηση, η σπατάλη υλικού είναι αμελητέα χαμηλή. Εξαίρεση αποτελεί η τρισδιάστατη εκτύπωση σε σκόνη, όπου συνήθως χάνεται περίσσεια σκόνης.

  1. Μπορεί να είναι πιο οικονομικά αποδοτική από τις παραδοσιακές μεθόδους παρασκευής

Αυτό εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από το υλικό και τη διαδικασία που χρησιμοποιείται για την κατασκευή.

  1. Η ευκολία πρόσβασης των ερευνητών, της βιομηχανίας και του κοινού στους τρισδιάστατους εκτυπωτές αυξάνεται συνεχώς

Προς το παρόν, η απόκτηση πρόσβασης σε έναν 3D εκτυπωτή είναι σχετικά εύκολη, αν και τυπικά υπάρχει μια ουρά πελατών που περιμένουν να χρησιμοποιήσουν τον εξοπλισμό. Ο χρόνος αναμονής εξαρτάται από τη μάρκα και το μοντέλο του εκτυπωτή, τον φορέα στον οποίο φιλοξενείται και τον τύπο χρήσης του 3D εκτυπωτή.

  1. Μπορεί να είναι πιο φιλικό προς το περιβάλλον από τις παραδοσιακές μεθόδους παρασκευής

Και πάλι, αυτό εξαρτάται από τον τύπο του υλικού που χρησιμοποιείται, την ένταση χρήσης και τη συντήρηση του εξοπλισμού. Ωστόσο, τα απορριμμένα αντικείμενα, η εκπομπή λυμάτων και μικρών σωματιδίων μπορεί να δημιουργήσουν πρόβλημα (βλ. Παρακάτω).

  1. Ειδικές χρήσεις της τρισδιάστατης εκτύπωσης στην επανορθωτική και αναγεννητική ιατρική (τρισδιάστατη βιο-εκτύπωση)

Αυτή τη στιγμή επενδύεται σημαντική έρευνα και ανάπτυξη για την ανάπτυξη μιας νέας γενιάς εμφυτεύσιμων υλικών. Αντί να παρέχουν απλώς αδρανή υποστήριξη, φιλικές προς την τριβή επιφάνειες και γεφύρωση μεταξύ ακέραιων τμημάτων κατεστραμμένου ιστού (οι οποίες είναι οι κύριες λειτουργίες των περισσότερων εμφυτεύσιμων υλικών σήμερα), τα νέα υλικά μπορεί επίσης να γίνουν πιθανότατα μέρος του φυσικού βιότοπου των κυττάρων τον κατεστραμμένο ιστό. Τέτοια υλικά μπορεί να είναι καθαρά τεχνητής προέλευσης αλλά μοιάζουν με βιολογικό ιστό (υλικά βιομίμησης). Μια πιθανή χρήση της τρισδιάστατης βιο -εκτύπωσης είναι η παροχή βέλτιστου περιβάλλοντος 3D εμφυτεύσιμων υλικών για αποικισμό με ζωντανά κύτταρα από τον περιβάλλοντα ιστό. Μια άλλη πολλά υποσχόμενη εφαρμογή τρισδιάστατης βιο-εκτύπωσης είναι η δυνατότητα δημιουργίας ζωντανών ιστών (και, ενδεχομένως, λειτουργίας οργάνων αντικατάστασης και διαφόρων «ανταλλακτικών» για ζωντανά σώματα) χρησιμοποιώντας υλικά με βάση ζωντανά κύτταρα ως εκτυπώσιμα «βιοσυνδετικά» (δείτε παρακάτω).

Οι δυνητικοί περιορισμοί της τρισδιάστατης εκτύπωσης σε σύγκριση με τις παραδοσιακές μεθόδους κατασκευής μπορεί να είναι:

  1. Περιορισμοί που επιβάλλονται από λάθη στο σχεδιασμό

Ενώ ουσιαστικά δεν υπάρχουν όρια στους πιθανούς τύπους σχεδιασμού, ένα μόνο σφάλμα στο σχεδιασμό μπορεί να οδηγήσει στην κατασκευή άχρηστων αντικειμένων. Ενώ ορισμένα από τα σφάλματα σχεδιασμού μπορούν να ελαχιστοποιηθούν με το φινίρισμα, μπορεί να αυξήσει το χρόνο επεξεργασίας μιας παραγγελίας και να μειώσει την ανθεκτικότητα του αντικειμένου.

  1. Περιορισμός που επιβάλλεται από υλικό

Οι περισσότεροι τρισδιάστατοι εκτυπωτές χρησιμοποιούν ως μελάνι κάποιο είδος πλαστικού πολυμερούς, αν και ορισμένοι μπορούν επίσης να εκτυπώσουν με μέταλλο και μεταλλικά κράματα. Αντικείμενα που παράγονται και στη συνέχεια απορρίπτονται ενδέχεται να δημιουργήσουν πρόβλημα εάν το υλικό δεν είναι βιοδιασπώμενο ή/και ανακυκλώσιμο. Η εκτύπωση και η μετα-επεξεργασία μπορεί να οδηγήσουν σε εκπομπή σωματιδίων που συμβάλλουν στη ρύπανση του περιβάλλοντος και μπορεί να έχουν καρκινογόνες δυνατότητες όταν αναπνέουν και καταπίνονται.

Τα ζητήματα που αφορούν το υλικό για βιο -εκτύπωση ενδέχεται να επιδεινωθούν περαιτέρω σε τρισδιάστατη βιο -εκτύπωση όπου η βιωσιμότητα των ζωντανών κυττάρων και η βιοσυμβατότητα είναι υψίστης σημασίας.

  1. Περιορισμοί που επιβάλλονται από το μέγεθος του αντικειμένου

Πολύ μεγάλα αντικείμενα μπορεί να είναι δύσκολο να κατασκευαστούν σε ένα κομμάτι. Διαφορετικά τμήματα του αντικειμένου μπορεί να χρειαστεί να εκτυπωθούν ξεχωριστά και στη συνέχεια να συναρμολογηθούν μεταξύ τους. Αυτό μπορεί να αυξήσει το χρόνο και το κόστος για την κατασκευή και μπορεί να μειώσει την ανθεκτικότητα του αντικειμένου (βλέπε παρακάτω).

  1. Η ακεραιότητα των παραγόμενων αντικειμένων ενδέχεται να διακυβευθεί

Αυτό μπορεί να είναι ένα ζήτημα ειδικά όταν τα μέρη παράγονται χωριστά και στη συνέχεια συναρμολογούνται μαζί. Υπό φυσική καταπόνηση, τα στρώματα μπορεί να διαχωριστούν (ειδικά σε αντικείμενα που παράγονται από FDM) και τα σύνθετα αντικείμενα μπορεί να είναι εύθραυστα και ευαίσθητα στο χειρισμό.

  1. Τα αντικείμενα με τρισδιάστατη εκτύπωση μπορεί να χρειαστούν φινίρισμα

Ουσιαστικά, αυτό δεν κάνει καμία διαφορά με την παραδοσιακή κατασκευή. Και πάλι, αυτό μπορεί να αυξήσει το χρόνο και το κόστος για την κατασκευή.

  1. Το κόστος γενικά δεν μειώνεται με μεγαλύτερες παρτίδες

Στην παραδοσιακή κατασκευή, όταν ο εξοπλισμός λειτουργεί σε πλήρη χωρητικότητα, το κόστος κατασκευής ανά αντικείμενο ή ανά παρτίδα γενικά τείνει να είναι χαμηλότερο. Αυτό δεν συμβαίνει με την τρισδιάστατη εκτύπωση και οι μεγάλοι όγκοι κατασκευής μπορεί να είναι δαπανηροί.

  1. Θέματα πνευματικής ιδιοκτησίας

Αρκετά αυτονόητο. Τα ζητήματα δεν αφορούν μόνο τα κατασκευασμένα αντικείμενα αλλά και το λογισμικό, το υλικό και τις διαδικασίες που χρησιμοποιούνται για την κατασκευή τους.

  1. Ηθικά ζητήματα, που αφορούν κυρίως την τρισδιάστατη βιο-εκτύπωση ζωντανών ιστών

9. Μπορεί να προκαλέσει έμμεσα μείωση των θέσεων εργασίας στον παραδοσιακό μεταποιητικό τομέα.

Βασικές διαδικασίες και υλικά της τρισδιάστατης εκτύπωσης

Τύποι διαδικασιών της τρισδιάστατης εκτύπωσης

Υπάρχουν πολλοί τύποι τεχνολογιών τρισδιάστατης εκτύπωσης. Το κοινό τους είναι ότι τα απτά αντικείμενα δημιουργούνται με την εναπόθεση διαδοχικών στρωμάτων και όχι με την αποκοπή του αντικειμένου από ένα στερεό μπλοκ και/ή διάτρηση, άλεση βαρετού. Κάθε διαδοχικό στρώμα αντιπροσωπεύει μια διατομή του υπό κατασκευή αντικειμένου. Η διαδικασία ελέγχεται από έναν υπολογιστή εξοπλισμένο με καθορισμένο λογισμικό για τη δημιουργία αρχείων σχεδιασμού, επεξεργασίας αρχείων και εκτύπωσης αντικειμένων (δείτε περισσότερα για λεπτομέρειες).

Πολλές από τις πιο κοινές τεχνολογίες για τρισδιάστατη εκτύπωση παρουσιάζονται συνοπτικά παρακάτω. Αυτή η λίστα δεν είναι σε καμία περίπτωση αποκλειστική.

  • Τεχνολογίες υγρού ή ημιστερεού μελάνης: SLA, FDM, EXT, PolyJet

Και τα τρία αυτά βασίζονται στην εναπόθεση στρώσεων υγρού (περισσότερο ή λιγότερο ιξώδους) μελανιού που στη συνέχεια λιώνονται μεταξύ τους με θερμότητα ή κατευθυνόμενη δέσμη φωτός (που εκπέμπεται από λάμπα UV ή λέιζερ). Το μελάνι μπορεί να εξωθείται από ένα ακροφύσιο ή, όταν είναι υψηλότερης συνοχής, να τροφοδοτείται από ένα καρούλι.

– Στερεολιθογραφία (SLA)

Η στερεολιθογραφική τρισδιάστατη εκτύπωση είναι ίσως η πιο εύκολα κατανοητή από όλες τις τεχνολογίες τρισδιάστατης εκτύπωσης, πιθανώς επειδή ο φωτοπολυμερισμός χρησιμοποιείται συνήθως στη σύγχρονη οδοντιατρική. Βασικά, η στερεολιθογραφία είναι φωτοθεραπεία φωτοευαίσθητου υλικού που εξωθείται στρώμα-στρώμα σε κινητή πλατφόρμα. Το μήκος κύματος της πηγής φωτός είναι συχνότερα στην περιοχή UV, αλλά μπορεί να χρησιμοποιηθούν και άλλα μήκη κύματος. Τα υλικά SLA πολυμερίζονται μέσω πολυμερισμού ελεύθερων ριζών.

Διαφορετικά μέρη του αντικειμένου μπορεί να χρειαστεί να υποστηριχθούν κατά την κατασκευή του αντικειμένου έτσι ώστε να αποφευχθεί η κατάρρευση ολόκληρης της δομής. Οι διαδοχικές στιβάδες γίνονται για να προσκολλώνται μεταξύ τους με διασταυρωμένο πολυμερισμό της μόλις πολυμερισμένης στιβάδας στο πρόσφατα εναποτιθέμενο στρώμα όπου ο πολυμερισμός είναι ακόμη ατελής. Δεδομένου ότι ο πολυμερισμός μπορεί να πάρει λίγο χρόνο για να ολοκληρωθεί, το εκτυπωμένο αντικείμενο συνήθως χρειάζεται λίγο χρόνο για να σκληρύνει, στη συνέχεια αφαιρούνται τα στηρίγματα (εάν κάποιο από αυτά παραμείνει μετά την τελευταία εναπόθεση του στρώματος), τότε μπορεί να λάβει χώρα μια τελική μετα-επεξεργασία.

Ένα τυπωμένο 3D μοντέλο SLA παρουσιάζεται στην Εικόνα. 3.

Εικόνα 3. Στερεολιθογραφία οστικού λαβύρινθου του εσωτερικού αυτιού στον άνθρωπο. Πηγή: Didier Descouens, CC BY-SA 4.0 <https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0>, via Wikimedia Commons

Το μελάνι που χρησιμοποιείται στην εκτύπωση με βάση SLA είναι συνήθως υγρό στην μη πολυμερισμένη μορφή του. Είναι κυρίως εποξειδικό ή ακρυλικό, αν και ανθρακικό τριμεθυλένιο, πολυκαπρολακτόνη και μελάνια με βάση πολυλακτίδιο μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν. Η χρήση τέτοιων υλικών αποδίδει εκτυπωμένα αντικείμενα με σημαντική ακαμψία τα οποία, ωστόσο, είναι αρκετά εύθραυστα. Έτσι, το SLA είναι κατάλληλο για ταχεία πρωτοτυπία και ερευνητικούς σκοπούς (π.χ. σκαλωσιές μηχανικής ιστών) αλλά όχι για αντικείμενα που πρέπει να είναι ανθεκτικά. Το SLA έχει αρκετά υψηλή ανάλυση (το ελάχιστο πάχος του στρώματος είναι 50 μm) και ως εκ τούτου είναι πολύ αξιόπιστο όταν οι λεπτομέρειες είναι ζωτικής σημασίας.

Τα αντικείμενα που δημιουργούνται από το SLA μπορεί να είναι ευαίσθητα στο φως και να τείνουν να διαλύονται με την πάροδο του χρόνου, ειδικά όταν διατηρούνται σε φωτεινά περιβάλλοντα.

Οι διαλύτες χρησιμοποιούνται σπάνια στην εκτύπωση SLA, επομένως, ο κίνδυνος διαφυγής καπνών στην ατμόσφαιρα είναι χαμηλός. Ωστόσο, λόγω της ευθραυστότητας των αντικειμένων που εκτυπώνονται με SLA, τα αντικείμενα που απορρίπτονται ενδέχεται να αποτελούν περιβαλλοντικό κίνδυνο. Η χρήση υπεριώδους ακτινοβολίας απαιτεί ειδικές προφυλάξεις προκειμένου να αποφευχθεί η τυχαία έκθεση επιφανειών, αντικειμένων και χειριστών στη δέσμη σκλήρυνσης. Μερικά από τα μελάνια που χρησιμοποιούνται για στερεολιθογραφία μπορεί να έχουν σημαντικό νευροτοξικό και καρκινογόνο δυναμικό. Επίσης, μπορεί να χρειαστεί να εξεταστεί ο σχηματισμός όζοντος που προκαλείται από την υπεριώδη ακτινοβολία.

– Μοντελοποίηση συντηγμένης εναπόθεσης (FDM), επίσης γνωστή ως κατασκευή σύντηξης νημάτων (FFF)

Προς το παρόν, αυτή είναι η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη τεχνολογία για τρισδιάστατη εκτύπωση. Η τεχνολογία FDM βασίζεται στην εξώθηση ενός νήματος θερμοπλαστικού μελανιού που τροφοδοτείται από ένα καρούλι μέσω ενός κινούμενου θερμαινόμενου ακροφυσίου εκτυπωτή. Το μελάνι μέσα στο ακροφύσιο θερμαίνεται ακριβώς πάνω από το σημείο τήξης του και εξωθείται σε ημι-στερεή μορφή που στερεοποιείται σχεδόν αμέσως μετά την εναπόθεση ενός στρώματος. Το αντικείμενο είναι χτισμένο πάνω σε μια κινούμενη πλατφόρμα που χαμηλώνει σταδιακά καθώς μεγαλώνει η δομή (Εικ. 4).

Εικόνα 5. Εκτυπωτής PRUSA i3 MK2 FDM (Prusa Research, Πράγα, Τσεχία) με καρούλι και ολοκληρωμένο αντικείμενο. Πηγή εικόνας: By Gringer – Own work, CC0, https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=73614647.

Το ελάχιστο πάχος στρώματος για FDM είναι 100 μm. Τα πιο συχνά χρησιμοποιούμενα υλικά μελάνης για FDM είναι το ακρυλονιτρίλιο βουταδιένιο στυρόλιο (ABS), το πολυλακτίδιο (PLA) και η πολυαιθυλενο τερεφθαλική γλυκόλη (PETG). Άλλα, όπως πολυφαινυλαιθέρας (ΜΑΠ), πολυουρεθάνη (PU), πολυαιθυλενο τερεφθαλική γλυκόλη (PETG), πολυφαινυλοσουλφόνη (PPSP), πολυανθρακικό (PC), πολυαιθεριμίδιο (PEI), πολυαιθεροκετόνη (PEEK), πολυαμίδιο (PA, κοινώς γνωστό ως νάιλον) χρησιμοποιούνται επίσης. Μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί πολυβινυλική αλκοόλη (PVA), αλλά επειδή είναι υδρόφιλη, το PVA χρησιμοποιείται συχνότερα για την κατασκευή εύκολα αφαιρούμενων στηριγμάτων για μια δομή τυπωμένη με άλλο τύπο θερμοπλαστικού μελανιού.

Το θερμαινόμενο μελάνι για FDM μπορεί επίσης να έχει τη μορφή ράβδων ή κόκκων. Μια παραλλαγή του FDM χρησιμοποιεί ψυχρή εξώθηση μη θερμαινόμενου μελανιού, που συνήθως παρέχεται ως πολτός ή πάστα.

Ένας εκτυπωτής FDM με μπομπίνα νήματος παρουσιάζεται στην Εικόνα 5.

Εικόνα 5. Εκτυπωτής PRUSA i3 MK2 FDM (Prusa Research, Πράγα, Τσεχία) με καρούλι και ολοκληρωμένο αντικείμενο. Πηγή εικόνας: Wikimedia Commons, http://reprap.org/wiki/File:Prusai3-MK2.jpg.

Όντας σχετικά χαμηλού κόστους, το FDM είναι ιδιαίτερα δημοφιλές στους χομπίστες και στους κατασκευαστές μοντέλων επιφάνειας εργασίας. Επιπλέον, το FDM χρησιμοποιείται συνήθως για ταχεία πρωτοτυπία στη μηχανική, στην κατασκευή εξαρτημάτων και μηχανημάτων υψηλής απόδοσης, στην εκπαίδευση και στην τέχνη.

Τα αντικείμενα που κατασκευάζονται από την FDM είναι σημαντικά πιο ανθεκτικά από αυτά που παράγονται από την SLA και με πολύ καλή ποιότητα αναπαραγωγής λεπτομερειών. Διαφορετικής ποιότητας μελάνια FDM αποδίδουν αντικείμενα με διαφορετικές ιδιότητες σε σχέση με την ανθεκτικότητα, την ακαμψία και την ευκαμψία (βλέπε παρακάτω).

Τα μειονεκτήματα της τρισδιάστατης εκτύπωσης από το FDM σχετίζονται κυρίως με πιθανούς περιβαλλοντικούς κινδύνους (χρήση διαλυτών, εκπομπή μικρών σωματιδίων κατά τη μετα-επεξεργασία και το γεγονός ότι τα απορριμμένα αντικείμενα είναι αρκετά ανθεκτικά).

– Ημι-στερεή τρισδιάστατη εκτύπωση

Η εκτύπωση 3D 3D είναι μια άλλη τεχνολογία που βασίζεται στην εξώθηση. Το μελάνι είναι συνήθως μίγμα πολυμερούς-διαλύτη με τη σύσταση της πάστας. Τα υλικά EXT δεν είναι θερμοπλαστικά, επιτρέποντας την εκτύπωση σε χαμηλές θερμοκρασίες. Και πάλι, το αντικείμενο είναι χτισμένο πάνω σε μια κινητή πλατφόρμα.

Το EXT χρησιμοποιείται συνήθως στην έρευνα (π.χ. σκαλωσιές ιστών) και για φαρμακευτικούς σκοπούς (στοχευμένη και/ή χρονική παράδοση φαρμάκων). Η βιοασφάλεια διασφαλίζεται με τη χρήση μελανιών που βασίζονται σε πολυβινυλοπυρρολιδόνη, πολυαιθυλενογλυκόλη, μεθυκελουλόζη, υδροξυπροπυλομεθυλοκυτταρίνη, πολυκαπρολακτόνη και άλλα υλικά. Το EXT είναι μία από τις ισχυρές προσεγγίσεις για τον τρυπισμό ζωντανών ιστών από μια υδρογέλη που περιέχει ζωντανά κύτταρα. Επίσης, η εξώθηση χρησιμοποιώντας παχύρρευστη πάστα τροφίμων (γλάσο, σοκολάτα, ζελέ, κ.λπ.) είναι μια προτιμώμενη μέθοδος για τρισδιάστατη εκτύπωση για τη βιομηχανία τροφίμων (Εικ. 6).

Εικόνα 6. Εκτύπωση εξώθησης για τη βιομηχανία τροφίμων. Πηγή: Grup de recerca de la Universitat de Columbia – https://www.creativemachineslab.com/digital-food.html, CC BY-SA 4.0, https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=84202502

Δεδομένου ότι το υλικό για την εκτύπωση EXT 3D δεν είναι ούτε φωτοευαίσθητο ούτε θερμοπλαστικό, τα στρώματα συνήθως δεν στερεοποιούνται αμέσως. Έτσι, το τρισδιάστατο αντικείμενο που εκτυπώθηκε μπορεί να χρειαστεί χρόνο για να σταθεροποιηθεί ή/και να στεγνώσει μετά την ολοκλήρωση καθώς ο διαλύτης εξατμίζεται. Μπορεί επίσης να είναι επιρρεπής σε στρέβλωση, συρρίκνωση και παραμόρφωση. Το ελάχιστο πάχος στρώματος για EXT είναι 800 μm. Αυτή η χαμηλή ανάλυση είναι εγγενής στις τεχνικές εξώθησης ημιστερεού.

  •  PolyJet

Το PolyJet είναι μια άλλη τεχνολογία τρισδιάστατης εκτύπωσης με βάση το υγρό. Όπως και το SLA, βασίζεται στη στρώση-στρώση που UV-σκλήρυνση ενός φωτοευαίσθητου πολυμερούς. Το μελάνι, ωστόσο, απελευθερώνεται από την κεφαλή του εκτυπωτή σε σταγονίδια που συσσωρεύονται σε μια οικοδομική πλατφόρμα σύμφωνα με το καθορισμένο λογισμικό. Η τεχνολογία PolyJet επιτρέπει την ανάμειξη μελανιών, με αποτέλεσμα μεγαλύτερη ποικιλία ιδιοτήτων για τα κατασκευασμένα αντικείμενα.

Τα μελάνια PolyJet περιλαμβάνουν μεγάλη ποικιλία υλικών. Μεταξύ των συνηθέστερα χρησιμοποιούμενων είναι το ABS (διαφορετικές τροποποιήσεις), η σχετική ένωση ακρυλικό στυρόλιο ακρυλονιτρίλιο (ASA, πιο ανθεκτικό στη θερμότητα και ανθεκτικό στην υπεριώδη ακτινοβολία από το ABS), πολυανθρακικό και πολυαιθερκετόνη κετόνη (PEKK). Διάφορα φωτοευαίσθητα υλικά που χρησιμοποιούνται σε άλλες τεχνολογίες τρισδιάστατης εκτύπωσης με βάση το υγρό μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθούν στο Polyjet. Υπάρχει επίσης η ειδικά σχεδιασμένη σειρά μελανιών Vero Polyjet M κατοχυρωμένη με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας από έναν από τους ηγέτες της αγοράς σε 3D εκτυπωτές και υλικά, Stratasys. Σημαντικά μέλη των βιοσυμβατών υλικών PolyJet είναι τα MED610 και MED620, μια ρητίνη με βάση μεθακρυλικό που χρησιμοποιείται στην ιατρική και την οδοντιατρική για γρήγορη δημιουργία πρωτοτύπων.

Τα πλεονεκτήματα της χρήσης του PolyJet είναι η σχετικά υψηλή ανάλυση (το ελάχιστο πάχος του στρώματος είναι 160 μm, επιτρέποντας τη δημιουργία σταθερών δομών με πολύπλοκη γεωμετρία και εξαιρετική λεπτομέρεια) και η μεγάλη ποικιλία ιδιοτήτων (δύναμη, ευελιξία, χρώματα κ.λπ.). Τα μειονεκτήματα είναι (εκτός από τα κοινά μειονεκτήματα της τρισδιάστατης εκτύπωσης που περιγράφηκαν παραπάνω) τα εγγενώς υψηλά επίπεδα εκπομπής μικρών σωματιδίων, η χρήση υπεριώδους ακτινοβολίας και η εκπομπή τοξικών καπνών κατά τη σκλήρυνση αντικειμένων που κατασκευάζονται με μερικούς τύπους μελανιών (π.χ. ASA). Τα εκτυπωμένα αντικείμενα ενδέχεται να χρειάζονται μετα-επεξεργασία και μπορεί να είναι φωτοευαίσθητα.

  • 3D Τρισδιάστατη εκτύπωση σε σκόνη (PB)

Η τεχνολογία τρισδιάστατης εκτύπωσης PB βασίζεται στην εναπόθεση διαδοχικών στρωμάτων κονιοποιημένου υλικού και τη δέσμευσή τους μέσω ενός διαλύματος υγρού συνδετικού υλικού ή τη σύντηξη με άλλες μεθόδους (βλ. Παρακάτω). Η σκόνη εναποτίθεται σε κλίνη σκόνης ή παράγεται με εκτόξευση σκόνης και στη συνέχεια ψεκάζεται ή εκτοξεύεται με συνδετικό υλικό, ακτινοβολείται με φως ή θερμαίνεται προκειμένου να επιτευχθεί η ακεραιότητα του αντικειμένου.

Το ελάχιστο πάχος στρώματος μπορεί να ποικίλλει σημαντικά στην εκτύπωση 3D PB και τα στρώματα μπορεί να είναι τόσο λεπτά όσο 20-30 μm με ορισμένα υλικά. Αυτή η πολύ υψηλή ανάλυση επιτρέπει τη δημιουργία πολύπλοκων δομών με εξαιρετική λεπτομέρεια. Γενικά, ωστόσο, το πάχος του στρώματος είναι περίπου 200 μm.

Τα κονιοποιημένα υλικά συνήθως παράγονται με κρυογενική άλεση σε μύλο σφαιρών σε θερμοκρασία κάτω από τη θερμοκρασία μετάπτωσης γυαλιού του υλικού. Η άλεση μπορεί να χρησιμοποιεί αέρια χαμηλής θερμοκρασίας (υγρό CO2 ή υγρό άζωτο-ξηρή σκόνη) ή μίγμα αερίου χαμηλής θερμοκρασίας και οργανικών διαλυτών (υγρή άλεση). Στην απλούστερη μορφή του, η τρισδιάστατη εκτύπωση PB είναι εφικτή χρησιμοποιώντας υλικά όπως άμυλο σε σκόνη ή γύψο δεμένο μαζί με κόλλα (Εικ. 7). Μπορούν να προστεθούν χρωστικές και ενώσεις πλαστικοποίησης στο διάλυμα σύνδεσης προκειμένου να επιτευχθούν οι επιθυμητές ιδιότητες.

Εικόνα 7. Πρωτότυπα που κατασκευάζονται με τρισδιάστατη εκτύπωση σε σκόνη. Πηγή: S Zillayali, CC BY-SA 3.0 <https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0>, via Wikimedia Commons.

Τα μειονεκτήματα της τρισδιάστατης εκτύπωσης που βασίζεται σε PB σχετίζονται, αφενός, με τις φυσικές ιδιότητες των αντικειμένων που δημιουργήθηκαν με αυτόν τον τύπο τεχνολογίας και, αφετέρου, με την ανάγκη για μετα-επεξεργασία προκειμένου να επιτευχθεί η μέγιστη ποιότητα. Τα αντικείμενα που κατασκευάστηκαν από το PB 3D είναι εγγενώς πολύ πορώδη και, ως εκ τούτου, παρουσιάζουν χαμηλή μηχανική αντίσταση και μπορεί να είναι εύθραυστα.

Τα αντικείμενα που εκτυπώνονται με ΡΒ χρειάζονται πάντα χρόνο για εξάτμιση διαλυτών. Η μετεπεξεργασία είναι συνήθως απαραίτητη για την απομάκρυνση της περίσσειας σκόνης (επομένως μια ορισμένη ποσότητα υλικού σπαταλάται πάντα) και για τη βελτίωση των ιδιοτήτων των κατασκευασμένων αντικειμένων (αντοχή, χρώμα, γυάλισμα κ.λπ.). Η εκπομπή δυνητικά επιβλαβών μικρών σωματιδίων αποτελεί σοβαρή ανησυχία σε όλες τις τεχνολογίες που βασίζονται σε PB για τρισδιάστατη εκτύπωση.

Το PB έχει χρησιμοποιηθεί επιτυχώς στην έρευνα, την οδοντιατρική και την ιατρική για την κατασκευή εμφυτευμάτων και την κατασκευή φαρμάκων με συγκεκριμένες φαρμακοκινητικές ιδιότητες, όπως ταμπλέτες ταχείας αποσύνθεσης, φάρμακα με καθυστερημένη, παλλόμενη ή παρατεταμένη αποδέσμευση. Η βιοασφάλεια αυτών των μορφών δοσολογίας διασφαλίζεται με τη χρήση μεθακρυλικού ή αιθυλοκυτταρίνης ως φορέων της βιοδραστικής ουσίας.

  •  ColorJet

Το ColorJet δεν είναι ακριβώς μια τεχνολογία, αλλά μια μάρκα τρισδιάστατων εκτυπωτών και αναλωσίμων σε σκόνη που κατασκευάζονται στην Ινδία. Προσφέρει μία από τις πιο απλές λύσεις στην τρισδιάστατη εκτύπωση PB. Το υλικό που χρησιμοποιείται είναι συνήθως η σκόνη λευκού γύψου, αν και μπορεί να χρησιμοποιηθεί και πλαστικό (π.χ., η κατοχυρωμένη με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας σκόνη Visijet C4 Spectrum της εταιρείας). Το υλικό είναι στρωμένο σε μια κινητή πλατφόρμα και δένεται με κόλλα. Το συνδετικό υλικό μπορεί να περιέχει διαφορετικές βαφές, προσδίδοντας διαφορετικά χρώματα στο μοντέλο που κατασκευάζεται.

Το ColorJet χρησιμοποιείται συχνότερα για γρήγορη δημιουργία πρωτοτύπων. Το ελάχιστο πάχος στρώματος είναι περίπου 100 μm, αλλά μπορεί να ποικίλει με διαφορετικά υλικά.

Το Colorjet παρέχει μια οικονομική λύση όπου η ανθεκτικότητα, η ευθραυστότητα και το πορώδες δεν προκαλούν μεγάλη ανησυχία. Ως εκ τούτου, είναι μια αποδεκτή λύση για την κατασκευή μοντέλων για εκπαιδευτικούς, ερευνητικούς και εμπορικούς σκοπούς (π.χ. μοντέλα πωλήσεων) και στην τέχνη. Μια παρόμοια διαδικασία με χρήση βρώσιμης σκόνης και συνδετικού διαλύματος χρησιμοποιείται συνήθως στη βιομηχανία τροφίμων για τη δημιουργία προσαρμοσμένων γλυκών και πιάτων.

Τα αντικείμενα που εκτυπώνονται από το ColorJet ενδέχεται να χρειάζονται εκτεταμένη μετα-επεξεργασία. Οι σοβάδες πρέπει να σκληρύνουν μετά την ολοκλήρωσή τους και οι διαλύτες πρέπει να εξατμιστούν. Στη συνέχεια, το αντικείμενο γυαλίζεται και εμποτίζεται με άλλο τύπο συνδετικού υλικού (συνήθως ακρυλικό) για να επιτευχθεί η μέγιστη αντοχή και να μειωθεί το πορώδες της επιφάνειας. Οι αναθυμιάσεις διαλυτών μπορεί να αποτελούν περιβαλλοντική ανησυχία, καθώς και εκπομπές μικρών σωματιδίων.

  •  Επιλεκτική τήξη λέιζερ (SLS)

Το SLS μοιράζεται τα κοινά χαρακτηριστικά που αναφέρονται παραπάνω για εκτύπωση 3D PB. Στο SLS το κονιοποιημένο υλικό είναι στρωματοποιημένο και μια κατευθυνόμενη δέσμη φωτός που δημιουργείται από την κεφαλή του εκτυπωτή υγροποιείται εν μέρει και λιώνει τα στρώματα μεταξύ τους καθώς η δομή χτίζεται σε μια διαδικασία που συνήθως ονομάζεται λαιμόκοψη (Εικ. 8)

Εικόνα 8. Σχηματισμός «λαιμού» μεταξύ δύο στρώσεων σύντηξης (βέλη). Πηγή:  Mendoza.755 – Own work, CC BY-SA 4.0, https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=76830144

Το ελάχιστο πάχος στρώματος στο SLS είναι περίπου 100 μm.

Το SLS λειτουργεί πολύ καλά με υλικά με υψηλό σημείο τήξης και ως εκ τούτου χρησιμοποιείται συχνότερα με μελάνια με βάση το μέταλλο. Πλαστικό (πολυαμίδιο, πολυανθρακικό, πολυστυρόλιο και άλλα), θερμοπλαστική ρητίνη, γυαλί και κεραμικές σκόνες μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν. Το SLS χρησιμοποιείται συχνά για ταχεία δημιουργία πρωτοτύπων στην έρευνα (ειδικά σκαλωσιές ιστών) και στην οδοντιατρική. Προς το παρόν, οι ευκαιρίες για ανάπτυξη τεχνολογίας που βασίζεται σε SLS στη φαρμακευτική βιομηχανία είναι αρκετά περιορισμένες καθώς η ακτινοβολία και η θερμότητα που παράγεται κατά τη σύντηξη στρώσεων μπορεί να θέσει σε σοβαρό κίνδυνο τις ιδιότητες της βιοδραστικής ουσίας.

Τα τρόφιμα σε σκόνη (κακάο, ζάχαρη κ.λπ.) μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τρισδιάστατη εκτύπωση στη βιομηχανία τροφίμων.

  •  Επιλεκτική τήξη λέιζερ (SLM)

Το SLM συχνά θεωρείται παράγωγο του SLS, καθώς χρησιμοποιείται κυρίως για εκτύπωση με σκόνες μετάλλων και μεταλλικών κραμάτων. Παρ ‘όλα αυτά, ενώ το λέιζερ κεφαλής εκτυπωτή SLS παράγει μόνο αρκετή ενέργεια για να συγχωνεύσει τα στρώματα μεταξύ τους, το SLM χρησιμοποιεί ένα λέιζερ υψηλής ισχύος που μπορεί να λιώσει τελείως ένα κομμάτι μετάλλου και στη συνέχεια να αφεθεί στο επιθυμητό σχήμα όπως και το χύτευση. Το SLM παράγει αντικείμενα που είναι σημαντικά λιγότερο πορώδη από το SLS και έχουν καλύτερη μηχανική ανθεκτικότητα λόγω της ομοιογενούς εσωτερικής δομής. Ένα μειονέκτημα του SLM είναι ότι τα αντικείμενα απαιτούν γυάλισμα μετά την ολοκλήρωσή τους καθώς δημιουργεί δομές με αυξημένη κοκκώδη επιφάνεια.

Η ηλεκτρονική τήξη δέσμης (EBM) είναι ένας υποτύπος SLM που χρησιμοποιεί παρόμοια και ηλεκτρονική δέσμη για να λιώσει μεταλλικές σκόνες.

  • Επιλεκτική πυροσυσσωμάτωση (SHS)

Το SHS βασίζεται ουσιαστικά στην ίδια αρχή με το SLS, αλλά το μελάνι είναι θερμοπλαστικό και, αντίστοιχα, η σύντηξη στρώματος-στρώματος λαμβάνεται χρησιμοποιώντας θερμότητα που παράγεται από μια θερμική κεφαλή εκτυπωτή. Το πιο συνηθισμένο υλικό που χρησιμοποιείται στο SHS είναι το πλαστικό (συγκεκριμένα, το πολυαμίδιο, αλλά μπορεί να χρησιμοποιηθούν και άλλα πολυμερή).

Όλα τα αντικείμενα που παράγονται από SLS ή SHS είναι επιρρεπή σε στρέβλωση και συρρίκνωση. Οι μηχανικές ιδιότητες των εκτυπωμένων αντικειμένων ενδέχεται να είναι ασυνεπείς από αντικείμενο σε αντικείμενο καθώς και από παρτίδα σε παρτίδα. Τα αντικείμενα που κατασκευάζονται από SLS και SHS συχνά απαιτούν μετεπεξεργασία, όπως αφαίρεση στηριγμάτων και επικάλυψη με στεγανωτικά μέσα, προκειμένου να μειωθεί το πορώδες της επιφάνειας.

  •  Σύντηξη πολλαπλών τζετ (MJF)

Η τρισδιάστατη εκτύπωση MJF είναι ένα υβρίδιο της προσέγγισης ColorJet (χρήση χημικών συνδετικών) και SHS (χρήση θερμότητας) που λειτουργεί κυρίως με πολυαμίδιο (Nylon). Βασικά, η λεπτόκοκκη σκόνη πολυαμιδίου τοποθετείται σε στρώση σε σκόνη, ψεκάζεται ή ψεκάζεται με συνδετικό υλικό και στη συνέχεια θερμαίνεται επιλεκτικά σύμφωνα με τις οδηγίες ενός προ-προγραμματισμένου λογισμικού. Το ελάχιστο πάχος του στρώματος είναι περίπου 80 μm. Όταν το αντικείμενο είναι πλήρες, πραγματοποιείται μετά την επεξεργασία (απομάκρυνση της περίσσειας σκόνης, γυάλισμα κ.λπ.). Το MJF παράγει αντικείμενα που είναι λιγότερο πορώδη και συνεπώς πιο συνεπή στις μηχανικές τους ιδιότητες από το SLS ή το SHS και έχει καλύτερη ικανότητα αναπαραγωγής λεπτών λεπτομερειών. Το φινίρισμα της επιφάνειας είναι επίσης καλύτερο με το MJF. Οι χημικοί καπνοί και η δημιουργία μικρών σωματιδίων είναι μια ανησυχία, όπως συμβαίνει με όλες τις τεχνολογίες PB 3D.

Απαιτήσεις μετά την επεξεργασία για διαφορετικές τεχνολογίες τρισδιάστατης εκτύπωσης

Δεν απαιτούν όλα τα αντικείμενα που δημιουργούνται με τρισδιάστατη εκτύπωση μετεπεξεργασία. Ωστόσο, πολλά χρειάζονται περισσότερη δουλειά μετά την ολοκλήρωση της δομής. Το αν ένα αντικείμενο χρειάζεται μετα-επεξεργασία εξαρτάται από το υλικό, την τεχνολογία, τις επιθυμητές αισθητικές ή μηχανικές ιδιότητες και άλλους παράγοντες.

Γενικά, υπάρχουν διάφοροι τύποι μετα-επεξεργασίας αντικειμένων με 3D εκτύπωση:

  •  Ρύθμιση ή/και σκλήρυνση

Σχεδόν όλες οι τρισδιάστατες δομές εκτύπωσης χρειάζονται λίγο χρόνο μετά την ολοκλήρωσή τους για να ωριμάσουν και να επιτύχουν βέλτιστες μηχανικές ιδιότητες. Τα αντικείμενα που κατασκευάζονται με διεργασίες με βάση την εξώθηση (ειδικά εκείνες που χρησιμοποιούν ημιστερεά μίγματα πολυμερών και διαλυτών) και μεθόδους που βασίζονται σε σκόνη χρησιμοποιώντας υλικά που έχουν εμποτιστεί με συνδετικά διαλύματα είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα στη μηχανική καταπόνηση αμέσως μετά την ολοκλήρωση. Στην περίπτωση αυτή, η μετα-επεξεργασία περιλαμβάνει το χρόνο εξάτμισης και σκλήρυνσης του διαλύτη. Σε ορισμένες περιπτώσεις (αλλά όχι πάντα), αυτό μπορεί να διευκολυνθεί με την αύξηση του εξαερισμού στις εγκαταστάσεις όπου φυλάσσονται ολοκληρωμένα αντικείμενα.

  •  Υποστήριξη ημιτελών δομών

Σύνθετες κατασκευές που περιέχουν προεξοχές μπορεί να μην είναι σταθερές κατά την κατασκευή χωρίς στηρίγματα, αν και προσωρινές. Αυτά τα στηρίγματα πρέπει να αφαιρεθούν μετά την ολοκλήρωση της δομής, αυξάνοντας τον χρόνο ολοκλήρωσης και το κόστος παραγωγής (ειδικά εάν αυτό περιλαμβάνει χειρωνακτική εργασία). Στην τρισδιάστατη εκτύπωση SLA, τα στηρίγματα για μια δομή τυπωμένη με θερμοπλαστικό μελάνι είναι πιο συχνά κατασκευασμένα από πολυβινυλική αλκοόλη. Δεδομένου ότι είναι διαλυτό, τέτοια στηρίγματα μπορούν εύκολα να αφαιρεθούν κατά τη διάρκεια της μετα-επεξεργασίας με ένα πίδακα νερού. Το τελευταίο, ωστόσο, απαιτεί υδραυλικά, πρόσβαση σε νερό και σύστημα απολύμανσης των λυμάτων (που μπορεί επίσης να αυξήσει το κόστος). Οι προσωρινές δομές στήριξης σε SLS και SHS είναι συνήθως κατασκευασμένες από αδιάβροχο υλικό που μπορεί να απομακρυνθεί με ηλεκτρική σκούπα ή να εκτοξευθεί με αέρα.

  •  Αφαίρεση περιττού υλικού

Αυτό είναι ζωτικής σημασίας για αντικείμενα που κατασκευάζονται με τις περισσότερες μεθόδους που βασίζονται σε σκόνη. Η περίσσεια σκόνης πρέπει να αφαιρεθεί χρησιμοποιώντας κενό, έκρηξη αέρα ή πίδακα νερού (και πάλι, αυτό προκαλεί ανησυχίες σχετικά με την παροχή νερού και την απολύμανση των λυμάτων).

  •  Γυάλισμα

Η στίλβωση είναι απαραίτητη για τη βελτίωση των μηχανικών χαρακτηριστικών των μηχανικών μερών (ειδικά εκείνων που υπόκεινται σε κίνηση και τριβή) και αντικειμένων με αυξημένη κοκκώδη επιφάνεια (όπως αυτά που παράγονται από επιλεκτική τήξη λέιζερ). Τα αντικείμενα με αισθητικές ιδιότητες μπορεί επίσης να χρειάζονται γυάλισμα.

– Σφράγιση των επιφανειακών πόρων

Αυτό είναι ένα σημαντικό βήμα μετά την επεξεργασία για τεχνολογίες που αποδίδουν αντικείμενα με αυξημένο πορώδες, όπως το SLS ή το SHS. Οι επιφανειακοί πόροι μπορούν να σφραγιστούν με αδιαπέραστα επιχρίσματα όπως κυανοακρυλικές επικαλύψεις ή με θερμή ισοστατική πίεση.

  • Ζωγραφική

Δεν απαιτείται συνήθως, καθώς οι περισσότερες διαδικασίες τρισδιάστατης εκτύπωσης χρησιμοποιούν διαφορετικά χρώματα υλικών ή διαφορετικά χρώματα συνδετικών.

Ποια διαδικασία για ποια; Βασικές σκέψεις κατά την επιλογή τεχνολογίας τρισδιάστατης εκτύπωσης κατάλληλης για μια συγκεκριμένη εφαρμογή

Ενώ όλες οι τεχνολογίες τρισδιάστατης εκτύπωσης μπορεί να έχουν αλληλεπικαλυπτόμενες εφαρμογές (π.χ. ταχεία δημιουργία πρωτοτύπων), υπάρχουν παράγοντες που μπορεί να επηρεάσουν την επιλογή μιας τεχνολογίας τρισδιάστατης εκτύπωσης για ένα συγκεκριμένο έργο ή μια συγκεκριμένη βιομηχανική λύση. Οι κύριες εκτιμήσεις είναι:

– Τύπος υλικού που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εκτύπωση ενός αντικειμένου. Πολλοί εκτυπωτές 3D στην αγορά ενδέχεται να χρησιμοποιούν ποικιλία διαφορετικών υλικών. Αρχιτεκτονικά μοντέλα, μοντέλα πώλησης και έκθεσης, καθώς και μοντέλα που κατασκευάζονται για εκπαιδευτικούς σκοπούς, μπορούν εύκολα να δημιουργηθούν από τεχνολογίες ColorJet, SLA και FDM που χρησιμοποιούν γύψο ή διαφορετικούς τύπους πλαστικού. Μικρά επιτραπέζια μηχανήματα που εξυπηρετούν χομπίστες και καλλιτέχνες βασίζονται συνήθως στην τεχνολογία FDM. Τα SLS/SLM και SHS χρησιμοποιούνται συνήθως όταν τα αντικείμενα πρέπει να είναι κατασκευασμένα από μέταλλο και μεταλλικά κράματα.

– Διαθεσιμότητα μηχανής τρισδιάστατης εκτύπωσης. Συνήθως, οι παραγγελίες για ένα συγκεκριμένο μηχάνημα βρίσκονται στην ουρά και λειτουργούν με τον τρόπο «πρώτης προτεραιότητας». Σε περιοχές όπου οι τρισδιάστατοι εκτυπωτές είναι ελάχιστα διαθέσιμοι, αυτός ο παράγοντας μπορεί να έχει πρωταρχική σημασία, επικρατώντας του τύπου υλικού.

– Διαθεσιμότητα υλικού. Το πλαστικό είναι ευπροσάρμοστο, διαθέσιμο και, εκτός από πολυμερή υψηλής απόδοσης, σχετικά φθηνό, ενώ το μέταλλο μπορεί να είναι πιο ακριβό.

– Κόστος παραγωγής ανά αντικείμενο. Αυτά σχετίζονται με την τεχνολογία που χρησιμοποιείται για τη δημιουργία αντικειμένων, το χρησιμοποιούμενο υλικό και τις ανάγκες για μετεπεξεργασία. Αναφέρθηκε ήδη ότι, σε αντίθεση με τη μετάδοση, η κλιμάκωση της τρισδιάστατης εκτύπωσης δεν μειώνει πάντα την τιμή μονάδας. Η τιμή ανά αντικείμενο περιλαμβάνει όχι μόνο το κόστος παραγωγής αλλά και το κόστος μετά την επεξεργασία (εάν χρειάζεται) καθώς και το κόστος που προκύπτει από μέτρα μείωσης της ρύπανσης του περιβάλλοντος. Μεταξύ των κοινώς χρησιμοποιούμενων τεχνολογιών PB, το SHS είναι μια πιο οικονομικά προσανατολισμένη λύση από το SLS, καθώς η αγορά και η συντήρηση μιας θερμικής κεφαλής εκτυπωτή είναι γενικά λιγότερο δαπανηρή από μια κεφαλή εκτυπωτή λέιζερ. Τα αντικείμενα που κατασκευάζονται από την SHS είναι επομένως γενικά φθηνότερα από αυτά που κατασκευάζονται από την SLS και η διαδικασία μπορεί εύκολα να μειωθεί για παραγγελίες μικρού μεγέθους.

– Ταχύτητα κατασκευής, συμπεριλαμβανομένης της μετεπεξεργασίας και του χρόνου παραμονής στην ουρά παραγγελιών. Τα μικρά αντικείμενα μπορούν να εκτυπωθούν σε λίγα λεπτά έως ώρες. Ο χρόνος εκτύπωσης αυξάνεται με το μέγεθος των αντικειμένων σε μια ολόκληρη ημέρα και, τελικά, με πολύ μεγάλα αντικείμενα, έως και αρκετές ημέρες, αν και το τελευταίο είναι σπάνιο. Οι χρόνοι μετά την επεξεργασία μπορεί επίσης να προβληματίσουν. Οι τεχνολογίες εξώθησης δεν χρειάζονται συνήθως φινίρισμα, αλλά το αντικείμενο μπορεί να χρειαστεί χρόνο για να σταθεροποιηθεί και να σκληρύνει. Τα αντικείμενα που κατασκευάζονται από το ColorJet χρειάζονται χρόνο για στέγνωμα και ρύθμιση. Οι τεχνολογίες που βασίζονται σε σκόνη χρειάζονται σχεδόν πάντα χρόνο για μετεπεξεργασία και αυξάνουν το κόστος καθώς και το χρόνο για την κατασκευή,

– Ιδιότητες του τελικού προϊόντος (μηχανικές ιδιότητες, αισθητική αξία)

Το πλαστικό μελάνι τρισδιάστατης εκτύπωσης μπορεί να διατίθεται σε πολλές διαφορετικές ποικιλίες με διαφορετικές μηχανικές ιδιότητες. Ανάλογα με τον σκοπό της χρήσης του αντικειμένου, οι προτιμήσεις μπορεί να είναι για το πλαστικό (ελαφρύ και, ταυτόχρονα, ανθεκτικό, εύκολα βαμμένο, εύκολα γυαλισμένο, θερμο-φωτοδιαλυτό) ή για μέταλλο (ανθεκτικό, ανθεκτικό στην υπεριώδη ακτινοβολία και τη θερμότητα) , ο χρωματισμός και η στίλβωση μπορεί να χρειάζονται ειδικό εξοπλισμό και διαδικασίες).

Ανάμεσα στην πληθώρα των ποικιλιών του πλαστικού, διατίθενται διαφορετικά πολυμερή με διαφορετική μηχανική ανθεκτικότητα. Γενικά, η εκτύπωση SLA επιτρέπει λεπτές στιλβωμένες κατασκευές με εξαιρετική λεπτομέρεια, ωστόσο, αρκετά εύθραυστες. Επομένως, δεν είναι κατάλληλο για εφαρμογές όπου η ανθεκτικότητα είναι ζωτικής σημασίας. Το FDM αποδίδει σημαντικά πιο ανθεκτικά αντικείμενα από το SLA, ωστόσο υπάρχουν διαφορετικοί βαθμοί μηχανικής ανθεκτικότητας ανάλογα με το υλικό που χρησιμοποιείται. Γενικά, τα PVA, ABS και PLA είναι μελάνια “βασικών” για FDM. Αυτά είναι σχετικά φθηνά, αλλά τα αντικείμενα που προκύπτουν είναι επιρρεπή σε στρέβλωση. Τα αντικείμενα που εκτυπώνονται με PLA είναι επίσης αρκετά εύθραυστα. Τα αντικείμενα που εκτυπώνονται με ABS είναι φωτοευαίσθητα. Η χρήση πολυουρεθάνης αποδίδει μέρη με σημαντικό βαθμό ευελιξίας. Το επόμενο βήμα στην ποιότητα FDM είναι PC, PETG και PPE. Αυτά τα υλικά χρησιμοποιούνται κυρίως ως υλικά μηχανικής για την κατασκευή μηχανικών μερών και εργαλείων. Το PETG είναι επίσης ασφαλές για τρόφιμα. Τα μελάνια FDM υψηλής αντοχής είναι PEI και PEEK που χρησιμοποιούνται για εξαρτήματα και συσκευές που πρέπει να παρουσιάζουν πολύ υψηλή αντίσταση, όπως κινούμενα ή/και μέρη που φέρουν καταπόνηση και όταν η θερμική σταθερότητα είναι ζωτικής σημασίας. Όλα τα τρισδιάστατα εκτυπωμένα αντικείμενα μπορεί να είναι επιρρεπή σε αποκόλληση υπό πίεση, αλλά τα εκτυπωμένα αντικείμενα PEEK παρουσιάζουν εξαιρετική πρόσφυση από στρώμα σε στρώμα και ως εκ τούτου είναι πολύ ανθεκτικά. Είναι, ωστόσο, αρκετά ακριβό και καθώς το σημείο τήξης είναι υψηλότερο από τα άλλα μελάνια FDM, ο εκτυπωτής πρέπει να έχει την ικανότητα να θερμαίνει το ακροφύσιο σε υψηλές θερμοκρασίες.

Οι τρισδιάστατες εκτυπωμένες δοσολογικές μορφές φαρμάκων και η σκαλωσιά των ιστών έχουν συγκεκριμένες απαιτήσεις που γενικά ικανοποιούνται με μεθόδους εξώθησης (ειδικά ημιστερεή εξώθηση όπως η EXT) και μερικές από τις τεχνολογίες που βασίζονται σε σκόνη (αλλά όχι αυτές που απαιτούν μεγάλες ποσότητες ακτινοβολούμενης ή υπέρυθρης ενέργειας όπως το SLS και SHS). Καθώς το ελάχιστο πάχος στρώματος για το EXT είναι σχεδόν 1 mm, οι τυπωμένες δομές είναι πιο χοντρές και λιγότερο λεπτομερείς.

Οι μέθοδοι που βασίζονται σε σκόνη έχουν πολύ υψηλό βαθμό ανάλυσης και συνεπώς παρέχουν καλύτερη αναπαραγωγή των λεπτομερειών. Αυτό ισχύει ιδιαίτερα για το SLS (ωστόσο, λειτουργεί κυρίως με μεταλλικές σκόνες), αλλά το MJF (λειτουργεί εύκολα με το πλαστικό) συγκρίνεται επίσης ευνοϊκά ως προς την ανάλυση.

Οι δομές που παράγονται από τις περισσότερες τεχνολογίες PB είναι επίσης ανθεκτικές (εκτός από αντικείμενα γύψου με εκτύπωση ColorJet), αλλά το πορώδες μπορεί να θέσει σε κίνδυνο τις μηχανικές τους ιδιότητες. Όταν το τελευταίο είναι ένα σοβαρό ζήτημα, το SLM μπορεί να είναι μια λύση, υπό την προϋπόθεση ότι πραγματοποιείται η κατάλληλη μετεπεξεργασία.

– Περιβαλλοντικές ανησυχίες (που σχετίζονται με την κατασκευή ή τη μεταποίηση ή τη βιοδιασπασιμότητα των απορριμμένων αντικειμένων).

Με βάση την εξώθηση και μερικές από τις τεχνολογίες ΡΒ δημιουργούν αναθυμιάσεις διαλυτών. Οι τεχνολογίες που βασίζονται σε σκόνη παράγουν μεγάλες ποσότητες μικρών σωματιδίων. Όλα αυτά έχουν σημαντικές πιθανές επιβλαβείς επιδράσεις και πρέπει να φιλτραριστούν ή/και να απολυμανθούν.

Κοινά χρησιμοποιούμενα λογισμικά για τρισδιάστατη εκτύπωση

Η τρισδιάστατη εκτύπωση χρησιμοποιεί δεδομένα που έχουν συλλεχθεί προηγουμένως και έχουν αποθηκευτεί σε έναν φορέα ψηφιακών πληροφοριών. Κατά τη διάρκεια της τρισδιάστατης εκτύπωσης ενός πολύπλοκου αντικειμένου, οι στιγμιαίες αλλαγές στο μοτίβο εναπόθεσης του συνεχούς στρώματος υπαγορεύονται από τις πληροφορίες συγκεκριμένων διατομών στο ψηφιακό αρχείο που αντιπροσωπεύουν πώς ακριβώς πρέπει να μοιάζει η δομή στο συγκεκριμένο σημείο. Έτσι, δομές με απλά μοτίβα μπορεί να αντιπροσωπεύονται από λιγότερες διατομές ενώ τα ψηφιακά αρχεία για δομές με περίπλοκα σχέδια θα έπρεπε να περιέχουν περισσότερες διατομές, υποδεικνύοντας πού και πώς αλλάζει η δομή. Κάθε διατομή αντιπροσωπεύει ένα κλειστό πολύγωνο και αντιστοιχεί σε διαφορετική θέση κατά μήκος του άξονα z. Οι διατομές δεν πρέπει να επικαλύπτονται ή να τέμνονται και, στην καλύτερη περίπτωση, πρέπει να είναι χωρίς κενά ενδιάμεσα. Μικρές αποκλίσεις ενδέχεται να εξαλειφθούν από το λογισμικό χωρίς σημαντικές αλλαγές στο σχήμα και τη δομή.

Οι εικόνες σχεδιασμού με τη βοήθεια υπολογιστή (CAD) χρησιμοποιούνται συχνότερα για εκτύπωση 3D. Αυτές μπορεί να είναι οι συμβατικές εικόνες 2D DWG που δημιουργούνται από το AutoCAD, αν και αυτές πρέπει να μετατραπούν σε 3D με καθορισμένο λογισμικό, π.χ., Sketchup Pro. Η μορφή αρχείου στερεολιθογραφίας (Standard Tessellation Language, STL) ήταν η πρώτη που ορίστηκε ειδικά για την παραγωγή προσθέτων. Αναπτύχθηκε και προσαρμόστηκε για χρήση στις δεκαετίες του 1980 από την 3D Systems, μια εταιρεία που ιδρύθηκε από τον Charles Hull, τον εφευρέτη της SLA. Εκτός από το AutoCAD, συνήθως χρησιμοποιούμενο λογισμικό CAD ικανό να εξάγει ή να μετατρέπει δεδομένα σε μορφή STL είναι τα Alibre, Mechanical Desktop, I-DEAS, SolidDesigner, ProE και άλλα. Οι μετατροπείς στο διαδίκτυο είναι επίσης άμεσα διαθέσιμοι, όπως το AnyConv (https://anyconv.com/stl-converter/).

Οι εικόνες που δημιουργούνται από έναν τρισδιάστατο σαρωτή ή από τη φωτογραμμετρία μιας τυπικής 2D ψηφιακής εικόνας (που λαμβάνεται από μια ψηφιακή φωτογραφική μηχανή) μπορεί επίσης να χρησιμεύσουν για την κατασκευή προσθέτων. Ανάλογα με την πηγή των δεδομένων για το αντικείμενο, το τελικό αποτέλεσμα μπορεί να είναι περισσότερο ή λιγότερο πιστό στην αρχική εικόνα. Οι εικόνες CAD συνήθως οδηγούν σε αντικείμενα με σημαντικά λιγότερα σφάλματα από άλλους τύπους ψηφιακών δεδομένων. Αυτά τα σφάλματα μπορεί να διορθωθούν αργότερα. Υπάρχουν πολλές διαφορετικές μάρκες λογισμικού για φωτογραμμετρία, κυρίως Microsoft Windows (Zephyr3D, PhotoModeler, PhotoSynth και άλλα), αλλά ορισμένα μπορεί να χρησιμοποιούν άλλα λειτουργικά συστήματα όπως Linux και MacOS (π.χ. Pix4D Mapper, Metashape, OpenDroneMap και άλλα) Το Μπορείτε να δείτε εδώ μια λεπτομερή λίστα των συνηθισμένων λογισμικών φωτογραμμετρίας με τα βασικά χαρακτηριστικά τους:

https://en.wikipedia.org/wiki/Comparison_of_photogrammetry_software

Διατίθενται επίσης διαδικτυακά εργαλεία για φωτογραμμετρία, όπως τα παραπάνω AnyConv (https://anyconv.com/stl-converter/).

Οδηγίες σχεδίασης τρισδιάστατης εκτύπωσης

Για να εκτυπωθεί ένα αντικείμενο, εάν ένα αρχείο STL δεν είναι διαθέσιμο, πρέπει να εξάγεται από ένα κομμάτι λογισμικού όπως το AutoCAD ή άλλα (βλ. Παραπάνω). Τα περισσότερα επαγγελματικά λογισμικά τρισδιάστατης μοντελοποίησης είναι ιδιόκτητα, αλλά διατίθεται και δωρεάν λογισμικό, κυρίως για εκπαιδευτικούς σκοπούς για αρχάριους στο χώρο και για χομπίστες (FreeCAD, 3D Slash, TinkerCAD, Vectary, SketchUp, Leopoly, Sculptris, Rhinoceros και άλλα). Στη συνέχεια, το αρχείο STL που προκύπτει χρησιμοποιείται από άλλο λογισμικό «slicer», όπως το Repetier, OctoPrint, Z-Suite, Tinkerine Suite, Cura, PrusaSlicer, Simplify3D και άλλα για τη δημιουργία ενός αρχείου που περιέχει σειρά λεπτών στρωμάτων. Το αρχείο που προκύπτει χρησιμοποιείται από τον κεντρικό υπολογιστή τρισδιάστατου εκτυπωτή για τη δημιουργία ενός τρισδιάστατου αντικειμένου. Ορισμένα κομμάτια λογισμικού κοπής λειτουργούν επίσης ως κεντρικοί υπολογιστές εκτυπωτών, όπως Cura, 3DPrinterOS, OctoPrint, MatterControl και άλλοι. Ενώ τα περισσότερα επαγγελματικά λογισμικά τρισδιάστατης μοντελοποίησης είναι συνήθως αυτόνομα, το δωρεάν λογισμικό μπορεί να είναι διαθέσιμο ως πρόσθετο και είναι πολύ πιο πιθανό να είναι διαθέσιμο για λειτουργικά συστήματα εκτός των Windows.

Τα αρχεία STL περιέχουν ακατέργαστα δεδομένα πλέγματος βασισμένα σε τριγωνισμούς της επιφάνειας των μοντέλων CAD. Έτσι, η επιφάνεια κάθε όψης του αντικειμένου αντιπροσωπεύεται από ένα πλέγμα πολυγώνου που πρέπει να συμμορφώνεται με ένα σύνολο κανόνων. Οι βασικοί κανόνες είναι τέσσερις, δηλαδή:

– Ο κανόνας «κορυφή σε κορυφή» – κάθε τρίγωνο πρέπει να μοιράζεται 2 κορυφές με τα γειτονικά του τρίγωνα.

– Ο «κανόνας του δεξιού χεριού»- οι κορυφές πρέπει να αναγράφονται αριστερόστροφα.

– Ο κανόνας «δείχνοντας προς τα έξω» – η κατεύθυνση του κανονικού διανύσματος πρέπει να δείχνει προς τα έξω.

– Ο «θετικός κανόνας» – όλες οι συντεταγμένες των κορυφών των τριγώνων πρέπει να αναπαριστώνται με θετικούς αριθμούς.

Παράδειγμα στην Εικόνα 9.

Εικόνα 9Ένα πλέγμα πολυγώνου που αντιπροσωπεύει μια τρισδιάστατη εικόνα ενός δελφινιού. Πηγή: Chrschn, Public domain, via Wikimedia Commons.

Τα αρχεία STL ενδέχεται να αποθηκεύουν πληροφορίες σε δυαδική κωδικοποίηση ή σε κωδικοποίηση ASCII. Τα αρχεία σε δυαδικό αρχείο είναι, γενικά, μικρότερα και μπορούν να μοιραστούν εύκολα, ενώ τα αρχεία ASCII χρησιμοποιούνται για μη αυτόματη ανάγνωση και έλεγχο του αρχείου STL, π.χ. όταν δοκιμάζετε νέες διεπαφές CAD.

Τα σύνθετα αντικείμενα ενδέχεται να αποτελούν πρόκληση για τα αρχεία STL, καθώς υπάρχουν πάρα πολλές επιφάνειες για να ληφθούν υπόψη στους υπολογισμούς. Επιπλέον, τα πρώτα αρχεία STL είχαν πολύ περιορισμένες ιδιότητες για την αναπαράσταση του χρώματος, της υφής, του υλικού και της εσωτερικής δομής (αν και αυτό επιλύθηκε αργότερα). Ορισμένοι τύποι λογισμικού, όπως το πρωτότυπο AutoCAD, μπορούν να εξάγουν σχέδια στερεών αντικειμένων μόνο σε STL. Οι μη γειτονικές επιφάνειες (π.χ. που περιέχουν κενά ή επικαλύψεις) είναι δύσκολο να επεξεργαστούν ή να προσαρμοστούν σε αρχεία STL και δεν θα εκτυπωθούν. Έτσι, το 2006 κυκλοφόρησε μια βελτιωμένη έκδοση μορφών STL που τελικά μετατράπηκε σε μια άλλη, πιο ευέλικτη μορφή αρχείου CAD, τη μορφή πρόσθετου αρχείου κατασκευής (AMF). Παρ ‘όλα αυτά, πολλοί 3D εκτυπωτές που χρησιμοποιούνται σήμερα, ειδικά αυτοί που λειτουργούν σε μικρή κλίμακα, θα χρησιμοποιούν αρχεία STL.

Τα αρχεία AMF μπορούν εύκολα να αντιπροσωπεύσουν την εσωτερική δομή χρησιμοποιώντας διάταξη πολυγώνου προσώπου-κορυφής και καμπύλα τρίγωνα για να ορίσουν μια διακριτή μονάδα όγκου υλικού. Μπορεί να καθοριστούν πολλαπλοί τόμοι για ένα μόνο αντικείμενο. Τα αρχεία AMF περιέχουν επίσης πληροφορίες σχετικά με το υλικό, το χρώμα και την υφή του εκτυπωμένου αντικειμένου ή των μερών του και τη σειρά εκτύπωσης.

Ο Jonathan Hiller, ένας από τους εφευρέτες της μορφής αρχείου AMF, φιλοξενεί έναν λεπτομερή και φιλικό προς το χρήστη ιστότοπο που παρέχει λογισμικό CAD ή τρισδιάστατη μοντελοποίηση και σεμινάρια: https://sites.google.com/site/jonhiller/software.

Δωρεάν αρχιτεκτονικά σχέδια CAD για λογισμικό AutoCAD και τρισδιάστατης μοντελοποίησης είναι άμεσα διαθέσιμα στο Διαδίκτυο, π.χ. https://www.arcat.com/, https://www.tinkercad.com/, https://www.sketchup.com/ και άλλα. Μια δωρεάν εικόνα 3D CAD παρουσιάζεται στην Εικόνα. 10.

Εικόνα 10. Ένα μοντέλο 3D CAD για χρήση σε τρισδιάστατη εκτύπωση. Πηγή: OKFoundryCompany from Richmond, USA, CC BY 2.0 <https://creativecommons.org/licenses/by/2.0>, via Wikimedia Commons.

Διατίθενται δωρεάν αρχεία STL, αρχεία εκτυπωτή 3D και σχέδια εκτυπωτών 3D για χρήση από www.thingiverse.com, www.youmagine.com, www.myminifactory.com, https://library.zortrax.com/, https://www.cgtrader.com/, https://cults3d.com/en, https://www.youmagine.com/ https://www.turbosquid.com/Search/3D-Models/free/stl,  και άλλους ιστότοπους.

Το λογισμικό επεξεργασίας STL είναι διαθέσιμο για πολλές πηγές, όπως π.χ. https://www.meshlab.net/, https://www.blender.org/, https://www.freecadweb.org/, https://www.3dslash.net/index.php, https://www.sketchup.com/, και άλλες.

Test: LO2 Basic level

Βιβλιογραφικές αναφορές

  • Kodama H. 1981. Automatic method for fabricating a three-dimensional plastic model with photo-hardening polymer. Rev Sci Instrum, 52(11): 1770–73.
  • Melchels FP, Feijen J, Grijpma DW. 2009. A poly(D,L-lactide) resin for the preparation of tissue engineering scaffolds by stereolithography. Biomaterials, 30(23-24):3801-9.
  • Shelby A. Skoog, Peter L. Goering, Roger J. Narayan. 2014. Stereolithography in tissue engineering. J Mater Sci Mater Med, 25: 845–56.
  • Alhnan A, Okwuosa M, Chijioke T, et al. 2016. Emergence of 3D Printed Dosage Forms: Opportunities and Challenges. Pharm Res, 33 (8): 1817­-32.
  • Goyanes A, Buanz AB, Basit AW, et al. 2014. Fused-filament 3D printing (3DP) for fabrication of tablets. Int J Pharm. 2014;476(1–2):88–92.
  • Wang J, Shaw LL, Cameron TB. 2006. Solid Freeform Fabrication of Permanent Dental Restorations via Slurry Micro-Extrusion. J Am Ceram Soc, 89 (1): 346–9.
  • Khaled SA, Burley JC, Alexander MR, et al. 2014. Desktop 3D printing of controlled release pharmaceutical bilayer tablets. Int J Pharm, 461(1–2):105–11.
  • Azad MA, Olawuni D, Kimbell G, et al. 2020. Polymers for Extrusion-Based 3D Printing of Pharmaceuticals: A Holistic Materials-Process Perspective. Pharmaceutics, 12(2):124.
  • Chua CK, Leong KF, An J. 2014. 1 – Introduction to rapid prototyping of biomaterials. Woodhead Publishing.
  • Sun Y, Soh S. 2015. Printing Tablets with Fully Customizable Release Profiles for Personalized Medicine. Adv Mater, 27(47):7847-53.
  • Edelmann A, Dubis M, Hellmann R. 2020. Selective Laser Melting of Patient Individualized Osteosynthesis Plates-Digital to Physical Process Chain. Materials (Basel), 13(24):5786.
  • Tan W, Gao C, Feng P, et al. 2021. Dual-functional scaffolds of poly(L-lactic acid)/nanohydroxyapatite encapsulated with metformin: Simultaneous enhancement of bone repair and bone tumor inhibition. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl, 120:111592.
  • Hiller J, Lipson H. 2009. STL 2.0: A Proposal for a Universal Multi-Material Additive Manufacturing File Format”. Solid Freeform Fabrication Symposium (SFF’09), Aug 3-5 2009, Austin, TX, USA.
  • Kodama H. 1981. Automatic method for fabricating a three-dimensional plastic model with photo-hardening polymer. Rev Sci Instrum, 52(11): 1770–73.
  • Melchels FP, Feijen J, Grijpma DW. 2009. A poly(D,L-lactide) resin for the preparation of tissue engineering scaffolds by stereolithography. Biomaterials, 30(23-24):3801-9.
  • Shelby A. Skoog, Peter L. Goering, Roger J. Narayan. 2014. Stereolithography in tissue engineering. J Mater Sci Mater Med, 25: 845–56.
  • Alhnan A, Okwuosa M, Chijioke T, et al. 2016. Emergence of 3D Printed Dosage Forms: Opportunities and Challenges. Pharm Res, 33 (8): 1817­-32.
  • Goyanes A, Buanz AB, Basit AW, et al. 2014. Fused-filament 3D printing (3DP) for fabrication of tablets. Int J Pharm. 2014;476(1–2):88–92.
  • Wang J, Shaw LL, Cameron TB. 2006. Solid Freeform Fabrication of Permanent Dental Restorations via Slurry Micro-Extrusion. J Am Ceram Soc, 89 (1): 346–9.
  • Khaled SA, Burley JC, Alexander MR, et al. 2014. Desktop 3D printing of controlled release pharmaceutical bilayer tablets. Int J Pharm, 461(1–2):105–11.
  • Azad MA, Olawuni D, Kimbell G, et al. 2020. Polymers for Extrusion-Based 3D Printing of Pharmaceuticals: A Holistic Materials-Process Perspective. Pharmaceutics, 12(2):124.
  • Chua CK, Leong KF, An J. 2014. 1 – Introduction to rapid prototyping of biomaterials. Woodhead Publishing.
  • Sun Y, Soh S. 2015. Printing Tablets with Fully Customizable Release Profiles for Personalized Medicine. Adv Mater, 27(47):7847-53.
  • Edelmann A, Dubis M, Hellmann R. 2020. Selective Laser Melting of Patient Individualized Osteosynthesis Plates-Digital to Physical Process Chain. Materials (Basel), 13(24):5786.
  • Tan W, Gao C, Feng P, et al. 2021. Dual-functional scaffolds of poly(L-lactic acid)/nanohydroxyapatite encapsulated with metformin: Simultaneous enhancement of bone repair and bone tumor inhibition. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl, 120:111592.
  • Hiller J, Lipson H. 2009. STL 2.0: A Proposal for a Universal Multi-Material Additive Manufacturing File Format”. Solid Freeform Fabrication Symposium (SFF’09), Aug 3-5 2009, Austin, TX, USA.

Η εφαρμογή τρισδιάστατης εκτύπωσης και ICT για πράσινα προϊόντα και διαδικασίεςΗ εφαρμογή τρισδιάστατης εκτύπωσης και ICT για πράσινα προϊόντα και διαδικασίες

Προχωρημένο επίπεδο

Η τρισδιάστατη βιοτυπία είναι μια εξελισσόμενη τεχνολογία με εφαρμογές σε όλο το φάσμα της βιοϊατρικής έρευνας.

Περιεχόμενα

 

Πεδία εφαρμογής της τρισδιάστατης βιοτυπίας

Η τρισδιάστατη βιοτυπία είναι μια εξελισσόμενη τεχνολογία με εφαρμογές σε όλο το φάσμα της βιοϊατρικής έρευνας. Η μέθοδος που χρησιμοποιεί ένα βιολογικό υπόστρωμα ή «βιοσύνδεση», κατασκευασμένη από δομικά συστατικά, μέσα ανάπτυξης και κύτταρα, μπορεί να παράγει σε εξοπλισμό τρισδιάστατης εκτύπωσης βιολογικές δομές που μιμούνται στενά τη δομή των κυττάρων στους ζωντανούς οργανισμούς. Χρησιμοποιώντας το ίδιο μοντέλο κατασκευής με την παραδοσιακή τρισδιάστατη εκτύπωση, ένας αριθμός 2D φέτες διαιρείται από ένα μοντέλο 3D από έναν υπολογιστή για να εκτυπώσει μια σωστή βιολογική σύνθεση στρώμα με στρώμα με ακριβή διάταξη ιστών και κυττάρων. Η τρισδιάστατη προσέγγιση βιοεκτύπωσης δίνει την ευκαιρία επίλυσης ζητημάτων στην ανάπτυξη φαρμάκων, στην αναγεννητική ιατρική, στη δωρεά οργάνων και στη θεραπεία του καρκίνου. Αυτή η αναδυόμενη τεχνολογία προσφέρει μεγάλη ακρίβεια στη χωρική τοποθέτηση των κυττάρων, των πρωτεϊνών, του DNA, των σωματιδίων του φαρμάκου, των αυξητικών παραγόντων και των βιολογικά δραστικών ουσιών για να καθοδηγήσει τον καλύτερο σχηματισμό ιστών. Αυτή η ισχυρή τεχνολογία φαίνεται να είναι πιο ελπιδοφόρα για τη βελτίωση της κατασκευής ιστών προς φυσιολογικά σχετικές κατασκευές ιστών, μοντέλα ιστών, ιστούς και όργανα και μοντέλα οργάνων σε τσιπ για ιατρική και φαρμακευτική.

Η τεχνολογία βιο-εκτύπωσης έχει ευρεία εφαρμογή σε διάφορους τομείς όπως η μηχανική ιστών και η αναγεννητική ιατρική, η μεταμόσχευση και οι κλινικές, ο έλεγχος φαρμάκων και οι δοκιμές υψηλής απόδοσης και η έρευνα για τον καρκίνο (Εικ. 1). Η βιοτυπία για τη μηχανική ιστών και την αναγεννητική ιατρική έχει μελετηθεί για περισσότερο από μια δεκαετία και έχουν δημιουργηθεί ανατομικά σωστές κυτταρικές κατασκευές και σκαλωσιές για διάφορους τύπους ιστών: από συνδετικούς και επιθηλιακούς ιστούς έως μυϊκούς και νευρικούς ιστούς. Με το μεγάλο πλεονέκτημά του στη μοντελοποίηση και την τοποθέτηση με ακρίβεια πολλών τύπων κυττάρων, η βιοτυπία έχει ξεπεράσει μία από τις σημαντικότερες ελλείψεις των παραδοσιακών τεχνικών κατασκευής σκαλωσιάς και έχει διευκολύνει την κατασκευή ιστών που μοιάζουν με ιθαγενείς με ετεροκυτταρικό μικροπεριβάλλον. Παρόλο που το μεγαλύτερο μέρος της προσπάθειας έχει στοχεύσει στη θεμελιώδη επιστήμη πίσω από σημαντικές τεχνικές βιοεκτύπωσης όπως η βιο-εκτύπωση με λέιζερ, σταγονίδια και εξώθηση, πρόσφατα δόθηκε σημαντική προσοχή στη βιοεκτύπωση για τη λειτουργική παραγωγή ιστών. Ειδικότερα, έχει αφιερωθεί σημαντική εργασία στη βιοεκτύπωση για μεταμόσχευση. Καθώς έχει επιτευχθεί πρόσθετη πρόοδος στα βιοϋλικά, τις τεχνολογίες κυττάρων και μεταμόσχευσης, η βιοτυπία θα χρησιμοποιηθεί «από πάγκο σε κρεβάτι» όταν επιτρέπεται για ανθρώπινη χρήση και έχει πολλά πλεονεκτήματα σε χειρουργεία στο εγγύς μέλλον. Πριν από τη μετάβαση στην κλινική πρακτική, η βιο-εκτύπωση έχει ήδη κάνει ένα μεγάλο άλμα στη φαρμακευτική χρήση επειδή δεν απαιτεί κανονιστικές εγκρίσεις και υπάρχει αυτή τη στιγμή μια αναδυόμενη αγορά βιο-εκτύπωσης για την κατασκευή ιστών για δοκιμές φαρμάκων και δοκιμές υψηλής απόδοσης. Μοντέλα βιοεκτυπωμένων ιστών (π.χ. συκώτι), κατασκευασμένα από πολλαπλούς τύπους κυττάρων και διευκολύνουν ένα σύνθετο ετεροκυτταρικό φυσιολογικό περιβάλλον, έχουν χρησιμοποιηθεί στον έλεγχο φαρμάκων. Επιπλέον, η βιοτυπία εφαρμόστηκε πρόσφατα στην έρευνα για τον καρκίνο για τη διερεύνηση της παθολογίας του καρκίνου, της ανάπτυξης και της μετάστασης σε ένα φυσιολογικά σχετικό μικροπεριβάλλον. Εδώ, παρουσιάζεται μια ολοκληρωμένη ανασκόπηση των τομέων εφαρμογής της τεχνολογίας βιοεκτύπωσης και παρουσιάζεται σε βάθος συζήτηση για επιτυχημένα βιοεκτυπωμένους τύπους ιστών για μηχανική ιστών και αναγεννητική ιατρική, μεταμόσχευση και κλινικές, διαλογή φαρμάκων και δοκιμές υψηλής απόδοσης και έρευνα για τον καρκίνο. Για κάθε τομέα εφαρμογής, συζητούνται τα πλεονεκτήματα και οι περιορισμοί των υφιστάμενων τεχνολογιών.

Εικόνα 1. Πεδία εφαρμογής της τεχνολογίας βιοτυπίας

Μηχανική των ιστών και αναγεννητική ιατρική

Η βιο-εκτύπωση λειτουργικών οργάνων σε κλινικό επίπεδο παραμένει άπιαστη, καθώς υπάρχουν αρκετές προκλήσεις, όπως η ενσωμάτωση του αγγειακού δικτύου από τις αρτηρίες και τις φλέβες έως τα τριχοειδή αγγεία, συνδυασμός διαφόρων τύπων κυττάρων για την ανακεφαλαιοποίηση σύνθετης βιολογίας οργάνων και περιορισμένη δομική και μηχανική ακεραιότητα και μακροπρόθεσμη λειτουργικότητα. Παρά τις προκλήσεις αυτές, μια μεγάλη ποικιλία ιστών έχει εκτυπωθεί με επιτυχία, όπως λεπτοί ή κοίλοι ιστοί, για παράδειγμα αιμοφόρα αγγεία ή ιστοί που δεν χρειάζονται αγγείωση, όπως ο χόνδρος.

Οστικός ιστός

Το οστό είναι ένας βασικός ιστός του σώματος και βασικό συστατικό του μυοσκελετικού συστήματος. Γενικά, ξεπερνά την προσβολή και τον εκφυλισμό μέσω των εξαιρετικά αναγεννητικών δυνατοτήτων του. Ωστόσο, σε ορισμένες περιπτώσεις το οστό δεν θεραπεύεται σωστά και απαιτείται θεραπεία. Το υπάρχον πρότυπο θεραπειών φροντίδας έχει σημαντικές αδυναμίες. Οι καινοτομίες στη βιοτυπία και τη μηχανική ιστών υπόσχονται πολλά για τη βελτίωση τόσο της ποιότητας όσο και της αποτελεσματικότητας των θεραπειών αποκατάστασης των οστών. Η βιοεκτύπωση, θεωρητικά, δεν συμβαίνει ακόμη επειδή προσαρμοσμένα απορροφήσιμα ικριώματα δεν κατασκευάζονται επί του παρόντος με αυξητικούς παράγοντες ή αυτόλογα κύτταρα. Ωστόσο, οι τελευταίες έρευνες βελτίωσαν ραγδαία τις τεχνικές τρισδιάστατης εκτύπωσης καθώς και υλικά εκτύπωσης 3D με ιδιότητες που έχουν ρυθμιστεί για να ανακατασκευάσουν ελαττώματα ειδικά για τον ασθενή. Αυτή η έρευνα φαίνεται να οδηγεί σε ένα μέλλον απορροφήσιμων ικριωμάτων που ενσωματώνουν κατάλληλους αυξητικούς παράγοντες και οστεογονωτικά κύτταρα. Ο χρόνος θα αποκαλύψει εάν αυτές οι θεραπείες θα γίνουν ευρέως διαθέσιμες και τυπικής φροντίδας.

Σε μια πρόσφατη μελέτη, ορισμένοι συγγραφείς χρησιμοποίησαν ένα θερμικό βιο -εκτυπωτή inkjet για να κατασκευάσουν σκαλωσιές διμεθακρυλικής πολυ (αιθυλενογλυκόλης) (PEGDMA). Νανοσωματίδια βιοδραστικού γυαλιού και υδροξυαπατίτη (ΗΑ) χρησιμοποιήθηκαν για την ταυτόχρονη εκτύπωση ανθρώπινων μεσεγχυματικών βλαστικών κυττάρων (hMSCs) που προέρχονται από μυελό των οστών υπό ταυτόχρονο πολυμερισμό. Αυτή η προσέγγιση επέτρεψε την ομοιόμορφη κατανομή των hMSC σε σύγκριση με τα hMSC με χειροκίνητη πιπέτα, τα οποία συσσωρεύτηκαν στο κάτω μέρος του ικριώματος λόγω της βαρύτητας. Οι βιογραφικές δομές που περικλείουν hMSCs και ΗΑ παρουσίασαν την υψηλότερη κυτταρική βιωσιμότητα, παραγωγή κολλαγόνου και αλκαλική φωσφορική δραστηριότητα με αυξημένο συντελεστή συμπίεσης μετά από καλλιέργεια 21 ημερών in vitro. Τα σωματίδια βιοεκτύπωσης ΗΑ διεξήχθησαν επίσης για σκοπούς βιοεκτύπωσης επί τόπου, όπου χρησιμοποιήθηκε ένα σύστημα βιοεκτύπωσης με βάση λέιζερ για την εναπόθεση νανοσωματιδίων ΗΑ σε ελαττώματα καλβαρίας ποντικού.

Σε μια άλλη μελέτη, κατασκευάσματα ετεροκυτταρικού ιστού κατασκευασμένα από υδρογέλες Matrigel ™ και αλγινικά βιοτυπώθηκαν. Ενδοθηλιακά προγονικά και πολυδύναμα στρωματικά κύτταρα βιοτυπώθηκαν με χωρικά ελεγχόμενο τρόπο. Τα λαμβανόμενα κατασκευάσματα εμφυτεύθηκαν υποδορίως σε ποντίκια με ανοσοανεπάρκεια. Με την ενσωμάτωση οστεοεπαγωγικών διφασικών μικροσωματιδίων φωσφορικού ασβεστίου, τα πολυδύναμα στρωματικά κύτταρα διαφοροποιήθηκαν σε μια οστεογενή καταγωγή και επιτάχυναν τον σχηματισμό οστού σε 6 εβδομάδες. Εκτός από τα οστεοεπαγωγικά υλικά, η προσθήκη αυξητικών παραγόντων είναι επίσης ζωτικής σημασίας για τη διαφοροποίηση των βλαστικών κυττάρων στη μηχανική του οστικού ιστού. Αποδείχθηκε ότι η προσθήκη μορφογενετικής πρωτεΐνης οστού (BMP) -2 έχει σημαντικό ρόλο για τη μοίρα των βλαστικών κυττάρων. Χρησιμοποιώντας βιοεκτύπωση με inkjet με μοτίβο BMP-2 σε καλυμμένες με ινώδες επικαλύψεις πρωτογενών μυών που προέρχονται από βλαστικά κύτταρα βιοτυπώθηκαν. Ωστόσο, αποδείχθηκε ότι διαφοροποιήθηκαν προς την οστεογενή καταγωγή στο πρότυπο, ακόμη και αν υποβλήθηκαν σε θεραπεία με συνθήκες μυογενούς διαφοροποίησης.

Χονδρικός ιστός

Τις τελευταίες δύο δεκαετίες έχει σημειωθεί σημαντική πρόοδος όχι μόνο στον τομέα της μηχανικής των οστικών ιστών αλλά και στον χόνδρο. Κατά συνέπεια, υπάρχει μια πραγματική δυνατότητα ότι οι τεχνικές αναγέννησης και όχι αντικατάστασης κατεστραμμένων ή ασθενών οστών και αρθρώσεων θα φτάσουν μια μέρα στο νοσοκομείο. Ωστόσο, αρκετές βασικές προκλήσεις πρέπει ακόμη να αντιμετωπιστούν προτού αυτό γίνει πραγματικότητα. Αυτά περιλαμβάνουν κυρίως την αγγείωση όταν απαιτείται αποκατάσταση μεγάλου ελαττώματος οστού. Άλλα σημαντικά ζητήματα είναι η αναγκαιότητα χρήσης μηχανικών σύνθετων διαβαθμίσεων για αναγέννηση διεπιφάνειας οστού -μαλακών ιστών και ανακεφαλαιοποίηση της στρωματοποιημένης αρχιτεκτονικής ζώνης που υπάρχει σε πολλούς ιστούς ενηλίκων, όπως ο αρθρικός χόνδρος. Ωστόσο, οι υπάρχουσες προσεγγίσεις μηχανικής χόνδρου έχουν μεγάλες δυνατότητες για ακριβή κατασκευή κυττάρων και βιοϋλικών με εξελιγμένα σχέδια. Μπορούν να μιμηθούν φυσικούς ιστούς με ζώνη διαφοροποιημένα κύτταρα και δομή εξωκυτταρικής μήτρας (ECM).

Επιχειρήθηκε επίσης βιο-εκτύπωση με βάση τα λέιζερ διαφοροποιημένων χονδροκυττάρων με βλαστοκύτταρα. Αυτή η στρατηγική βασίζεται σε τεχνική βιοκατασκευής με τη βοήθεια υπολογιστή με τη βοήθεια του LIFT. Μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα (MSCs) που προέρχονται από χοίρο-μυελό των οστών με υψηλή βιωσιμότητα εκτυπώθηκαν επιτυχώς βιολογικά. Διατήρησαν τη λειτουργικότητα και την ικανότητα διαφοροποίησής τους σε οστεογονικές και χονδρογονικές γενεές. Η βιο-εκτύπωση που βασίζεται σε μελάνη έχει εφαρμοστεί επίσης στη μηχανική ιστών χόνδρου καθώς και στην αναγέννηση ελαττωμάτων χόνδρου. Ο επιτραπέζιος εκτυπωτής HP τροποποιήθηκε και τα ανθρώπινα χονδροκύτταρα που φορτώθηκαν σε υδρογέλη PEGDMA εκτυπώθηκαν βιολογικά. Έτσι, η κατασκευή του χόνδρου είχε μηχανικές ιδιότητες και βιοχημική σύνθεση κοντά στον φυσικό χόνδρο. Πιο πρόσφατα δημιουργήθηκε μια μέθοδος υβριδικής βιοεκτύπωσης για την κατασκευή μηχανικά βελτιωμένων κατασκευών ιστού χόνδρου με συνδυασμό τεχνικών τρισδιάστατης βιο -εκτύπωσης και ηλεκτροστροφής. Σε εκείνη τη μελέτη, αποδείχθηκε η ηλεκτροστροφοδότηση ινών πολυκαπρολακτόνης (PCL) μαζί με βιο -εκτύπωση inkjet ελαστικών χονδροκυττάρων κουνελιού σε υδρογέλη ινώδους -κολλαγόνου.

Παρά τη μεγάλη επιτυχία στη βιοεκτύπωση ιστού χόνδρου, η κατασκευή ζωνικών στρωματοποιημένων αρθρικών ιστών χόνδρου με διαφορετικές δομικές, βιομηχανικές και βιολογικές ιδιότητες εξακολουθεί να αποτελεί πρόκληση και απαιτείται περαιτέρω πρόοδος για την παραγωγή κατασκευών αρθρικού χόνδρου με ζωνική διαφοροποίηση, συμπεριλαμβανομένων πιο οριζόντιων και λεπτότερων ινών κολλαγόνου με υψηλή πυκνότητα κυττάρων στην επιφανειακή ζώνη και σχετικά κάθετες και παχύτερες ίνες κολλαγόνου με μικρότερη κυτταρική πυκνότητα στις βαθύτερες ζώνες.

Καρδιακός ιστός

Τα καρδιαγγειακά νοσήματα είναι η κύρια αιτία θανάτου στον κόσμο. Από αυτή την άποψη, η μηχανική ιστών της καρδιάς και της καρδιακής βαλβίδας είναι υψίστης σημασίας. Την τελευταία δεκαετία έχει σημειωθεί σημαντική πρόοδος στη μελέτη των φυσικών ιδιοτήτων της καρδιάς για καρδιακή αναγέννηση και επιδιόρθωση χρησιμοποιώντας μια ποικιλία στρατηγικών, συμπεριλαμβανομένων των εννοιών των βιοϋλικών, των μικρο-και των νανοτεχνολογιών και της αποκυκλοφορίας. Ωστόσο, η κύρια δυσκολία στη μηχανική του καρδιακού ιστού είναι η ενσωμάτωση των σύνθετων, ετερογενών μικρο- και μακρο-καρδιακών δομών ιστού για διαφορετικούς τύπους κυττάρων για πρόσφυση, πολλαπλασιασμό και τελικά επιδιόρθωση και αναδιαμόρφωση κατεστραμμένων τμημάτων. Η τρισδιάστατη βιοτυπία εμφανίστηκε ως μια στρατηγική για την αντιμετώπιση αυτής της πρόκλησης παρέχοντας την τεχνολογία για την κατασκευή ικριωμάτων υψηλής ανάλυσης με ετερογενή βιοχημικά και μηχανικά χαρακτηριστικά. Ωστόσο, έχουν γίνει περιορισμένες προσπάθειες στη βιο -εκτύπωση μοντέλων καρδιακών ιστών. Έχει αποδειχθεί ότι η επιτυχής βιοεκτύπωση με βάση την εξώθηση σφαιροειδών ιστών που περιλαμβάνει ανθρώπινα αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα (HUVECs) και καρδιακά κύτταρα που λαμβάνονται από σωλήνες μυοκαρδίου εμβρύων κοτόπουλου. Μια άλλη προσέγγιση βασίστηκε στη βιο-εκτύπωση ενός καρδιακού ιστού σε σχήμα μισής καρδιάς με συνδεδεμένες κοιλίες χρησιμοποιώντας βιοεκτύπωση που βασίζεται σε inkjet. Η μεταφορά προς τα εμπρός που προκαλείται από λέιζερ (LIFT) έχει επίσης χρησιμοποιηθεί για τη διαμόρφωση HUVECs και hMSCs σε ένα γεωμετρικά καθορισμένο μοτίβο σε ουρία πολυεστέρα ουρεθάνης και τα παραγόμενα δείγματα μεταμοσχεύθηκαν στην εμφραγμένη ζώνη καρδιών αρουραίου μετά από απολίνωση LAD. Οκτώ εβδομάδες μετά τη μεταμόσχευση, παρατηρήθηκε αυξημένος σχηματισμός αγγείων σε σύγκριση με τυχαία βιο-τυπωμένα κύτταρα ως ομάδες ελέγχου και το προκύπτον έμπλαστρο μυοκαρδίου παρείχε σημαντική λειτουργική βελτίωση.

Μια άλλη σημαντική κατεύθυνση είναι η μηχανική των καρδιακών βαλβίδων επειδή δεν διαθέτουν ικανότητα αναγέννησης και οι δυσλειτουργικές καρδιακές βαλβίδες, εάν η βλάβη ή η ασθένεια είναι επιζήμια, πρέπει να αντικατασταθούν από μηχανικά ή βιολογικά προσθετικά ισοδύναμα. Ωστόσο, η κατασκευή τέτοιων βαλβίδων αντικατάστασης περιορίζεται από θρομβογένεση και ασβεστοποίηση. Παρά τον σημαντικό ρόλο του στο καρδιαγγειακό σύστημα, μόνο μια περιορισμένη ποσότητα εργασίας έχει επιτευχθεί στη βιο -εκτύπωση των καρδιακών βαλβίδων. Η πρώτη βιο-εκτύπωση καρδιακής βαλβίδας επιτεύχθηκε με τη χρήση βιοεκτυπωτή διπλής κεφαλής τροποποιημένου από εκτυπωτή Fab@Home. Σε μια άλλη μελέτη, η βιο-εκτύπωση διπλού ακροφυσίου από σύνθετη υδρογέλη αλγινικής-ζελατίνης χρησιμοποιήθηκε για την κατασκευή λεπτών δίσκων υδρογέλης και τη χωρική βιοτυπία των λείων μυϊκών κυττάρων της αορτικής ρίζας (SMCs) και των ενδιάμεσων κυττάρων της αορτικής βαλβίδας (VICs). Σε μια πρόσφατη μελέτη, η ίδια ομάδα πραγματοποίησε βιο-εκτύπωση σύνθετων υδρογέλων χρησιμοποιώντας μεθακρυλιωμένο υαλουρονικό οξύ (Me-HA) και μεθακρυλιωμένη ζελατίνη (Me-Gel) φορτωμένη με ανθρώπινα αορτικά βαλβιδικά διάμεσα κύτταρα (HAVICs). Τα ληφθέντα δείγματα σχεδιάστηκαν σε σχήμα βαλβίδας τριών φυλλαδίων και τα κύτταρα που βιοτυπώθηκαν με αυξημένη συγκέντρωση Me-Gel παρουσίασαν καλύτερη διασπορά.

Ηπατικός ιστός

Το συκώτι είναι ο μεγαλύτερος αδένας στο ανθρώπινο σώμα. Παίζει βασικό ρόλο στο μεταβολισμό, την παραγωγή χολής, την αποτοξίνωση και τη ρύθμιση του νερού και των ηλεκτρολυτών. Οι τοξίνες ή τα φάρμακα που απορροφά το γαστρεντερικό σύστημα φτάνουν στο ήπαρ πρώτα πριν εισέλθουν στην κυκλοφορία του αίματος. Οι παθήσεις του ήπατος είναι κύρια αιτία θανάτου παγκοσμίως. Ως εκ τούτου, ένα in vitro μοντέλο ιστού ήπατος που προσομοιώνει τις κύριες λειτουργίες του ήπατος μπορεί να αποτελέσει σημαντική πλατφόρμα για τη διερεύνηση ασθενειών του ήπατος και την ανάπτυξη νέων φαρμάκων. Επί του παρόντος, οι πρόσφατα αναπτυσσόμενες τεχνολογίες τρισδιάστατης βιοεκτύπωσης έχουν την ικανότητα να συναρμολογούν μοντέλα in vitro ιστών ήπατος τόσο σε στατική σκαλωσιά όσο και σε δυναμικούς τρόπους τσιπ ήπατος.

Η πρώτη εκτύπωση βιολογικής εκτύπωσης πολυδύναμων βλαστοκυττάρων που προκλήθηκαν από τον άνθρωπο (hiPSCs) πραγματοποιήθηκε μέσω της διέγερσης των hiPSC και της διαφοροποίησής τους σε ηπατοκύτταρα για τη μηχανική μικροοργανισμών του ήπατος. Επιπλέον, για βιοεκτύπωση δομών ιστού του ήπατος, αθάνατα κύτταρα του καρκίνου του ήπατος HepG2 βιοτυπώθηκαν σε μεγαλύτερα μοντέλα ιστών.

Στην πραγματικότητα, η τρισδιάστατη βιο-εκτύπωση σκαλωσιών του ηπατικού ιστού και η κατασκευή συκωτιού σε τσιπ μπορεί να βοηθήσει σημαντικά στην ανάπτυξη μοντέλων in vitro ηπατικών ιστών. Χρησιμοποιώντας τεχνολογία τρισδιάστατης βιο-εκτύπωσης στην κατασκευή ήπατος-σε-τσιπ, η κατασκευή μοντέλων ιστού in vitro ήπατος θα γίνει πιο αποτελεσματική και οικονομικά αποδοτική. Έτσι, θα παρασχεθεί μια ισχυρή πλατφόρμα για τον έλεγχο των φαρμάκων και τον προσδιορισμό του μοριακού μηχανισμού που κρύβει τις ηπατικές παθήσεις.

Πνευμονικός ιστός

Η τρισδιάστατη βιο-εκτύπωση αυξάνει τη δυνατότητα αναπαραγωγικής δημιουργίας σύνθετων βιοδομών μακρο-και μικροκλίμακας χρησιμοποιώντας πολλούς διαφορετικούς τύπους κυττάρων. Αυτή είναι μια πολλά υποσχόμενη στρατηγική για την κατασκευή πολυστρωματικών κοίλων οργάνων, η οποία αποτελεί μεγάλη πρόκληση για τις πιο παραδοσιακές τεχνικές μηχανικής ιστών. Επί του παρόντος, η κύρια πρόοδος για το πνευμονικό σύστημα περιορίστηκε στην τραχεία. Οι διαθέσιμες τεχνικές για την κατασκευή τραχειακού μοσχεύματος αποτελούν πολύτιμα θεμέλια για τη βιοτυπία ολόκληρου του πνεύμονα. Γενικά, οι περισσότερες προσεγγίσεις τρισδιάστατης βιοεκτύπωσης για παραγωγή τραχείας συνδυάζουν βιολογικές υδρογέλες που έχουν σπαρθεί με κύτταρα που περιβάλλουν μια στιβαρή δομή πολυμερούς.

Γενικά, ο πνεύμονας ταξινομείται χειρουργικά ως στερεό όργανο. Ωστόσο, για τους σκοπούς της μηχανικής ιστών είναι πιο χρήσιμο να θεωρηθεί ολόκληρο το αναπνευστικό δέντρο ως διακλαδισμένο σύνολο σωλήνων. Έτσι, η πρόοδος και οι δυσκολίες που εντοπίζονται στη βιο -εκτύπωση άλλων σωληνοειδών οργάνων μπορούν να βοηθήσουν στη βιο -εκτύπωση του πνεύμονα. Οι προσπάθειες για βιοτυπία πνευμόνων είναι νέες και υπάρχουν μόνο λίγες προσπάθειες διερεύνησης της σύνθεσης ενός μοντέλου ιστού πνεύμονα. Επιτεύχθηκε πρόσφατα η βιοεκτύπωση ενός μοντέλου φραγμού αέρα -αίματος in vitro μέσω της ανάπτυξης μιας ζώνης στρωματοποιημένης κατασκευής ιστού σε λίγα στρώματα. Κατ ‘αρχάς, ένα λεπτό στρώμα βιοτυπώθηκε. Χρησιμεύει ως βασική μεμβράνη. Στη συνέχεια βιοτυπώθηκε ένα μόνο στρώμα ενδοθηλιακών κυττάρων διευκολύνοντας την προσκόλληση κυττάρων στο επόμενο στρώμα. Αργότερα, ένα νέο στρώμα προστέθηκε πάνω από το προηγουμένως συναρμολογημένο κατασκεύασμα, ακολουθούμενο από βιοεκτύπωση επιθηλιακών κυττάρων μιας στρώσης.

Εργαζόμενοι προς μια πιο σύνθετη γεωμετρία, ορισμένοι συγγραφείς ανέπτυξαν ένα περιφερικό μοντέλο πνεύμονα με αγγειακούς και αναπνευστικούς χώρους. Χρησιμοποίησαν διακρυλικό πολυ (αιθυλενογλυκόλη) και στερεολιθογραφικό εκτυπωτή και κατάφεραν να δημιουργήσουν ένα «μοντέλο αναπνοής» με παλιρροιακό αερισμό αέρα και ροή αίματος. Εφαρμόζοντας αυτό το μοντέλο, διερεύνησαν την πνευμονική μεταφορά μετρώντας την οξυγόνωση του αίματος που εισέρχεται και εξέρχεται από το κατασκεύασμα. Αν και το τυπωμένο αγγείο περιορίστηκε στα 300 μm, εξακολουθεί να αποτελεί ένα μεγάλο βήμα προς τη δημιουργία κλινικά σχετικών ιστών του πνεύμονα.

Νευρικός ιστός

Το ανθρώπινο νευρικό σύστημα είναι εξαιρετικά πολύπλοκο φυσιολογικό δίκτυο που είναι εγγενώς δύσκολο να αναλυθεί λόγω των δυσκολιών λήψης πρωτογενών δειγμάτων. Μία από τις ισχυρές εναλλακτικές λύσεις για τη μελέτη της ανάπτυξης του νευρικού συστήματος, των ασθενειών και των αναγεννητικών διαδικασιών, είναι τα ζωικά μοντέλα. Ωστόσο, δεν είναι σε θέση να αντιμετωπίσουν ορισμένα ειδικά για το είδος χαρακτηριστικά του ανθρώπινου νευρικού συστήματος. Όλο και πιο εξελιγμένα μοντέλα in vitro του ανθρώπινου νευρικού συστήματος έχουν αναπτυχθεί, αλλά εξακολουθούν να απαιτούν περαιτέρω πρόοδο για την καλύτερη προσομοίωση μικροπεριβαλλοντικών και κυτταρικών χαρακτηριστικών. Ο τομέας της μηχανικής νευρικών ιστών εφαρμόζει γρήγορα νέα εργαλεία που επιτρέπουν στους ερευνητές να παρακολουθούν με ακρίβεια τις συνθήκες καλλιέργειας in vitro και να μοντελοποιούν καλύτερα τον σχηματισμό, τη λειτουργία και την επιδιόρθωση του νευρικού συστήματος.

Ωστόσο, η εργασία που γίνεται στο πλαίσιο της βιο -εκτύπωσης για την κατασκευή νευρικών ιστών είναι αρκετά σπάνια. Μερικά από αυτά βασίστηκαν στη βιο -εκτύπωση κυττάρων C17.2 σε ένα στρώμα κολλαγόνου δίπλα σε ένα δίσκο ινώδους φορτωμένο με VEGF. Χρησιμοποιώντας αυτό το μοντέλο, έχει αναλυθεί η επίδραση του αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) στον πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση νευρικών βλαστικών κυττάρων ποντικών (C17.2). Η μελέτη κατέδειξε ότι τα νευρικά κύτταρα μετανάστευσαν προς την πηκτή ινώδους που απελευθερώνει VEGF και πολλαπλασιάστηκαν με επιτυχία. Πρόσφατα, άλλες έρευνες παρουσίασαν βιοεκτύπωση μιας θερμοαπόκρισης υδρογέλης πολυουρεθάνης με ρυθμιζόμενη ακαμψία και ικανότητα πήξης στους 37 ° C χωρίς την απαίτηση για σταυροδέσμο. Η αποτελεσματικότητα της βιοσύνδεσης επιτεύχθηκε φορτώνοντάς την με νευρικά βλαστοκύτταρα και εγχύοντάς την σε μοντέλο νευρικής βλάβης εμβρύου ψαριών. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι το ενέσιμο τζελ διέσωσε τη λειτουργία του διαταραγμένου νευρικού συστήματος σε 6 ημέρες.

Χρησιμοποιήθηκε επίσης μια προσέγγιση χωρίς σκαλωσιές, όπου ένα σφαιρίδιο κυττάρων Schwann (SCs) και βλαστοκυττάρων μυελού των οστών (BMSCs) εξωθήθηκαν μέσα σε μια τρισδιάστατα εκτυπωμένη αγαρόζη. Μετά τη συσσώρευση κυττάρων στην αγαρόζη σχηματίστηκε μόσχευμα νευρικού ιστού με τρία αυλάκια στο καθένα. Τα κατασκευασμένα μοσχεύματα εμφυτεύθηκαν στη συνέχεια σε ποντίκια και εκτιμήθηκε η ιστολογία και η λειτουργικότητά τους. Ο αριθμός των δειγμάτων ήταν περιορισμένος για να εξαχθεί ένα οριστικό συμπέρασμα σχετικά με την απόδοση των τρισδιάστατων βιο -τυπωμένων μοσχευμάτων σε σχέση με τα εμπορικά διαθέσιμα κολλαγόνου. Ωστόσο, η παρουσιαζόμενη περίπτωση κατέδειξε μια απόδειξη της ιδέας για βιοεκτύπωση μοσχευμάτων νεύρων.

Παγκρεατικός ιστός

Η μελέτη και η θεραπεία παγκρεατικών παθήσεων, όπως ο διαβήτης και ο καρκίνος του παγκρέατος, παρεμποδίζεται από την περιορισμένη πρόσβαση στον ιστό του παγκρέατος in vivo. Ωστόσο, τρισδιάστατα μοντέλα ιστών, που μιμούνται με ακρίβεια το φυσικό όργανο, έχουν μεγάλες δυνατότητες σε βιοϊατρικές εφαρμογές, παρέχοντας ταυτόχρονα αποτελεσματικές πλατφόρμες για τη διερεύνηση της ανάπτυξης ιστού και της ομοιόστασης και για την προσομοίωση ασθενειών σε φαρμακευτικές δοκιμές. Δυστυχώς, τα πρωτογενή β-κύτταρα του παγκρέατος δεν επιβιώνουν εύκολα in vitro και έχουν γίνει ελάχιστες προσπάθειες διαφοροποίησης των β-κυττάρων από ανθρώπινα βλαστικά κύτταρα. Από αυτή την άποψη, η αναγέννηση του ιστού του παγκρέατος παρατίθεται κυρίως στο βαθμό που τα β-κύτταρα από γραμμές ποντικού ή κύτταρα ινσουλίνης έχουν χρησιμοποιηθεί για την παραγωγή παγκρεατικών νησιδίων. Έχει γίνει περιορισμένη εργασία στο πλαίσιο της βιο -εκτύπωσης για την κατασκευή παγκρεατικού ιστού. Πρόσφατα, νησίδες ανθρώπου και ποντικού καθώς και ινσουλίνωμα ποντικού INS1E β-κύτταρα εγκλωβίστηκαν μέσα σε υδρογέλες αλγινικής ή αλγινικής-ζελατίνης και τις εκτύπωσαν βιολογικά σε σκαλωσιές διπλού στρώματος. Επιπλέον, πρόσφατες εργασίες κατέδειξαν τη μικροκατασκευή κλώνων ιστών χωρίς σκαλωσιές (με ισχυρή έκφραση ινσουλίνης) για βιο-εκτύπωση με βάση την εξώθηση, όπου κλώνοι ιστών κατασκευάστηκαν από ινοβλάστες αρουραίων και ινσουλίνωμα ποντικού TC-3 β-κύτταρα στον πυρήνα και το κέλυφος, αντίστοιχα. Προτάθηκε μια καινοτόμος προσέγγιση που περιλαμβάνει τη χρήση κλώνων ιστών για την κλιμάκωση της διαδικασίας βιοεκτύπωσης ιστού.

Αυτές οι πειραματικές προσπάθειες στον προηγμένο τεχνολογικό τομέα της βιο -εκτύπωσης θα ανοίξουν το δρόμο προς νέες τεχνολογικές ευκαιρίες για την ανάπτυξη λειτουργικών ιστών και οργάνων σε ένα εργαστήριο. Αναμενόταν ότι οι γνώσεις και τα μοντέλα που δημιουργήθηκαν από την έρευνα στον τομέα της βιοτυπίας όχι μόνο θα τονώσουν σημαντικές τεχνολογικές εξελίξεις στη μηχανική ιστών, αλλά θα ανοίξουν επίσης ριζικά νέες δυνατότητες στην ιατρική, όπως η μελέτη παγκρεατικών παθήσεων ex vivo σε κατασκευασμένο ιστό, ανάπτυξη νέων φαρμάκων και, ενδεχομένως, διευκόλυνση της αντικατάστασης τραυματισμένων ή ασθενών ιστών.

Δερματικός ιστός

Το δέρμα είναι το εξωτερικό προστατευτικό κάλυμμα του ανθρώπινου σώματος και βρίσκεται σε άμεση επαφή με το εξωτερικό περιβάλλον. Αυτό το καθιστά ιδιαίτερα ευάλωτο σε τραυματισμούς. Δερματικά ελαττώματα ή πληγές μπορεί να προκύψουν από τραύματα, δερματικές παθήσεις, εγκαύματα ή αφαίρεση του δέρματος κατά τη διάρκεια της χειρουργικής επέμβασης. Τέτοιες καταστάσεις απαιτούν επείγουσες θεραπευτικές παρεμβάσεις για την επιδιόρθωση της δομής και της λειτουργίας του δέρματος και την κανονική κινητικότητα του ασθενούς. Επιπλέον, η ύπαρξη πληγών μπορεί να οδηγήσει σε βακτηριακή μόλυνση και σχετικές επιπλοκές εάν δεν αντιμετωπιστεί άμεσα. Επιπλέον, ακόμη και μικρές παραμορφώσεις μπορούν να δημιουργήσουν ψυχολογική δυσφορία στα προσβεβλημένα άτομα, ειδικά στα παιδιά. Επί του παρόντος, η καλύτερη εναλλακτική λύση της μηχανικής του δέρματος είναι η χρήση αυτομοσχευμάτων. Ωστόσο, υπάρχουν περιορισμοί, συμπεριλαμβανομένης της ποσότητας και του μεγέθους των διαθέσιμων μοσχευμάτων, τη δημιουργία δευτερεύουσας πληγής και άλλους κινδύνους. Η χρήση άλλων τύπων μοσχευμάτων δέρματος όπως αλλομοσχεύματα και πιθανώς ξενομοσχεύματα συνδέεται με τους κινδύνους ανοσολογικών αντιδράσεων και μετάδοσης ασθενειών εκτός από ορισμένα ηθικά και πολιτιστικά ζητήματα. Υπάρχει επίσης η δυνατότητα χρήσης υλικών επίδεσης πληγών, όπως αυτά που βασίζονται σε πολυμερή ή οι συνδυασμοί τους με άλλες ουσίες. Ωστόσο, δεν ζουν και δύσκολα μπορούν να κυτταροποιηθούν και να αντικατασταθούν από φυσικό ιστό. Από αυτή την άποψη, η μηχανική ιστών δίνει μεγάλες υποσχέσεις για τη βελτίωση της θεραπείας των δερματικών ελαττωμάτων, αλλά θα πρέπει να βρεθούν λύσεις για τις προκλήσεις όπως η ανάπτυξη της πολυεπίπεδης αρχιτεκτονικής του φυσικού δέρματος και των αγγειακών δικτύων. Έχουν ήδη προταθεί ορισμένες λύσεις όπου εκτός από βιοϋλικά, ζωντανά κύτταρα, χρησιμοποιούνται βιολογικά ή χημικά σήματα με σκοπό τον σχηματισμό λειτουργικού δέρματος. Ωστόσο, αυτές οι συμβατικές μέθοδοι μηχανικής ιστών υποφέρουν από διάφορα προβλήματα όπως η μη ομοιογενής κατανομή των κυττάρων, η αδυναμία ενσωμάτωσης και αγγειοποίησης του κατασκευάσματος κατά την εμφύτευσή του, η επακόλουθη απόρριψη του εμφυτευμένου βιοϋλικού μαζί με το σχηματισμένο δέρμα. Αν και, ορισμένα προϊόντα δέρματος που έχουν κατασκευαστεί με ιστό, βρίσκονται στην αγορά, αντιμετωπίζονται πολλοί περιοριστικοί παράγοντες με έναν σημαντικό και κρίσιμο παράγοντα για την κλινική επιτυχία να είναι η αγγείωση μέσω του υποκατάστατου του δέρματος.

Μια ποικιλία προσεγγίσεων μηχανικής ιστού έχει χρησιμοποιηθεί στην κατασκευή ιστού δέρματος και έχουν δημιουργηθεί διαφορετικά υποκατάστατα ιστού, συμπεριλαμβανομένου αυτόλογου μοσχεύματος δέρματος με διάσπαση (golden standard), αλλομοσχεύματα, κυτταρικά δερματικά υποκατάστατα και εμπορικά προϊόντα που μοιάζουν με κυτταροποιημένα μοσχεύματα. Η βιο-εκτύπωση του ιστού του δέρματος έχει παρουσιαστεί με τη χρήση ενός βιο-εκτυπωτή οκτώ καναλιών που βασίζεται σε βαλβίδα, όπου μια κατασκευή ιστού 13 στρώσεων βιοτυπώθηκε χρησιμοποιώντας υδρογέλη κολλαγόνου. Τα κερατινοκύτταρα βιοτυπώθηκαν πάνω από εναλλασσόμενα στρώματα ινοβλαστών ανθρώπινης ακροποσθίας και στρώματα κολλαγόνου κυττάρων. Τα προκύπτοντα κατασκευάσματα εμφάνισαν πυκνά συσκευασμένα κύτταρα σε στρώματα επιδερμίδας σε αντίθεση με το χόριο με χαμηλή πυκνότητα κυττάρων και μικρότερη εναπόθεση ECM. Εκτός από τη βιο-εκτύπωση σταγονιδίων, η βιο-εκτύπωση με λέιζερ έχει εφαρμοστεί επίσης για βιοπαραγωγή υποκατάστατων ιστών δέρματος. Σε μια πρόσφατη μελέτη αναλύθηκε η επίδραση της βιο -εκτύπωσης ενδοθηλιακών κυττάρων μέσα στα υποκατάστατα του δέρματος στο σχηματισμό μακροαγγειακών αγγείων κατά τη διάρκεια της νέας αναδιαμόρφωσης των ιστών. Η προσέγγιση περιελάμβανε ενθυλάκωση δερματικών ινοβλαστών νεογνών και επιδερμικών κερατινοκυττάρων (NHEKs) σε κολλαγόνο. Στη συνέχεια τοποθετείται η στιβάδα του χώρου ακολουθούμενη από τη διαμόρφωση ανθρώπινων δερματικών μικροαγγειακών ενδοθηλιακών κυττάρων (HMVECs) στο στρώμα του δέρματος της κατασκευής. Η διαδικασία ολοκληρώθηκε τυλίγοντας το στρώμα ινώδους με φορτωμένα με κολλαγόνο NHEK. Στη συνέχεια, τα παραγόμενα υποκατάστατα δέρματος εμφυτεύτηκαν στη ράχη ποντικών και συγκρίθηκαν με εμπορικά διαθέσιμα υποκατάστατα δέρματος ως μάρτυρα. Τα αποτελέσματα που προέκυψαν έδειξαν ότι τα βιοεκτυπωμένα HMVECs σχημάτισαν μικροαγγεία και τα εμφυτευμένα κατασκευάσματα δημιούργησαν συστολή σε σύγκριση με τις ομάδες ελέγχου. Επιπλέον, σε άλλες μελέτες αποδείχθηκε επιτόπια βιοεκτύπωση στρωματοποιημένων υποκατάστατων δέρματος με εναλλασσόμενες στιβάδες ινωδογόνου-κολλαγόνου και θρομβίνης φορτωμένων με κύτταρα βλαστικών (AFS) που προέρχονται από αμνιακό υγρό. Με αυτήν την προσέγγιση, τα υποκατάστατα του δέρματος εκτυπώθηκαν σε τρισδιάστατο τρόπο απευθείας σε πληγές πλήρους πάχους σε χοίρους και επισκευάστηκαν το φυσικό δέρμα πιο στενά από τις ομάδες ελέγχου. Παρά τις προσπάθειες για βιολογική εκτύπωση του ιστού του δέρματος, η βιοκατασκευή υποκατάστατων δέρματος που προσομοιάζουν ουσιαστικά το φυσικό δέρμα εξακολουθεί να αποτελεί πρόκληση, επειδή η ενσωμάτωση ιδρωτοποιών αδένων και θυλάκων τρίχας έχει παραμείνει άπιαστη.

Αγγειακός ιστός

Η τρισδιάστατη (3D) τεχνολογία εκτύπωσης μετατράπηκε γρήγορα από μια φουτουριστική τεχνολογία σε μια πολλά υποσχόμενη επιστήμη, η οποία πιστεύεται ότι φέρνει επανάσταση στην κλινική πρακτική, καθιστώντας διαθέσιμο προσαρμοσμένο εξοπλισμό, μοντέλα οργάνων για χειρουργικές πρακτικές, ανταλλακτικά οργάνων και σύγχρονα φάρμακα. Αν και αρχικά αυτή η τεχνολογία προοριζόταν να παρέχει χειρουργικά μοντέλα και πρωτότυπα, οι επιστήμονες έχουν προχωρήσει γρήγορα την τεχνολογία για την παραγωγή κατασκευών ιστών για αναγεννητική ιατρική. Ωστόσο, η υλοποίηση μεγάλης κλίμακας εξακολουθεί να περιορίζεται λόγω της ανατομικής πολυπλοκότητας, της σύνθεσης (κυτταρικής και εξωκυτταρικής) ποικιλίας και της αγγειοποίησης των φυσικών ιστών.

Η σύνθεση αγγειακού ιστού έχει πραγματοποιηθεί με διαφορετικές προσεγγίσεις βιοαποτύπωσης, συμπεριλαμβανομένης της εξώθησης, σταγονιδίων και βιολογικής εκτύπωσης με λέιζερ. Στη βιοεκτύπωση με βάση την εξώθηση, έχει χρησιμοποιηθεί ένα ευρύ φάσμα τεχνικών εξώθησης. Ορισμένοι επιστήμονες χρησιμοποιούν εξώθηση ομοαξονικού ακροφυσίου, όπου υδρογέλες συμπεριλαμβανομένου του αλγινικού νατρίου και της χιτοζάνης βιοτυπώθηκαν απευθείας σε σωληνοειδή μορφή με εγκλεισμένα κύτταρα. Κατά την ομοαξονική ροή (πυρήνας-κελύφους), ο εκτοξευόμενος σταυρωτός σύνδεσμος (που ρέει μέσα από τον πυρήνα) έρχεται σε επαφή με το πρόδρομο διάλυμα υδρογέλης (που ρέει μέσα από το κέλυφος), και επιτάχυνε την πήξη και το σχηματισμό σωληνοειδών κατασκευών. Αυτή η προσέγγιση διευκολύνει την άμεση βιοαποτύπωση αγγειακών δομών με πρακτικό τρόπο. Υπάρχουν επίσης άλλες άμεσες στρατηγικές βιο-εκτύπωσης αγγειακού ιστού, όπως βιολογικής εκτύπωσης σταγονιδίων υδρογέλων με κύτταρα στρώμα-στρώμα χρησιμοποιώντας βιοεκτύπωση με βάση inkjet. Χρησιμοποιώντας κατασκευή από κάτω προς τα πάνω, η βιο-εκτύπωση με inkjet επέτρεψε την κατασκευή διακλαδισμένων σωλήνων σε οριζόντια και κάθετη κατεύθυνση. Μια σχετική προσέγγιση πραγματοποιήθηκε επίσης χρησιμοποιώντας βιο-εκτύπωση με βάση το λέιζερ. Σε όλες τις προαναφερθείσες μελέτες, χρησιμοποιούνται τεχνικές βασισμένες σε σκαλωσιές. Ωστόσο, ορισμένες έρευνες βασίζονται σε μια προσέγγιση χωρίς σκαλωσιές σε βιοεκτύπωση αγγειακών ιστών, όπου τα σφαιροειδή ιστών κατασκευάζονταν ένα ένα και αυτοσυναρμολογούνταν σε μεγαλύτερες μονάδες ιστού.

Παρόλο που η σφαίρα της τρισδιάστατης βιο -εκτύπωσης έχει φέρει τεράστια πρόοδο στην παραγωγή δομών αγγείων με καλή δομική και λειτουργική ακεραιότητα, μπορεί ακόμα να παρατηρηθεί ότι η κατασκευή κλινικά σχετικών αγγειακών και αγγειοποιημένων κατασκευών ιστών είναι ακόμη πολύ στο μέλλον. Καινοτόμες εφευρέσεις που ενισχύουν την ανάλυση και αποκτούν ανατομικά ακριβέστερα κατασκευάσματα, ενώ επιτρέπουν την κλιμάκωση των βιοεκτυπωμένων ιστών που απαιτούνται για την παροχή πιθανών λύσεων. Σταδιακά, μπορεί να αναμένεται ότι ανεξάρτητη έρευνα για υλικά και κυτταρικά βιοσύνδεση για αγγείωση μπορεί να παραχωρήσει θέση σε πιο ολοκληρωμένες και ολιστικές προσεγγίσεις για την ανάπτυξη βιοτύπων για αγγειοποιημένη σύνθεση ιστών.

Άλλοι τύποι ιστών

Επιπλέον, στους περιγραφόμενους τύπους ιστών, ορισμένοι επιστήμονες εργάζονται επίσης στη βιο -εκτύπωση ιστών αμφιβληστροειδούς και εγκεφάλου, αν και αυτές οι μελέτες βρίσκονται ακόμη στο αρχικό τους επίπεδο. Εφαρμόστηκε πιεζοηλεκτρική βιοεκτύπωση με inkjet χρησιμοποιώντας κύτταρα γαγγλιοειδούς αμφιβληστροειδούς (RGCs) και γλοία και διερευνήθηκε η επίδραση των παραμέτρων βιοεκτύπωσης στη βιωσιμότητα των κυττάρων και τις ιδιότητες προαγωγής της ανάπτυξης τους. Πρόσφατα, παρουσιάστηκε επίσης χειροκίνητη εναπόθεση πρωτογενούς φλοιώδους νευρώνα gellan-gum-RGD για εγκεφαλική κατασκευή ιστού. Παρόλο που δεν χρησιμοποιήθηκε σύστημα κίνησης ελέγχου υπολογιστή, η παρουσίαση της εργασίας κατέδειξε για πρώτη φορά τη χρήση της προσέγγισης στρώματος-στρώματος για τη μηχανική του εγκεφαλικού ιστού.

Μεταμόσχευση και κλινικές

Η αναγεννητική ιατρική είναι ίσως μια από τις πιο συναρπαστικές μελλοντικές εφαρμογές της τρισδιάστατης βιοτυπίας. Οι επιστήμονες ελπίζουν ότι η βιοτυπία μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την απευθείας εκτύπωση ιστών όπως το δέρμα και τη δημιουργία οργάνων, ιστών και δομών για μεταμόσχευση. Η τρισδιάστατη βιοτυπία πιστεύεται ότι εφαρμόζεται επιτυχώς για τη μεταμόσχευση και την παραγωγή τύπων ιστών πολλαπλών στρωμάτων όπως νεύρο, καρδιακό, αιμοφόρο αγγείο, οστό και δέρμα (Εικ. 2). Οι ερευνητές προβλέπουν ότι στο μέλλον ιστοί και τελικά ολόκληρα όργανα θα μπορούσαν να μεταμοσχευθούν σε ασθενείς που παράγονται από τα δικά τους κύτταρα. Με τη βοήθεια της τρισδιάστατης βιο -εκτύπωσης, η απόρριψη μοσχεύματος και οι μακρές λίστες δωρητών θα μπορούσαν να γίνουν ένα ζήτημα του παρελθόντος. Επιπλέον, πολυάριθμες κατασκευές ιστών βιοτυπώθηκαν και εμφυτεύθηκαν υποδόρια για να αξιολογηθεί in vivo η διαφοροποίηση των κυττάρων και η λειτουργικότητα των εμφυτευμάτων. Παρά τα πειράματα αυτά, κανένας από τους βιοτυπωμένους ιστούς δεν έχει χρησιμοποιηθεί κλινικά για τον άνθρωπο επειδή δεν έχει χορηγηθεί ακόμη έγκριση. Δεν προβλέπονται κανόνες για βιοεκτυπωτές ή βιο -εκτυπωμένα προϊόντα. Ωστόσο, με το αυξανόμενο ενδιαφέρον παγκοσμίως και τις αναδυόμενες επιχειρήσεις για την αγορά βιοτυπίας, η επιτυχία με την πρώτη τεχνολογία που θα περάσει από κανονισμούς θα είναι υποδειγματική για τις προηγούμενες τεχνολογίες και προϊόντα.

Παρόλο που η τεχνολογία βιοεκτύπωσης βρίσκεται ακόμη σε πρώιμο στάδιο στις κλινικές, πλαστικά, κεραμικά ή μεταλλικά εμφυτεύματα με τρισδιάστατη εκτύπωση για αντικατάσταση οστικού ιστού έχουν ήδη μεταμοσχευθεί επιτυχώς σε ανθρώπους. Εκτός από τα μόνιμα εμφυτεύματα, μια πρόσφατη εργασία που δημοσιεύθηκε στο New England Journal of Medicine παρουσίασε μια μοναδική περίπτωση μεταμόσχευσης ενός τρισδιάστατης εκτύπωσης βιοαπορροφήσιμου νάρθηκα αεραγωγού σε βρέφος. Δεν έχουν παρατηρηθεί απροσδόκητα προβλήματα με τον νάρθηκα και η πλήρης απορρόφηση της συσκευής αναμένεται να διαρκέσει περίπου 3 χρόνια. Αυτή ήταν μια υποδειγματική περίπτωση για κλινική χρήση σκαλωσιών με τρισδιάστατη εκτύπωση και αισιόδοξα θα οδηγήσει σε παρόμοια επιτυχία με βιοεκτυπωμένους ιστούς και όργανα. Παρά τα επιτεύγματα στον τομέα της βιολογικής εκτύπωσης, η βιοτυπία για μεταμόσχευση σε νοσοκομείο απαιτεί περαιτέρω βελτιώσεις και μεταφραστικές προσπάθειες. Όργανα και ιστοί που δεν χρειάζονται σημαντική αγγείωση (δηλαδή δέρμα και χόνδρος) αναμένεται να μεταφραστούν κλινικά πολύ σύντομα. Ωστόσο, οι ιστοί και τα όργανα που είναι μεταβολικά πολύ ενεργά (δηλαδή η καρδιά, το πάγκρεας και το ήπαρ) είναι εξαιρετικά προκλητικά.

Εικόνα 2. Στρατηγική τρισδιάστατης εκτύπωσης

Ένα από τα επιχειρήματα για το κλινικό δυναμικό μετάφρασης των βιοεκτυπωμένων ιστών και οργάνων προέρχεται από την ίδια την τεχνολογία βιοεκτύπωσης. Η βιοτυπία περιλαμβάνει ζωντανά κύτταρα σε βιοσύνδεση και η χρήση ειδικών για τον ασθενή κυττάρων είναι σχετικά νέα στη βιο-εκτύπωση. Τα βλαστικά κύτταρα, όπως τα εμβρυϊκά βλαστοκύτταρα και τα επαγόμενα-πολυδύναμα βλαστοκύτταρα, αποτέλεσαν προοπτικές απεριόριστες πηγές ειδικών για τον ασθενή κυττάρων για την παραγωγή ιστών και οργάνων. Τα συγκεκριμένα για τον ασθενή κύτταρα μπορούν να διαφοροποιηθούν και στη συνέχεια να τυπωθούν βιολογικά ή να εκτυπωθούν και στη συνέχεια να διαφοροποιηθούν προς πολλαπλές γενεές για την κατασκευή ιστών και οργάνων που θα προκαλέσουν ελάχιστο κίνδυνο ανοσογονικότητας.

Φαρμακευτικά και υψηλής απόδοσης προληπτικός έλεγχος

Ένας άλλος βασικός τομέας όπου αναμένεται να επιτύχει η τρισδιάστατη βιο -εκτύπωση είναι η ανάπτυξη φαρμάκων. Οι περισσότερες από τις δοκιμές φαρμάκων πραγματοποιούνται επί του παρόντος χρησιμοποιώντας καλλιέργειες 2D κυττάρων. Όπως και η έρευνα για τον καρκίνο, αυτές οι καλλιέργειες δεν προσομοιώνουν τη φυσική κυτταρική συμπεριφορά. Το ξένο μόσχευμα (μεταμόσχευση ανθρώπινων κυττάρων) σε ζώα χρησιμοποιείται τώρα για να βοηθήσει στην επίλυση αυτού του ζητήματος. Ωστόσο, αυτή η προσέγγιση είναι δύσκολη λόγω των βιοχημικών, μεταβολικών και γενετικών διαφορών μεταξύ των ειδών. Έχει προταθεί ότι αυτά τα ζητήματα είναι ο κύριος λόγος για το υψηλό ποσοστό αποτυχίας στην αξιολόγηση των νέων υποψήφιων φαρμάκων. Παρά τις συνεχείς προσπάθειες για τη βελτίωση της διαδικασίας ανάπτυξης φαρμάκων, μόνο μία στις 10.000 νέες χημικές ουσίες και ένας στους δέκα υποψήφιους για φάρμακα μπαίνει σε κλινικές δοκιμές, φτάνει στο τελικό στάδιο έγκρισης και εισέρχεται στην αγορά. Από την άλλη πλευρά, η χρήση τρισδιάστατης βιο -εκτύπωσης για φαρμακευτικές δοκιμές και όχι in vivo μελέτες δεν χρειάζονται κανονιστική έγκριση. Έτσι, η απόδοση της ανάπτυξης φαρμάκων πιθανόν να πολλαπλασιαστεί εκτενώς. Μεταξύ των διαφόρων μεθόδων για την κατασκευή τρισδιάστατων συστημάτων in vitro, η βιοτυπία έχει σοβαρά πλεονεκτήματα όπως η δυνατότητα ελέγχου του μεγέθους και της μικροαρχιτεκτονικής, η ικανότητα υψηλής απόδοσης, οι ευκαιρίες συν-καλλιέργειας και ο χαμηλός κίνδυνος διασταυρούμενης μόλυνσης. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο, οι βιο-εκτυπωμένοι ιστοί και όργανα θεωρούνται όλο και περισσότερο ως πιθανά μοντέλα που θα χρησιμοποιηθούν στην τοξικολογία φαρμάκων και τον έλεγχο υψηλής απόδοσης.

Το ήπαρ και ο ιστός όγκων έχουν στοχοποιηθεί για την κατασκευή μοντέλων ιστών για φαρμακευτικά προϊόντα. Από αυτή την άποψη, έχει διερευνηθεί η κατασκευή ενός μοντέλου βιο-εκτυπωμένου μικροοργανικού ήπατος για μεταβολισμό φαρμάκων (Εικ. 3). Το βιο-εκτυπωμένο τρισδιάστατο μικροοργανισμό του ήπατος έχει χρησιμοποιηθεί για προσομοίωση της φυσιολογικής απόκρισης του ήπατος σε χορήγηση φαρμάκων και τοξική χημική έκθεση. Ο μεταβολισμός του φαρμάκου αποδείχθηκε με τον μετασχηματισμό του μη-φθορίζοντος προφαρμάκου, 7-αιθοξυ-4-τριφθορομεθυλοκουμαρίνης (EFC), σε μεταβλητό φθορισμού εκροής 7-υδροξυ-4-τριφθορομεθυλο κουμαρίνη (HFC). Επιθηλιακά κύτταρα και ηπατοκύτταρα εγκλωβισμένα σε Matrigel ™ χρησιμοποιήθηκαν για να δείξουν την πορεία του φαρμάκου που διαχέεται από την κυκλοφορία του αίματος στον ιστό. Τα επιθηλιακά κύτταρα είναι τα κύτταρα που καλύπτουν τον αυλό μέσω του οποίου τα φάρμακα περνούν από την κυκλοφορία του αίματος στον στόχο, όπου τα ηπατοκύτταρα χρησιμοποιήθηκαν ως τύπος κυττάρου στόχου. Με βάση το παρουσιαζόμενο μοντέλο ιστού, αναπτύχθηκε ένα υπολογιστικό μοντέλο μακροκλίμακας χρησιμοποιώντας ένα αριθμητικό πλαίσιο κινητικής κινητικής μεταφοράς-διάχυσης-κυττάρων. Το τελευταίο έχει αποδειχθεί πολύ χρήσιμο για μελλοντική έρευνα στη φαρμακοκινητική και την τοξικότητα των τρισδιάστατων μικροοργανισμών.

Εικόνα 3. Βιοτυπημένα μοντέλα ιστών για δοκιμές φαρμάκων και διαλογή υψηλής απόδοσης. (a) Βιοεκτυπωμένος ιστός ήπατος. (b) βιοεκτυπωμένος νεφρικός ιστός (c) βιοεκτυπωμένος ιστός δέρματος (d) τρισδιάστατο βιο-εκτυπωμένο υλικό αποκατάστασης οστών (e) τυπωμένη υδρογέλη που περιέχει κύτταρα (f) πολυκυτταρικές τρισδιάστατες βιο-εκτυπωμένες κατασκευές καρδιακού ιστού.

Οι εξελισσόμενες τεχνολογίες μικρομηχανικής επιτρέπουν την προσαρμοστική παραγωγή τρισδιάστατων μικροσυστοιχιών με βάση τα κύτταρα, συμπεριλαμβανομένης της μαλακής λιθογραφίας, της σχεδίασης επιφανειών, του χειρισμού με μικρορευστό και της βιο-εκτύπωσης. Μεταξύ αυτών, η τεχνολογία βιο-εκτύπωσης έχει το πλεονέκτημα της δημιουργίας συστοιχίας καλλιέργειας και συστοιχίας με ένα κύτταρο με ακριβή έλεγχο της πυκνότητας των κυττάρων. Μια πρόσφατη μελέτη χρησιμοποίησε μια νέα μέθοδο βιο-εκτύπωσης βασισμένη σε inkjet για την κατασκευή μιας πλατφόρμας μικροσκοπικής εξέτασης φαρμάκων υψηλής απόδοσης. Οι συγγραφείς εκτύπωσαν βιολογικά το αλγινικό φορτωμένο Escherichia coli για να τοποθετήσουν ένα τσιπ στις καλυπτρίδες. Χρησιμοποιώντας την στρώμα-στρώμα προσέγγιση, σταγονίδια τριών αντιβιοτικών εκτυπώθηκαν στις κηλίδες των κυττάρων. Τα αποτελέσματα έδειξαν παρόμοια κυτταρική βιωσιμότητα, λειτουργικότητα και αντιβακτηριακές επιδράσεις των αντιβιοτικών σε βιογραφικά και μικροπιπετοποιημένα δείγματα inkjet. Έτσι, οι συστοιχίες υψηλής απόδοσης με βιογραφική εκτύπωση με inkjet είναι αποδεδειγμένα αποτελεσματική μέθοδος για την ελαχιστοποίηση της διάρκειας των τυπικών δοκιμών διαλογής φαρμάκων. Επιπλέον, παρουσιάστηκαν βιοαισθητήρες με βάση τα κύτταρα (CBBs), όπου η βιο-εκτύπωση με ακουστική βάση χρησιμοποιήθηκε για τη δημιουργία μικροσυστοιχίας σταγονιδίων κυττάρων λείου μυός σε κολλαγόνο. Η βιοεκτυπωμένη μικροσυστοιχία στη συνέχεια υποβλήθηκε σε διαφορετικές περιβαλλοντικές συνθήκες (π.χ. θερμοκρασία) και εκτιμήθηκε η επίδραση των εφαρμοζόμενων ερεθισμάτων καθώς και οι παράμετροι της διαδικασίας βιοεκτύπωσης στη βιωσιμότητα των κυττάρων. Εκτός από την τρισδιάστατη βιο-εκτύπωση μικροσυστοιχιών κυττάρων υψηλής απόδοσης, η ελεγχόμενη χορήγηση υποψηφίων φαρμάκων σε μικροσυστοιχίες κυττάρων είναι επίσης σημαντικός παράγοντας για αποτελεσματικό έλεγχο του φαρμάκου. Διαφορετικές μέθοδοι έχουν προταθεί για ελεγχόμενη χορήγηση φαρμάκων σε μικροσυστοιχίες κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των σχεδίων φαρμάκων, σφράγισης φαρμάκων, σπρέι αερολύματος και μικρορευστοποίησης του φαρμάκου.

Καρκινική έρευνα

Οι τεράστιες μελλοντικές δυνατότητες της τεχνολογίας της τρισδιάστατης βιοεκτύπωσης στον βιοϊατρικό τομέα έχουν ήδη τεκμηριωθεί καλά. Ένας από τους τομείς όπου οι επιστήμονες ελπίζουν ότι η τρισδιάστατη βιοτυπία θα αποδειχθεί ευεργετική είναι η έρευνα για τον καρκίνο. Το μικρο-περιβάλλον του όγκου, καθώς και οι βιολογικές δομές και ουσίες που περιβάλλουν τον όγκο είναι βασικά στοιχεία της συμπεριφοράς του καρκίνου και δεν είναι ακόμη πλήρως κατανοητά. Μέχρι τώρα έχουν χρησιμοποιηθεί ζωικά μοντέλα και καλλιέργειες 2D κυττάρων σε αυτές τις έρευνες. Ωστόσο, δεν αποδεικνύουν με ακρίβεια τη συμπεριφορά των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων in vivo, η οποία περιλαμβάνει μια περίπλοκη αλληλεπίδραση μεταξύ των κυττάρων του όγκου τόσο με το κυτταρικό περιβάλλον όσο και με άλλα κύτταρα. Τελευταίες έρευνες δείχνουν ότι τα τρισδιάστατα μοντέλα αντανακλούν με μεγαλύτερη ακρίβεια τη συμπεριφορά των κυττάρων του όγκου και η βιοτυπία είναι μια πολλά υποσχόμενη τεχνική που θα μπορούσε να είναι αποτελεσματική σε τέτοιες μελέτες. Ένα πλεονέκτημα που διαθέτει η τρισδιάστατη βιο -εκτύπωση είναι ότι τα κύτταρα μπορούν να σχεδιαστούν ρητά σε ένα τρισδιάστατο μοντέλο με τα εξωκυτταρικά και δομικά στοιχεία του. Οι εναλλακτικές προσεγγίσεις διαφέρουν στο ότι απαιτούν αυτοσυναρμολόγηση, η οποία είναι πολύ πιο χρονοβόρα ή σκαλωσιά, όπου η μήτρα στήριξης αναπτύσσεται ανεξάρτητα από την κυτταρική καλλιέργεια. Επιπλέον, η τρισδιάστατη βιο -εκτύπωση παρέχει την ευκαιρία να εκτυπωθούν συγκεκριμένες δομές ιστού και κυττάρων και επίσης να είναι συγκεκριμένες για τον ασθενή. Τα κύτταρα ενός ασθενούς μπορούν να υποβληθούν σε βιοψία, να αναπτυχθούν και να εκτυπωθούν βιολογικά, να κατασκευαστούν οι κατάλληλες δομές και να διερευνηθεί η ανταπόκριση του φαρμάκου ή η αποτελεσματική δόση.

Ωστόσο, η χρήση της προσέγγισης βιοεκτύπωσης στην έρευνα για τον καρκίνο είναι νέα και μόνο μερικές μελέτες έχουν πραγματοποιηθεί σε αυτόν τον αναδυόμενο τομέα εφαρμογής. Για πρώτη φορά η βιο-εκτύπωση ιστού όγκου αποδείχθηκε με ανθρώπινα κύτταρα καρκίνου των ωοθηκών (OVCAR-5) και ινοβλάστες MRC-5. Σε αυτή τη μελέτη χρησιμοποιήθηκε μια πλατφόρμα βιοεκτύπωσης που βασίζεται σε inkjet με διπλούς εκτοξευτές. Η προτεινόμενη προσέγγιση δεν έδειξε μόνο ένα εργαλείο για την έρευνα για τον καρκίνο, αλλά προσέφερε επίσης μια μεγάλη πλατφόρμα για διαλογή υψηλής απόδοσης. Οι ίδιοι ερευνητές πραγματοποίησαν βιοεκτύπωση κυττάρων HeLa για να σχηματίσουν μοντέλα όγκου τραχήλου της μήτρας. Παρόλο που αυτές οι δύο μελέτες παρουσίασαν βιοπαραγωγή όγκων σφαιροειδών χρησιμοποιώντας τεχνολογία βιοτύπωσης, η κατασκευή μεγαλύτερων μοντέλων ιστών για την εξέταση της μετανάστευσης και της μετάστασης των καρκινικών κυττάρων είναι επίσης ζωτικής σημασίας. Μια άλλη προσέγγιση επικεντρώθηκε στη χρήση ενός συστήματος εκτύπωσης 3D με βάση το λέιζερ για βιο-εκτύπωση κυττάρων HeLa και μη καρκινικών ινοβλαστών 10 T1/2 στο PEGDA μαζί με μικροαγγειακό δίκτυο με πλάτος καναλιού 25, 45 και 120 μm για προσομοίωση διαμέτρων αιμοφόρων αγγείων. Εκτός από τις προσεγγίσεις που βασίζονται σε σκαλωσιές, πραγματοποιήθηκε επίσης βιοεκτύπωση μοντέλου καρκίνου του μαστού χωρίς σκαλωσιά χρησιμοποιώντας την πλατφόρμα NovoGen Bioprinting. Σε αυτή την προσπάθεια τα καρκινικά κύτταρα περιστοιχίστηκαν από ένα φυσιολογικά σχετικό στρωματικό μέσο που περιείχε διαφοροποιημένα με MSC λιπώδη κύτταρα, ινοβλάστες μαστών και ενδοθηλιακά κύτταρα.

Συμπερασματικά σχόλια και μελλοντικές προοπτικές

Πρόσφατες έρευνες έχουν δείξει ότι η τρισδιάστατη βιοτυπία είναι μια αναδυόμενη προσέγγιση που έχει ευρεία εφαρμογή σε διάφορους τομείς, συμπεριλαμβανομένης της βασικής έρευνας στην μηχανική ιστών, της αναγεννητικής ιατρικής και της παθογένειας του καρκίνου, την βιοεκτύπωση ιστών για μεταμόσχευση και κλινικές και θα μπορούσε να εφαρμοστεί επιτυχώς στη φαρμακευτική για δοκιμές φαρμάκων και έλεγχος απόδοσης. Επί του παρόντος, υπάρχουν περίπου 15 διαφορετικοί τύποι ιστών που χρησιμοποιούνται σε διαφορετικές πειραματικές μελέτες. Ωστόσο, υπάρχουν ακόμα αρκετοί άλλοι ανθρώπινοι ιστοί που δεν έχουν αγγιχτεί ακόμη. Από αυτή την άποψη, πρέπει να γίνουν μελλοντικές προσπάθειες για βιο -εκτύπωση άλλων μοντέλων ιστών και οργάνων που είναι προκλητικά αλλά μπορούν να φέρουν επανάσταση στην ιατρική. Αυτό εξαρτάται επίσης από τις καινοτομίες στον τομέα της μηχανικής ιστών καθώς η έρευνα για τη βιοτυπία εξαρτάται ζωτικά από την κατανόησή μας για ανεξερεύνητους τύπους ιστών. Επιπλέον, μία από τις νέες κατευθύνσεις στη βιοτυπία θα πρέπει να επικεντρωθεί στη βιοκατασκευή νέων τύπων οργάνων, όπως βιονικά όργανα ή όργανα που δεν υπάρχουν στη φύση.

Η πλειονότητα της έρευνας τρισδιάστατης βιοεκτύπωσης έχει αναπτυχθεί γύρω από μοντέλα ομοκυτταρικών ιστών χρησιμοποιώντας έναν τύπο κυττάρου. Ωστόσο, οι φυσικοί ιστοί έχουν ετεροκυτταρική φύση με πολλαπλούς τύπους κυττάρων οργανωμένους σε εξαιρετικά πολύπλοκη ανατομία. Αν και τα απλά μοντέλα βιοεκτύπωσης ιστών είναι σχετικά αποδεκτά στη θεμελιώδη έρευνα, η κατασκευή λειτουργικού ιστού για κλινικές ή φαρμακευτικές μελέτες απαιτεί τη συμπερίληψη πολλών τύπων κυττάρων. Έτσι, ορισμένες από τις λειτουργίες των κυττάρων μπορούν να ενεργοποιηθούν ή να ενισχυθούν περαιτέρω από αλληλεπιδράσεις κυττάρου -κυττάρου. Επομένως, η βιοτυπία πολλαπλών τύπων κυττάρων χρειάζεται περαιτέρω διερεύνηση των βέλτιστων συνθηκών καλλιέργειας, συμπεριλαμβανομένου του κατάλληλου μέσου και αντιδραστηρίων για την υποστήριξη της ανάπτυξης και της συμπεριφοράς τους.

Οι σύγχρονες προσπάθειες μετάφρασης της βιοτυπίας σε μεταμόσχευση περιορίζονται κυρίως σε ποντίκια. Ωστόσο, τα μοντέλα ποντικών είναι μικρά με φυσιολογικές συνθήκες και διαφέρουν σημαντικά από αυτές των ανθρώπων. Για παράδειγμα, ένας μικρός παγκρεατικός ιστός με τρισδιάστατα βιογραφικά νησίδια μπορεί να εμφυτευθεί σε ένα διαβητικό μοντέλο ποντικού και να ρυθμίσει την έκκριση ινσουλίνης. Από την άλλη πλευρά, ο μέσος όγκος νησιδίων σε ένα πάγκρεας ποντικού είναι περίπου 100.000 φορές μικρότερος από εκείνους σε ένα ανθρώπινο πάγκρεας. Ως εκ τούτου, η βιο-εκτύπωση ιστών και οργάνων κλιμάκωσης είναι εξαιρετικά σημαντική για την κατασκευή τους σε κλινικά σχετικές διαστάσεις. Μεγαλύτερα ζώα, όπως ένα μοντέλο χοιρινού, μπορούν να αποτελέσουν ένα μεταβατικό βήμα προς δοκιμές σε ανθρώπους, επειδή αυτά τα ζώα αντιστοιχούν περισσότερο στην ανθρώπινη φυσιολογία από τα μικρά ζώα. Για την κλιμάκωση των βιοεκτυπωμένων οργάνων για κλινική χρήση, η κατασκευή ιεραρχικών αγγειακών δικτύων είναι ζωτικής σημασίας εκτός από τη μηχανική τους αντοχή, την ελαστικότητα και τη μακροπρόθεσμη δομική σταθερότητα. Επιπλέον, η ενσωμάτωση των νευρικών ιστών και ο σχηματισμός νεύρωσης είναι ένα κρίσιμο βήμα προς τη λειτουργική παραγωγή ιστών και οργάνων, διότι ιστοί όπως ο καρδιακός, ο μυς και το δέρμα απαιτούν νεύρωση, κάτι που σήμερα αποτελεί πρόκληση στη βιοεκτύπωση. Η πλειοψηφία της έρευνας της βιοεκτύπωσης περιλαμβάνει τη χρήση βιοσύνδεσμων με βάση υδρογέλη, καθώς αποτελούν ευνοϊκό περιβάλλον για την τρισδιάστατη ανάπτυξη των κυττάρων. Ωστόσο, οι υδρογέλες έχουν αδύναμες μηχανικές ιδιότητες όταν χρησιμοποιούνται σε χαμηλές συγκεντρώσεις για να υποστηρίξουν τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό. Επιπλέον, βιοδιασπώμενα υλικά όπως τα θερμοπλαστικά μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως υπόβαθρο για την κλιμάκωση ιστών και οργάνων. Τα διαθέσιμα βιοϋλικά, όπως τα συνθετικά πολυμερή, είναι ισχυρά, αλλά η αποικοδόμησή τους είναι δύσκολη, χρονοβόρα και δεν ταιριάζει στενά με τη διαδικασία ανάπλασης των ιστών. Επομένως, η ανάπτυξη νέων βιοϋλικών είναι ζωτικής σημασίας για την πρόοδο στη βιο -εκτύπωση ιστών και οργάνων για κλινική χρήση. Εκτός από τα βιοϋλικά, η επιλογή της σωστής κυτταρικής πηγής είναι επίσης ένας κρίσιμος παράγοντας ή επιτυχής κλινική και φαρμακευτική χρήση. Για την εξατομικευμένη ιατρική είναι δύσκολο να αποκτήσουμε διαφορετικούς τύπους πρωτογενών κυττάρων. Τα βλαστικά κύτταρα αντιπροσωπεύουν μια πολλά υποσχόμενη πηγή κυττάρων και απαιτούνται περαιτέρω έρευνες για τη δημιουργία τυποποιημένων πρωτοκόλλων για τη διαφοροποίηση των βλαστικών κυττάρων σε διάφορες σταθερές και λειτουργικές κυτταρικές γενεές.

Ένας άλλος σημαντικός τρόπος κατασκευής ιστών για διαλογή υψηλής απόδοσης είναι οι μικροσκοπικές πλατφόρμες τρισδιάστατης συστοιχίας, όπως μοντέλα ιστού σε τσιπ ή όργανο σε τσιπ. Ο συνδυασμός τεχνολογίας βιοεκτύπωσης με άλλες τεχνολογίες όπως οι μικρορευστοποιήσεις είναι απαραίτητος για την παραγωγή φυσιολογικά προσομοιωμένων, πολύπλοκων και μακροπρόθεσμων βιώσιμων συστοιχιών μικροοργανικών στόχων. Η εφαρμογή τεχνολογιών που δημιουργούν σταγονίδια πικολίθου με χαμηλό επίπεδο κυτταρικής βλάβης και έχουν δυνατότητες διαλογής μεμονωμένων κυττάρων θα πρέπει να ενθαρρύνεται στη βιοεκτύπωση κυτταρικών μικροσυστοιχιών. Θα πρέπει επίσης να εξεταστεί και να εφαρμοστεί η ελεγχόμενη χορήγηση φαρμάκων σε κυτταρικές μικροσυστοιχίες.

Παρόλο που γίνονται αρκετές προσπάθειες για τη μηχανική του μικρο-περιβάλλοντος του καρκίνου χρησιμοποιώντας τεχνολογία βιοεκτύπωσης, απαιτούνται περαιτέρω εξελίξεις για την κατασκευή ενός φυσιολογικά σχετικού πλήρους μικροπεριβάλλοντος, που περιλαμβάνει τη θέση του όγκου, την υγιή θέση και το μικροαγγειακό δίκτυο ενδιάμεσα, για την πραγματοποίηση έρευνας μετάστασης καρκίνου. Τα μοντέλα ιστού όγκου θα πρέπει να τοποθετηθούν με ακρίβεια σε βιοαποτυπωμένους αγγειοποιημένους παρεγχυματικούς ιστούς για να μελετηθεί η ανάπτυξή τους, η διείσδυση των κυττάρων του όγκου και η εξαγγείωση.

Test: LO2 Προχωρημένο επίπεδο

Βιβλιογραφικές αναφορές

  • AZoMaterials. 3D bioprinting and its applications (2018). https://www.azom.com/article.aspx?ArticleID=17370
  • Bhise NS et al. 2014. Organ-on-a-chip platforms for studying drug delivery systems. Journal of Controlled Release. doi:10.1016/j.jconrel.2014.05.004
  • Harris M. 2018. Print me an organ. https://physicsworld.com/a/print-me-an-organ/
  • Liang M, Yutong W, Li Y, et al. 2020. Current Advances on 3D-Bioprinted Liver Tissue Models. Adv. Healthcare Mat., doi: 10.1002/adhm.202001517
  • Murphy SV, Atala A. 2014. 3D bioprinting of tissues and organs. Nat. Biotechnol., 32: 773–785.Varotto A. 2015. Global Market for 3D Printing., BCC Research, ISBN: 1-62296 -006-8
  • Ozbolat IT, Peng W, Ozbolat V. 2016. Application areas of 3D bioprinting. Drug Discovery Today. doi:10.1016/j.drudis.2016.04.006
  • Park JY, Jang J, Kang HW. 2018. 3D Bioprinting and its application to organ-on-a-chip. Microelectron. Eng.. doi:10.1016/j.mee.2018.08.004
  • Wang C, et al. 2014. Three-dimensional in vitro cancer models: a short review. Biofabrication, doi: 10.1088/1758-5082/6/2/022001.
  • Yao R, et al. 2016. Three-dimensional printing: review of application in medicine and hepatic surgery. Cancer Biol Med
  • Grigoryan B, Paulsen S, Corbett D, et al. 2019. Functional intravascular topologies and multivascular networks within biocompatible hydrogels. Science, 464: 458-464.
  • Augustine R. 2018. Skin bioprinting: a novel approach for creating artificial skin from synthetic and natural building blocks. Prog Biomater., 7: 77–92.
  • Datta P, Ayanb B, Ozbolat IT. 2017. Bioprinting for vascular and vascularized tissue biofabrication. Acta Biomaterialia, 51: 1-20.
  • AZoMaterials. 3D bioprinting and its applications (2018). https://www.azom.com/article.aspx?ArticleID=17370
  • Bhise NS et al. 2014. Organ-on-a-chip platforms for studying drug delivery systems. Journal of Controlled Release. doi:10.1016/j.jconrel.2014.05.004
  • Harris M. 2018. Print me an organ. https://physicsworld.com/a/print-me-an-organ/
  • Liang M, Yutong W, Li Y, et al. 2020. Current Advances on 3D-Bioprinted Liver Tissue Models. Adv. Healthcare Mat., doi: 10.1002/adhm.202001517
  • Murphy SV, Atala A. 2014. 3D bioprinting of tissues and organs. Nat. Biotechnol., 32: 773–785.Varotto A. 2015. Global Market for 3D Printing., BCC Research, ISBN: 1-62296 -006-8
  • Ozbolat IT, Peng W, Ozbolat V. 2016. Application areas of 3D bioprinting. Drug Discovery Today. doi:10.1016/j.drudis.2016.04.006
  • Park JY, Jang J, Kang HW. 2018. 3D Bioprinting and its application to organ-on-a-chip. Microelectron. Eng.. doi:10.1016/j.mee.2018.08.004
  • Wang C, et al. 2014. Three-dimensional in vitro cancer models: a short review. Biofabrication, doi: 10.1088/1758-5082/6/2/022001.
  • Yao R, et al. 2016. Three-dimensional printing: review of application in medicine and hepatic surgery. Cancer Biol Med
  • Grigoryan B, Paulsen S, Corbett D, et al. 2019. Functional intravascular topologies and multivascular networks within biocompatible hydrogels. Science, 464: 458-464.
  • Augustine R. 2018. Skin bioprinting: a novel approach for creating artificial skin from synthetic and natural building blocks. Prog Biomater., 7: 77–92.
  • Datta P, Ayanb B, Ozbolat IT. 2017. Bioprinting for vascular and vascularized tissue biofabrication. Acta Biomaterialia, 51: 1-20.

„Βιοαισθητήρες & Βιοτσίπ για βιώσιμο μέλλον “

Προχωρημένο επίπεδο

Ο τομέας της συνθετικής βιολογίας έχει γιγαντωθεί την τελευταία δεκαετία, έχοντας μεγάλη επιρροή σε τομείς όπως η μεταβολική μηχανική, η μηχανική πρωτεϊνών, η ψηφιακή βιολογία και η μηχανική ολόκληρου του γονιδιώματος.

Περιεχόμενα

 

Τεχνολογίες Βιοαισθητήρων & Βιοτσίπ: Συμμετοχή στο μελλοντικό βιώσιμο μέλλον

Ο τομέας της συνθετικής βιολογίας έχει γιγαντωθεί την τελευταία δεκαετία, έχοντας μεγάλη επιρροή σε τομείς όπως η μεταβολική μηχανική, η μηχανική πρωτεϊνών, η ψηφιακή βιολογία και η μηχανική ολόκληρου του γονιδιώματος. Στο πλαίσιο επαναληπτικών κύκλων ανάπτυξης “σχεδιασμός-κατασκευή-δοκιμή”, έχει πραγματοποιηθεί ένα σημαντικό μέρος της καινοτομίας συνθετικής βιολογίας. Στον τομέα της συνθετικής βιολογίας, η πρόοδος μπορεί να συσχετιστεί με καινοτομίες σε κάθε μία από τις διαδικασίες «σχεδιασμού», «κατασκευής» και «δοκιμής». Για παράδειγμα, έχει γίνει μια σημαντική ώθηση για την τυποποίηση στοιχείων της συνθετικής βιολογίας, με σημαντική προσοχή που δίνεται στην αρθρωτότητα και τα στοιχεία “plug and play”. Αυτή η διαμόρφωση, μαζί με την επιταχυνόμενη πρόοδο στη βιολογία των συστημάτων, επέτρεψε στο στάδιο του «σχεδιασμού» να γίνει λιγότερο χρονοβόρο και λιγότερο εξαρτημένο από την προηγμένη γνώση. Τα τελευταία χρόνια, το κόστος της αλληλουχίας και της σύνθεσης του DNA έχει επίσης μειωθεί δραματικά, επιτρέποντας τη σύνθεση φθηνών μεγάλων κατασκευών. Στη φάση της «κατασκευής», αυτό διευκόλυνε μια ταχεία βελτίωση, βοηθώντας τους ερευνητές να διερευνήσουν ένα μεγαλύτερο ποσοστό του χώρου του βιολογικού διαλύματος. Τέλος, στο στάδιο της «δοκιμαστικής» συνθετικής βιολογίας, ο προσυμπτωματικός έλεγχος υψηλής απόδοσης έχει γίνει επίσης ένα σημείο εστίασης. Το αυξημένο δυναμικό “σχεδίασης” και “κατασκευής” συνέβαλε στην αυξημένη ζήτηση επιτυχίας στην εκτίμηση της πληθώρας νέων σχεδίων. Με τη σειρά του, αυτό έγινε με την ενσωμάτωση ρομπότ και ανάλυσης υψηλής απόδοσης στο εργαστηριακό περιβάλλον, στο οποίο νέα μοντέλα μπορούν να αξιολογηθούν σε επίπεδο που δεν είναι εφικτό για τους ερευνητές.

Οι βιοαισθητήρες αντιπροσωπεύουν μια πρωτοποριακή αναδυόμενη τεχνολογία για τον έλεγχο υψηλής απόδοσης που μπορεί να εφαρμοστεί. Πιο συγκεκριμένα, ταξινομείται ως αναλυτικό εργαλείο αποτελούμενο από βιολογικά συστατικά που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση και τη δημιουργία σήματος για την παρουσία ενός υποκαταστάτη -στόχου. Η συνθετική βιολογία βρίσκεται στην πρώτη γραμμή των βιοαισθητήρων, τόσο ως εργαλείο για διαλογή υψηλής απόδοσης, όσο και ως άμεσο αποτέλεσμα εξελίξεων στον ίδιο τον τομέα της συνθετικής βιολογίας. Επιπλέον, λόγω της απαράμιλλης ιδιαιτερότητας και ευαισθησίας που παρέχουν τα βιολογικά μέρη σε σχέση με τις συμβατικές αναλυτικές μεθόδους, οι βιοαισθητήρες έχουν αποκτήσει εκτεταμένο ενδιαφέρον ως εναλλακτικές λύσεις για την παραδοσιακή ανάλυση.

Ο σχεδιασμός και η κατασκευή βιοαισθητήρων είναι μια πολυεπιστημονική προσπάθεια και μπορεί να περιλαμβάνει εξειδίκευση σε τομείς όπως η πρωτεϊνική μηχανική, η μοριακή βιολογία, η χημεία συγγένειας, η μοριακή δυναμική του νουκλεϊκού οξέος, οι επιστήμες των υλικών και η νανοτεχνολογία. Οι βιοαισθητήρες διασυνδέονται με έναν υποκαταστάτη -στόχο στο πιο απλό τους στάδιο, υφίστανται κάποιο είδος τροποποίησης και παράγουν σήμα. Υπάρχει μεγάλη ποικιλία πιθανών διαμορφώσεων σε όλα τα μέρη αυτής της διαδικασίας. Οι προσδέτες -στόχοι κυμαίνονται από μεμονωμένα άτομα όπως το ασβέστιο, έως ολόκληρες πρωτεΐνες όπως η θρομβίνη, σε όλη τη διαδρομή. Διαδικασίες τόσο διαφορετικές όσο η ενζυματική δραστηριότητα, ο φθορισμός, η παραγωγή ηλεκτρικού ρεύματος και η μεταγραφική δραστηριότητα περιλαμβάνουν σήματα εξόδου. Οι μηχανισμοί που μετατρέπουν την αναγνώριση συνδέτη σε λειτουργικά σήματα είναι εξίσου διαφορετικοί.

Στον τομέα της ανάλυσης, οι βιοαισθητήρες αντιπροσωπεύουν ένα σημαντικό βήμα προς τα εμπρός. Προκειμένου να απομακρυνθούν τα αναλυτικά στοιχεία από αμιγώς πλαίσια που βασίζονται στη φυσική ή τη χημεία, έχει ξεκινήσει η ενσωμάτωση βιολογικών συστατικών στην αισθητηριακή διάγνωση. Αυτό επέτρεψε αναλυτικές λειτουργίες που δεν είναι καλά προσαρμοσμένες στις συμβατικές μεθόδους για τη διεξαγωγή μιας τεράστιας ποικιλίας και ειδικότητας των βιολογικών συστατικών. Οι θεωρητικές και αποδεδειγμένες εφαρμογές βιοαισθητήρων καλύπτουν ένα σημαντικό εύρος της ανθρώπινης κοινωνίας και δραστηριότητας. Οι εφαρμογές βιοαισθητήρων ομαδοποιούνται σε τρεις μεγάλες κατηγορίες, ανάλογα με την κλίμακα μέτρησής τους.

  • Ομαδικά Διαγνωστικά: Περιβαλλοντικές, Γεωργικές και Βιομηχανικές Εφαρμογές
  • Διαγνωστικά σημεία χρήσης: Ιατρικές εφαρμογές και εφαρμογές ασφαλείας
  • Διαγνωστικά με ένα κύτταρο: Εφαρμογές μεταβολικής μηχανικής και συνθετικής βιολογίας

Βιοαισθητήρες & βιοτσίπ: πρόοδοι στην ιατρική διάγνωση

Οι βιοαισθητήρες αποτελούνται από έναν βιοκαταλύτη που μπορεί να αναγνωρίσει ένα βιολογικό στοιχείο και έναν μετατροπέα που μπορεί να μετατρέψει την εμφάνιση του καταλύτη και του συνδυασμού βιολογικών στοιχείων σε μετρήσιμη παράμετρο.

Ο βιοκαταλύτης μπορεί να είναι βιομόρια όπως ένζυμα, DNA, RNA, μεταβολίτες, κύτταρα, ολιγονουκλεοτίδια κ.λπ., και ηλεκτροχημικοί, θερμιδομετρικοί, οπτικοί, ακουστικοί, πιεζοηλεκτρικοί, κ.λπ. μετατροπείς. Οι βιοαισθητήρες που χρησιμοποιούν ακινητοποιημένα κύτταρα, ένζυμα και νουκλεϊκά οξέα έχουν μπει στο πεδίο τα τελευταία χρόνια στη διάγνωση ασθενειών. Για τους μηχανικούς διαγνωστικούς βιοαισθητήρες ασθενειών, έχουν επίσης εφαρμοστεί νανοβιοαισθητήρες που χρησιμοποιούν το εξαιρετικά μικρό μέγεθος και τις μοναδικές ιδιότητες τους. Η χρήση βιοαισθητήρων μπορεί να καθορίσει γρήγορα την κατάσταση της υγείας, την εμφάνιση και την εξέλιξη της νόσου και, με τη βοήθεια ενός πολυεπιστημονικού συνδυασμού χημείας, ιατρικής επιστήμης και νανοτεχνολογίας, μπορεί να βοηθήσει στην προετοιμασία της θεραπείας για πολλές ασθένειες. Οι συσκευές είναι οικονομικά αποδοτικές, υψηλής απόκρισης, γρήγορες, φιλικές προς το χρήστη και μπορούν να κατασκευαστούν για ανθρώπινη χρήση μαζικά. Πολυάριθμοι βιοαισθητήρες για τη διάγνωση τριών μεγάλων ασθενειών, όπως ο διαβήτης, οι καρδιαγγειακές παθήσεις και ο καρκίνος, είναι οι πιο ανεπτυγμένοι.

Τέτοιοι βιοαισθητήρες, που επινοήθηκαν από τον Cammann, είναι αναλυτικά όργανα που μετατρέπουν ένα ηλεκτρικό σήμα σε βιολογική απόκριση. Οι βιοαισθητήρες μπορούν συνήθως να είναι εξαιρετικά ακριβείς και θα πρέπει να είναι ανακυκλώσιμοι και ανεξάρτητα από φυσικούς περιορισμούς όπως το pH, η θερμοκρασία. Η πρακτική προσέγγιση στο σχεδιασμό ενός βιοαισθητήρα απαιτεί κατασκευή, ακινητοποίηση, συσκευές μεταγωγής που προσφέρουν διεπιστημονική μηχανική έρευνας τόσο στη χημεία όσο και στη βιολογία.

Με βάση τον μηχανισμό λειτουργίας τους, οι διαγνωστικοί βιοαισθητήρες χωρίζονται σε τέσσερις μεγάλες ομάδες:

  1. Βιοκαταλυτικοί βιοαισθητήρες με βάση ένζυμα.
  2. Ομάδα βιοσυγγένειας, δηλ. Αντίσωμα, αντιγόνο και παρουσία νουκλεϊκού οξέος.
  3. Μικρόβια, δηλαδή βιοαισθητήρες που περιέχουν μικροοργανισμό.
  4. Νανοαισθητήρες, δηλαδή ενεργοί αισθητήρες νανοσωματιδίων που συνήθως αυξάνουν την ευαισθησία και την εξειδίκευση για την έγκαιρη ανίχνευση ασθενειών.

Αυτοί οι διάφοροι τύποι βιοαισθητήρων βοηθούν τα επίπεδα ορμονών, τα φάρμακα, τις τοξίνες, τους μολυσματικούς παράγοντες, τα βαρέα μέταλλα, τα φυτοφάρμακα κ.λπ. να αναγνωριστούν με σημαντική εξειδίκευση.

Οι βιοαισθητήρες είναι εργαλεία που εκτιμούν συνήθως τα επίπεδα βιολογικών δεικτών ή οποιαδήποτε χημική αντίδραση δημιουργώντας σήματα που σχετίζονται κυρίως με τη συγκέντρωση ενός αναλύτη στη χημική αντίδραση. Συνήθως, αυτοί οι βιοαισθητήρες βοηθούν στην παρακολούθηση ασθενειών, ανακάλυψης φαρμάκων, ανίχνευσης ρύπων, ανίχνευσης ασθενειών που προκαλούν βακτήρια και δείκτες που συνήθως υποδεικνύουν ασθένειες, όπως σωματικά υγρά (σάλιο, αίμα, ούρα, ιδρώτας κ.λπ.). Ένας τυπικός βιοαισθητήρας φαίνεται στην Εικόνα 1.

Εικόνα 1. Σχηματική απεικόνιση βιοαισθητήρα

Ένας τυπικός βιοαισθητήρας αποτελείται από:

  1. Αναλυτής: Μια ουσία που ενδιαφέρει, όπως η γλυκόζη για τον διαβήτη, που πρέπει να εδραιωθεί.
  2. Βιοϋποδοχέας: Ένας βιοϋποδοχέας για τα ένζυμα μπορεί να είναι ένα μόριο που αναγνωρίζει τον αναλύτη.
  3. Μετατροπέας: Κανονικά, ένα συμβάν βιοανάγνωσης μετατρέπεται σε ανιχνεύσιμο σήμα, γνωστό ως σηματοδότηση.
  4. Ηλεκτρονικά: Σε μορφή οθόνης, τυπικά επεξεργάζεται το μεταδιδόμενο σήμα.
  5. Οθόνη: Συνήθως, η οθόνη υγρών κρυστάλλων έχει φιλικό προς το χρήστη τρόπο σε συνδυασμό με υλικό και λογισμικό για παραγωγή βιοαισθητήρων.

Υπάρχουν αρκετές εφαρμογές βιοαισθητήρων που έχουν εισαχθεί σε διαφορετικούς τομείς, όπως η ιατρική επιστήμη, ο θαλάσσιος τομέας, η βιομηχανία τροφίμων κ.λπ., και αυτοί οι βιοαισθητήρες συχνά προγραμματίζονται για βελτιωμένη ευαισθησία και γραμμικότητα σε σύγκριση με τις συμβατικές μεθόδους. Ωστόσο, η εφαρμογή βιοαισθητήρων αυξάνεται όλο και περισσότερο στον τομέα της ιατρικής επιστήμης.

Βιοαισθητήρες γλυκόζης στη διαχείριση του διαβήτη

Η παρακολούθηση της γλυκόζης στο αίμα έχει γίνει ένα πολύτιμο εργαλείο στη διαχείριση του διαβήτη και τα καθημερινά επίπεδα γλυκόζης στο αίμα συνήθως διατηρούνται με τη συμβουλή κλινικών ιατρών που έχουν αναπτύξει μια σειρά αισθητήρων γλυκόζης αίματος. Ο σακχαρώδης διαβήτης είναι η μεγαλύτερη επικρατούσα ενδοκρινική διαταραχή μεταβολισμού υδατανθράκων με μεγαλύτερη νοσηρότητα και θνησιμότητα στις αναπτυσσόμενες χώρες. Πολλαπλές εξετάσεις είναι συνηθισμένες σε διαβητικούς ασθενείς για τη διερεύνηση και την παρακολούθηση διαβητικών δεικτών. Τα βασικά κριτήρια διάγνωσης για τον διαβήτη είναι το επίπεδο γλυκόζης στο αίμα, το οποίο περιλαμβάνει την αυτό-παρακολούθηση των επιπέδων γλυκόζης από διαβητικούς ασθενείς. Μελέτες έχουν δείξει ότι οι μικροαγγειακές (νεφροπάθεια, νευροπάθεια και αμφιβληστροειδοπάθεια) και οι μακροαγγειακές επιπλοκές (στεφανιαία νόσος και εγκεφαλικό επεισόδιο) μπορούν να βελτιωθούν ελέγχοντας το επίπεδο της γλυκόζης στο αίμα σε φυσιολογικά επίπεδα. Η γλυκόζη στο αίμα παρατηρείται τυπικά σε υγιή άτομα της τάξης των 4,9-6,9 mM και μπορεί να αυξηθεί σε διαβητικούς ασθενείς έως και 40 mM μετά την πρόσληψη γλυκόζης. Αν και διατίθενται στο εμπόριο διάφορα είδη αισθητήρων γλυκόζης, η τρίτη γενιά βιοαισθητήρων γλυκόζης φαίνεται στην Εικόνα 2 ως παράδειγμα.

Εικόνα 2. Βιοσένσορας γλυκόζης τρίτης γενιάς

Ανίχνευση καρδιαγγειακών παθήσεων με χρήση βιοαισθητήρων

Ο αριθμός των θανάτων που προκαλούνται παγκοσμίως από καρδιαγγειακές παθήσεις (CVD) είναι σημαντικός και περισσότεροι άνθρωποι πεθαίνουν από CVD παρά από οποιαδήποτε άλλη ασθένεια. Μέχρι το 2015, περίπου 17,7 εκατομμύρια άνθρωποι είχαν πεθάνει από καρδιαγγειακή νόσο, αντιπροσωπεύοντας συνολικά το 31 % όλων των παγκόσμιων θανάτων. 7,4 εκατομμύρια από αυτά οφείλονταν σε στεφανιαία νόσο και 6,7 εκατομμύρια σε εγκεφαλικό επεισόδιο. Ως φάρμακο και θεραπεία, ένα άτομο με CVD χρειάζεται έγκαιρη ανίχνευση και διαχείριση. Η τρέχουσα στρατηγική ανίχνευσης CVD βασίζεται στην παραδοσιακή μέθοδο, η οποία συνήθως βασίζεται σε δοκιμές που μπορεί να διαρκέσουν πολλές ώρες ή και ημέρες. Ο ΠΟΥ θέτει αυτά τα διαγνωστικά κριτήρια, σύμφωνα με τα οποία οι ασθενείς πρέπει να ακολουθούν τουλάχιστον μία από τις συνθήκες, όπως αλλαγές στο διαγνωστικό ηλεκτροκαρδιογράφημα (ΗΚΓ), αύξηση βιοχημικών δεικτών στα δείγματα αίματος και χαρακτηριστικό πόνο στο στήθος. Το ΗΚΓ είναι μια σημαντική παράμετρος για τη διαχείριση της θεραπείας, αλλά το ΗΚΓ είναι ένα κακό διαγνωστικό τεστ στην περίπτωση των CVD, επειδή οι μισοί ασθενείς με CVD έχουν φυσιολογικό καρδιογράφημα, καθιστώντας πιο δύσκολη τη διάγνωση αυτής της ιατρικής κατάστασης. Ο βιοαισθητήρας θα βοηθήσει στην ταχεία διάγνωση, παρέχοντας άριστη υγειονομική περίθαλψη και μειώνοντας τον χρόνο καθυστέρησης για τη διανομή των αποτελεσμάτων, κάτι που αποτελεί τεράστιο άγχος για τους ασθενείς.

Βιοαισθητήρας για την ανίχνευση καρκίνου

Ο καρκίνος είναι μια από τις πιο θανατηφόρες ασθένειες και αρκετοί ερευνητές έχουν αναπτύξει πρόσφατα βιοαισθητήρες για την έγκαιρη ανίχνευση του καρκίνου. Οι περισσότεροι καρκίνοι τυπικά διαγιγνώσκονται με μαγνητική τομογραφία, υπερηχογράφημα ή μεθόδους βιοψίας που βασίζονται στις φυσικές ιδιότητες και την παρουσία του όγκου και προσδιορίζουν είτε προηγμένα είτε επεμβατικά όργανα. Οι παραλλαγές των γονιδιακών αλληλουχιών, δηλαδή οι μεταλλάξεις, προκαλούν κυρίως καρκίνο και έτσι απαιτούν έγκαιρη διάγνωση πριν προχωρήσει η ασθένεια. Η έγκαιρη ανίχνευση καρκίνου καθιστά τη θεραπεία ταχύτερη και πιο επιτυχημένη, ανοίγοντας μια πλατφόρμα βιοαισθητήρων για την ανίχνευση πρώιμων σταδίων καρκίνου. Πολλοί ειδικοί υποθέτουν ότι στην περίπτωση του καρκίνου, η έγκαιρη ανίχνευση θα μπορούσε να είναι δυνατή επειδή οι ανωμαλίες στη χημική και γενετική σύνθεση μπορεί να εντοπιστούν πολύ πριν ξεκινήσει η ασθένεια. Η ανεξέλεγκτη και ακανόνιστη κυτταρική ανάπτυξη, που συνήθως πιστεύεται ότι είναι καρκίνος, συμβαίνει λόγω της συσσώρευσης μοναδικών γενετικών μεταλλάξεων και επιγενετικών ελαττωμάτων. Τα καρκινικά κύτταρα αποδεικνύεται ότι είναι ανθεκτικά στην απόπτωση και στον αντι-αναπτυξιακό αμυντικό μηχανισμό του σώματος. Εάν προχωρήσει και αρχίσει να επεκτείνεται σε άλλα όργανα και συστήματα του σώματος, δηλαδή στο στάδιο της μετάστασης, ο καρκίνος γίνεται ανίατος. Η διέγερση ογκογονιδίου και η μείωση της λειτουργίας των γονιδίων καταστολής όγκων (TSG) είναι οι δύο πιο σημαντικοί μηχανισμοί ογκογένεσης. Λόγω μετάλλαξης ή αντιγραφής του φυσιολογικού γονιδίου (πρωτο-ογκογονίδιο), λαμβάνει χώρα  η ενεργοποίηση του ογκογονιδίου, το οποίο παίζει βασικούς ρόλους, συμπεριλαμβανομένου του ελέγχου της κυτταρικής ανάπτυξης, του πολλαπλασιασμού και/ή της διαφοροποίησης. Μια τέτοια γενετική μετάλλαξη καθοδηγεί το γονίδιο να παράγει υπερβολική ποσότητα του γονιδιακού προϊόντος του, με αποτέλεσμα την απορύθμιση της κυτταρικής διαίρεσης, την ανάπτυξη των κυττάρων και την εγκατάσταση του όγκου. Πολλά ογκογονίδια έχουν θεωρηθεί ως πολλά υποσχόμενοι βιοδείκτες καρκίνου για υποδοχείς αυξητικών παραγόντων. Στο ~ 33 % όλων των καρκίνων του μαστού, ο υποδοχέας ανθρώπινου επιδερμικού αυξητικού παράγοντα Her-2 εντείνεται και οι καρκίνοι με ενισχυμένο Her-2 φαίνεται να αναπτύσσονται και να αυξάνονται ταχύτερα. Η επίγνωση της κατάστασης Her-2 είναι συνεπώς απαραίτητη για το κλείσιμο της πιθανής πορείας φαρμακευτικής αγωγής. Το Trastuzumab είναι τώρα μια τυπική επικουρική θεραπεία για ασθενείς με αυτόν τον τύπο ενισχυμένης γονιδιακής έκφρασης, ένα ανασυνδυασμένο εξανθρωπισμένο μονοκλωνικό αντίσωμα που στοχεύει στο Her-2 ως άμεση θεραπεία για τον καρκίνο του μαστού. Οι TSG σχετίζονται με τον έλεγχο της ανεπαρκούς κυτταρικής ανάπτυξης και πολλαπλασιασμού ελαχιστοποιώντας ή αποτρέποντας τη διαίρεση των κυττάρων. Η πρωτεΐνη ρετινοβλαστώματος (Rb), BRCA1/2 και p53 είναι τρεις από τις καλά μελετημένες TSG στον καρκίνο. Το Rb είναι κύριος ρυθμιστής κυτταρικής διαίρεσης και η μετάλλαξη Rb παίζει σημαντικό ρόλο σε διάφορους καρκίνους. Οι πιο συχνές αιτίες απενεργοποίησης του γονιδίου Rb1 είναι σημειακές μεταλλάξεις και διαγραφές. Το BRCA1 είναι ένα ένζυμο επιδιόρθωσης DNA που σχετίζεται με πρόσφατα αναπαραγόμενο DNA «διόρθωση» για πιστότητα και αναζήτηση τυχόν μεταλλάξεων. Μέχρι να διαιρεθεί το κύτταρο, τα ένζυμα επιδιόρθωσης DNA κανονικά λειτουργούν για να αφαιρέσουν τα σφάλματα αναπαραγωγής. Οι γονιδιακές μεταλλάξεις BRCA1 ευθύνονται για το 50% των κληρονομικών καρκίνων του μαστού και το 80-90% για τους κληρονομικούς καρκίνους του μαστού και των ωοθηκών. Τέλος, ένας κύριος ρυθμιστής της απόπτωσης ή του προγραμματισμένου κυτταρικού θανάτου είναι η πρωτεΐνη p53. Στον εγκέφαλο, το στήθος, το κόλον, τους πνεύμονες, τα ηπατοκυτταρικά καρκινώματα και τη λευχαιμία, εντοπίζονται μεταλλάξεις p53. Μια άλλη σημαντική εμπλοκή με την απώλεια p53 είναι ότι οδηγεί στο μηχανισμό αντοχής των φαρμάκων χημειοθεραπείας. Η βελτίωση των βιοαισθητήρων που μπορούν να ανιχνεύσουν την ύπαρξη μεταλλάξεων p53, Rb και BRCA1 είναι πολύ δικαιολογημένη και μπορεί να μας επιτρέψει να αξιολογήσουμε την ευαισθησία του πρώιμου καρκίνου με λεπτομερή πρόγνωση και θεραπευτικά σχήματα.

Βιοτσίπ στη διάγνωση

Το βιοτσίπ του DNA ανοίγει ένα νέο πεδίο διάγνωσης που βασίζεται στη γενετική. Ο τρόπος με τον οποίο το ιατρικό επάγγελμα εκτελεί εξετάσεις αίματος θα μπορούσε να φέρει επανάσταση από ένα νεοαναπτυγμένο βιοτσίπ DNA. Είναι σχεδόν άμεσα με το βιοτσίπ μεγέθους σπιρτόκουτου αντί για έναν ασθενή να χρειάζεται να περιμένει αρκετές ημέρες για αποτελέσματα από ένα εργαστήριο. Και χωρίς να θυσιάζεται η ακρίβεια, απαιτεί λιγότερο αίμα. Το βιοτσίπ του DNA μειώνει την ανάγκη για ραδιενεργές ετικέτες που χρησιμοποιούνται για ανίχνευση, εκτός από την εξοικονόμηση χρόνου. Για τους τεχνικούς και τους εργαζόμενους στο εργαστήριο που χειρίζονται δείγματα και εκτελούν δοκιμές, αυτό μειώνει σημαντικά το κόστος και τις μελλοντικές επιπτώσεις στην υγεία. Μειώνει επίσης το κόστος διάθεσης επειδή, σύμφωνα με τους αυστηρούς κανονισμούς, το αίμα με χημική σήμανση πρέπει να χρησιμοποιείται.

Ένας βιοαισθητήρας πρέπει να είναι ιδιαίτερα ευαίσθητος και ικανός να διαφοροποιεί, για παράδειγμα, βακτήρια, ιούς ή άλλα χημικά ή βιολογικά είδη για να είναι χρήσιμος για την ανίχνευση ενώσεων σε δείγμα πραγματικής ζωής. Σύμφωνα με τον Vo-Dinh, ο οποίος διευκρίνισε ότι το βιοτσίπ μιμείται τις εξελιγμένες δυνατότητες αναγνώρισης ενός ζωντανού συστήματος, τα βιοτσίπ του DNA το κάνουν αυτό. Το βιοτσίπ του DNA είναι ένας βιοαισθητήρας που βασίζεται σε γονιδιακό ανιχνευτή, σε αντίθεση με άλλους βιοαισθητήρες που βασίζονται σε ανιχνευτές ενζύμων και αντισωμάτων. Οι βιοαισθητήρες που βασίζονται σε γονιδιακούς ανιχνευτές παρέχουν εξαιρετική επιλεκτικότητα και ευαισθησία, καθιστώντας τα πολύτιμα εργαλεία για τη διάγνωση γενετικών ασθενειών και μολυσματικών ειδών.

Βιοτσίπ στην επιδημία φυματίωσης

Η ανάπτυξη νέων τεχνολογιών βιοτσίπ από Ρώσους και Αμερικανούς επιστήμονες θα μπορούσε να φέρει κάποια ελπίδα να σταματήσει η παγκόσμια αναζωπύρωση της φυματίωσης. Ιδρύθηκε από το Εθνικό Εργαστήριο Argonne του Υπουργείου Ενέργειας των ΗΠΑ και από το Ινστιτούτο Μοριακής Βιολογίας W. A. ​​Englehardt της Ρωσικής Ακαδημίας Επιστημών (Μόσχα), η τεχνολογία προορίζεται να βοηθήσει στην καταπολέμηση της τρέχουσας ποικιλίας στελεχών της νόσου που είναι ανθεκτικά στα φάρμακα.

Ο Παγκόσμιος Οργανισμός Υγείας αναφέρει ότι η φυματίωση σκοτώνει περισσότερους νέους και ενήλικες, συμπεριλαμβανομένου του AIDS και της ελονοσίας μαζί, από οποιαδήποτε άλλη μολυσματική ασθένεια. Η μεγαλύτερη πρόκληση της τρέχουσας επιδημίας φυματίωσης είναι ότι η ασθένεια μπορεί να προκληθεί από διάφορα είδη βακτηρίων και το καθένα είναι ανθεκτικό σε διάφορα φάρμακα. Το κρίσιμο στοιχείο για τον έλεγχο της νόσου είναι ο καθορισμός του στελέχους που επηρεάζει έναν δεδομένο ασθενή και ο προσδιορισμός του καλύτερου αντιβιοτικού για την καταπολέμηση αυτού του στελέχους. Για να γίνει διάκριση μεταξύ πολυάριθμων στελεχών φυματίωσης, η Argonne σκοπεύει να χρησιμοποιήσει την τεχνολογία βιοτσίπ στην έρευνα. Αρχικά θα πραγματοποιούνταν δοκιμές σε τμήματα γενετικού υλικού που αφαιρέθηκαν από βακτήρια φυματίωσης. Τα βιοτσίπ έχουν σχεδιαστεί για να διεξάγουν ταυτόχρονα μια σειρά βιοχημικών αντιδράσεων και έχουν βρεθεί ότι αποδίδουν ικανοποιητικά σε εργαστηριακές δοκιμές. Δεδομένου ότι η ανίχνευση συγκεκριμένων στελεχών φυματίωσης διαρκεί εβδομάδες ή μήνες, οι ασθενείς συχνά συνταγογραφούν πολλά αντιβιοτικά ταυτόχρονα.

Βιοτσίπ στον καρκίνο

Η τεχνολογία τσιπ βιοαισθητήρα παρέχει επίσης γρήγορη και απλή πρόσβαση σε κρίσιμες πληροφορίες σχετικά με τη βλάβη του σύνθετου DNA που προκαλεί καρκίνο, κινώντας τους ερευνητές ένα βήμα πιο κοντά στον αγώνα κατά του καρκίνου. Σε αντίθεση με τις παραδοσιακές μεθόδους βιοαισθητοποίησης, μια μέθοδος φθορισμού με βάση το λέιζερ, υψηλής ανάλυσης και χαμηλής θερμοκρασίας προσφέρει ένα ακριβές αποτύπωμα του μορίου. Είναι πιθανό ότι η ευκολία χρήσης του ενθαρρύνει την αντικατάσταση επεμβατικών ενδοσκοπικών επεμβάσεων και βοηθά στην έγκαιρη ανίχνευση του καρκίνου του παχέος εντέρου.

Βιοαισθητήρες & Βιοτσίπ που εφαρμόζονται στα τρόφιμα και τη γεωργία

Η τρέχουσα παραγωγή τροφίμων αντιμετωπίζει τεράστιες προκλήσεις από τον αυξανόμενο ανθρώπινο πληθυσμό, τη διατήρηση καθαρών πόρων και την ποιότητα των τροφίμων και την προστασία του περιβάλλοντος και του κλίματος. Η βιωσιμότητα των τροφίμων είναι κυρίως μια συνεργασία που καταλήγει στην ανάπτυξη της τεχνολογίας που χρηματοδοτείται τόσο από κυβερνήσεις όσο και από εταιρείες. Έχουν υποστηριχθεί αρκετές προσπάθειες για να ξεπεραστούν οι προκλήσεις και να βελτιωθούν οι οδηγοί στην παραγωγή τροφίμων. Μέσω των εφαρμογών τους, οι βιοαισθητήρες και οι τεχνολογίες βιοαισθητοποίησης χρησιμοποιούνται ευρέως για να λύσουν τις μεγάλες προκλήσεις της παραγωγής τροφίμων και τη βιωσιμότητά της. Ως αποτέλεσμα, υπάρχει μια αυξανόμενη ανάγκη για τεχνολογία βιοαισθητοποίησης στον τομέα της βιωσιμότητας των τροφίμων. Ένα τεχνολογικό σύστημα που συνδυάζει πολλές τεχνολογίες ορίζεται από τα μικρορευστά. Τα νανοϋλικά, με την τεχνολογία βιοαισθητοποίησης, είναι γνωστό ότι είναι το πιο καινοτόμο εργαλείο που σχετίζεται έντονα με τους παγκόσμιους πληθυσμούς στην αντιμετώπιση θεμάτων υγείας, ενέργειας και περιβάλλοντος. Η ανάγκη για τεχνολογία σημείου φροντίδας (POC) σε αυτόν τον τομέα εστιάζει σε αναλυτικά εργαλεία που είναι γρήγορα, απλά, ακριβή, συμπαγή και χαμηλού κόστους.

Για την ύπαρξη και τη ζωή μας, το φαγητό με τη βιομηχανία παραγωγής του είναι απαραίτητο και η βιωσιμότητά του είναι απαραίτητη για τη συνεχή ανθρώπινη ανάπτυξη στον πλανήτη. Η τρέχουσα παραγωγή τροφίμων αντιμετωπίζει τεράστιες δυσκολίες από την αύξηση του ανθρώπινου πληθυσμού, τη διατήρηση καθαρών πόρων και την ποιότητα των τροφίμων και την προστασία του περιβάλλοντος και του κλίματος. Ορισμένα από αυτά τα θέματα προέρχονται από την ίδια την παραγωγή τροφίμων. άλλοι προέρχονται από άλλες βιομηχανίες που σχετίζονται με την παραγωγή τροφίμων. Οι ανακλήσεις τροφίμων, για παράδειγμα, προκαλούν μεγάλη ζημιά στην αξιοπιστία και το κύρος των εμπορικών σημάτων τροφίμων, με μια εκτίμηση 15 εκατομμυρίων δολαρίων ανά περιστατικό τα τελευταία χρόνια. 48 εκατομμύρια αθενών είναι υπεύθυνα για 3000 θανάτους ετησίως λόγω τροφιμογενών ασθενειών.

Η ασφάλεια των τροφίμων είναι σε μεγάλο βαθμό μια συνεργασία που προκύπτει τόσο από κυβερνήσεις όσο και από εταιρείες στην ανάπτυξη τεχνολογίας. Προκειμένου να τεθούν νέες προκλήσεις σε θέματα ασφάλειας τροφίμων, οι τεχνολογίες πληροφοριών όπως η τεχνολογία blockchain μπορούν να επιταχύνουν την επικοινωνία μεταξύ της ποιότητας των τροφίμων, των μέσων ενημέρωσης και των καταναλωτών. Πέντε προκλήσεις μπορούν να συνοψιστούν ως οι κύριες προκλήσεις στη βιωσιμότητα της παραγωγής τροφίμων: η πρόκληση της παραγωγής για την ασφάλεια και την ασφάλεια των τροφίμων, την ποιοτική πρόκληση της ποικιλίας και της ποιότητας των τροφίμων · την οικονομική πρόκληση στο κορυφαίο σύστημα τροφίμων, συμπεριλαμβανομένης της συσκευασίας και της αλυσίδας εφοδιασμού · την περιβαλλοντική πρόκληση, συμπεριλαμβανομένης της επεξεργασίας των απορριμμάτων τροφίμων · και η μηχανική πρόκληση στη δημιουργία και παραγωγή νέων τροφίμων.

Βασικά, ένας βιοαισθητήρας είναι ένα αναλυτικό όργανο που χρησιμοποιείται για τη μέτρηση του μορίου που ενδιαφέρει ένα δείγμα (στόχος). Γενικά, χρησιμοποιείται ένας παράγοντας βιοανάγνωσης (απταμερές, αντίσωμα, ένζυμο κ.λπ.) που είναι μοναδικός για τον στόχο. Ένα φυσικοχημικό ή βιολογικό σήμα προκαλείται από γεγονότα μοριακής αναγνώρισης μεταξύ του στοιχείου αναγνώρισης και της ένωσης -στόχου, η οποία μετατρέπεται σε μετρήσιμη ποσότητα από τον μετατροπέα. Τα σήματα εμφανίζονται είτε σε οπτικό (χρωματομετρικό, φθορισμό, χημειοφωταύγεια και συντονισμό επιφάνειας πλάσμον) είτε σε ηλεκτρικό (βολταμετρία, σύνθετη αντίσταση και χωρητικότητα) ή σε οποιαδήποτε άλλη επιλεγμένη μορφή (Εικόνα 3).

Εικόνα 3. Ταξινόμηση βιοαισθητήρων με βάση μορφοτροπέα και στοιχεία βιοανάγνωσης που χρησιμοποιούνται στην ανάλυση τροφίμων

Ως ένας από τους πρωταρχικούς στόχους της ανάλυσης τροφίμων, η ασφάλεια των τροφίμων αποτελεί μείζον ζήτημα υγείας τόσο στη ζωή των ζώων όσο και των ανθρώπων. Η πρόοδος της αναλυτικής τεχνολογίας για την ασφάλεια των τροφίμων σημαίνει ότι ευδοκιμεί σύμφωνα με το αυξανόμενο ενδιαφέρον και έμφαση σε θέματα ασφάλειας εφοδιασμού τροφίμων. Στην ανάλυση της ασφάλειας των τροφίμων, οι παραδοσιακές προσεγγίσεις είναι απαιτητικές, χρονοβόρες και χρειάζονται εκπαιδευμένους τεχνικούς. Η εφαρμογή των μικρορευστών στην ανάλυση της ασφάλειας των τροφίμων παρέχει νέα εικόνα για τον τρόπο ανίχνευσης αποτελεσματικών και ταχέων τοξινών, αλλεργιογόνων, παθογόνων, επικίνδυνων ουσιών, και άλλων μολυσματικών ουσιών. Τα χαρακτηριστικά των μικρορευστών, όπως η μικροσκοπική ικανότητα, οι συμπαγείς και μειώσιμες ποσότητες δειγμάτων και αντιδραστηρίων, το καθιστούν μια τέλεια τεχνολογία για την ανάπτυξη της βιωσιμότητας των τροφίμων. Η σύνθετη προετοιμασία της μήτρας τροφίμων και τα δύσκολα στάδια παραγωγής είναι οι τρέχουσες προκλήσεις στην εφαρμογή των μικρορευστών στη βιωσιμότητα των τροφίμων. Αυτές οι προκλήσεις μπορούν να αντιμετωπιστούν αξιοποιώντας τις φυσικές ιδιότητες που εξαρτώνται από συγκεκριμένους στόχους δοκιμών, σχεδιάζοντας σύνθετες μικρορευστολογικές πλατφόρμες πραγματικής ανάλυσης τροφίμων και ενσωματώνοντας βιομορια σε μικρορευστικά συστήματα όπως πρωτεΐνες τροφίμων και DNA.

Νανοϋλικά στην τεχνολογία βιοαισθητοποίησης

Με την τεχνολογία βιοαισθητοποίησης, τα νανοϋλικά είναι το πιο ελπιδοφόρο εργαλείο για την αντιμετώπιση προβλημάτων υγείας, ενέργειας και περιβάλλοντος που σχετίζονται με τον πληθυσμό στον κόσμο. Σωματίδια μικρότερα από 100 nm σε τουλάχιστον μία διάσταση μεγέθους είναι γνωστά ως νανοϋλικά. Αυτά τα νανοϋλικά είναι βιοσύνθετα πολυμερή βασισμένα σε μέταλλο, οξείδιο μετάλλου και άνθρακα και έχουν δημιουργηθεί διάφοροι τύποι νανοσωματιδίων, όπως μαγνητικός σίδηρος, αλουμίνιο, χρυσός, ασήμι, χαλκός, πυρίτιο, ψευδάργυρος, οξείδιο ψευδαργύρου, οξείδιο του δημητρίου και νανοσωματίδια διοξειδίου του τιτανίου, και νανοσωλήνες άνθρακα μονής/πολλαπλών τοιχωμάτων (CNT). Η νανοτεχνολογία και η γεωργική της ανάπτυξη έχουν επεκταθεί σε πολλούς τομείς. Αυτοί οι τομείς περιλαμβάνουν την παραγωγή τροφίμων, την προστασία των καλλιεργειών, τον εντοπισμό παθογόνων και τοξινών, τον καθαρισμό του νερού, τη συσκευασία τροφίμων, τη διάθεση λυμάτων και την περιβαλλοντική αποκατάσταση. Η βελτίωση της παραγωγικότητας και της απόδοσης των εφαρμογών αποτελεί προτεραιότητα αυτών των γεωργικών τομέων.

Στον τομέα της ασφάλειας και της προστασίας των τροφίμων, έχουν αναπτυχθεί τεχνολογίες βιοαισθητοποίησης για ανίχνευση θρεπτικών συστατικών και ποιότητας, ανίχνευση παθογόνων παραγόντων και ανίχνευση τοξινών, όπως παρατίθεται παρακάτω.

Ανίχνευση θρεπτικών συστατικών και ποιότητας

Τα μέτρα προστασίας των τροφίμων μπορούν να χωριστούν σε δύο κατηγορίες: απώλεια μετά τη συγκομιδή και βιοασφάλεια τροφίμων. Η βιοασφάλεια των τροφίμων σημαίνει μόλυνση και υποβάθμιση των τροφίμων, η οποία αντιμετωπίζεται στις επόμενες ενότητες, από περιβαλλοντικό, πολιτικό, αθέμιτο οικονομικό κέρδος, πόλεμο ή απαιτητική εκδίκηση. Η απώλεια μετά τη συγκομιδή, από την άλλη πλευρά, υποδηλώνει τα θρεπτικά συστατικά και τις βρώσιμες συνθήκες στα τρόφιμα που πρέπει να διατηρηθούν μεταξύ της περιόδου συγκομιδής και της στιγμής κατανάλωσης από τις τεχνολογίες. Δεδομένου ότι ο χρόνος διαφέρει από λεπτά σε χρόνια, στη διατήρηση και τη μείωση των απωλειών, οι τεχνολογίες που επικεντρώνονται στη μείωση των απωλειών μετά τη συγκομιδή είναι σημαντικές.

Για να διατηρηθεί η ποιότητα των τροφίμων και να αποφευχθούν οι απώλειες μετά τη συγκομιδή, μπορεί να χρησιμοποιηθεί νέα τεχνολογία όπως η βιοαισθητοποίηση. Οι βιοαισθητήρες έχουν αναπτυχθεί, για παράδειγμα, για να ανιχνεύσουν και να αναλύσουν ποσότητες γλυκαντικών σε τρόφιμα που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον εντοπισμό φυσικών και τεχνητών γλυκαντικών. Τα γλυκαντικά χρησιμοποιούνται ευρέως στην παραγωγή και την επεξεργασία τροφίμων, αλλά πρόσφατα εντοπίστηκαν στους ανθρώπους ότι προκαλούν προβλήματα υγείας. Ένας βιοαισθητήρας πολλαπλών καναλιών έχει αναπτυχθεί για να χρησιμοποιεί την ηλεκτροφυσιολογική ανίχνευση από τα επιθηλιακά της γεύσης για την ανίχνευση και ανάλυση φυσικών και τεχνητών γλυκαντικών. Για την ανίχνευση μακροπρόθεσμων σημάτων από σακχαρόζη, γλυκόζη, κυκλαμικό και σακχαρίνη, αντίστοιχα, τα σήματα μελετώνται μέσω χωροχρονικών τεχνικών. Ο βιοαισθητήρας μπορεί να κάνει διάκριση μεταξύ διαφορετικών συγκεντρώσεων με δοσοεξαρτώμενες αυξημένες αποκρίσεις του γευστικού επιθηλίου από διαφορετικά γλυκαντικά. Μπορεί επίσης να κάνει διάκριση μεταξύ δύο φυσικών γλυκαντικών: σακχαρόζη και γλυκόζη, με δύο μοτίβα σήματος. Για τη γλυκόζη, το εύρος ανίχνευσης είναι 50-150 mM, και για τη σακχαρίνη, 5-15 mM.

Ανίχνευση παθογόνων παραγόντων

Λόγω της μειωμένης μορφής τους, οι βιοαισθητήρες που στοχεύουν στην ανίχνευση παθογόνων όπως βακτήρια (πίνακας 1) και μύκητες (πίνακας 2) ξεκίνησαν πριν από περισσότερες από δύο δεκαετίες. μία συσκευή για την αντιμετώπιση πολλαπλών προβλημάτων και ανίχνευση σήματος πολλαπλών πινάκων. Το μοτίβο συνδέτη είναι ένα κρίσιμο στοιχείο στο σχεδιασμό του βιοαισθητήρα για την ανίχνευση παθογόνων, καθώς καθορίζει την ευαισθησία και την αποτελεσματικότητα της συσκευής. Ο στόχος είναι να δημιουργηθεί μια γρήγορη, συγκεκριμένη και ευαίσθητη πλατφόρμα για τον εντοπισμό στα δείγματα τροφίμων της παρουσίας ή απουσίας παθογόνων παραγόντων. Έχει ανακαλυφθεί ότι δεν υπάρχει ιδανικός υποκαταστάτης, και διάφοροι υποκαταστάτες έχουν διαφορετικά πλεονεκτήματα. Ο συνδυασμός βιοϋποδοχέων για την ανίχνευση μιας μεγάλης ποικιλίας μικροβίων σε διαφορετικά δείγματα θέτει τρέχουσες προκλήσεις στην ανίχνευση βιοαισθητήρων παθογόνων. νέα σχέδια συνθετικών συνδετών όπως απταμερή, μικρά μόρια και πεπτίδια και την ενσωμάτωση διαφορετικών υποκαταστατών σε μια φορητή συσκευή για την επίτευξη ταχείας, αποτελεσματικής και χαμηλού κόστους ανίχνευσης.

Πινακας 1. Συνθήκες για τον αριθμό των βακτηρίων που αναπτύσσονται στο γάλα

Θερμοκρασία °C 24 h 48 h 96 h 168 h
0 2100 2100 1850 1400
4 2500 3600 218,000 4,200,000
8 3100 12,000 1,480,000
10 11,600 540,000
15 180,000 28,000,000
30 1,400,000,000

Πινακας 2. Απαιτήσεις θερμοκρασίας και δραστηριότητας νερού για ανάπτυξη μυκήτων

Είδος Ελάχιστο Βέλτιστο Μέγιστο Ελάχιστο Βέλτιστο
Aspergillus ruber 5 24 38 0.72 0.93
A. amstelodami 10 30 42 0.70 0.94
A. flavus 12 35 45 0.80 0.99
A. fuminatus 12 40 52 0.83 0.99
A. niger 10 35 45 0.77 0.99
Penicillium martensii 5 24 32 0.90 0.99

Ανίχνευση τοξινών

Η κύρια εξέλιξη της ασφάλειας των τροφίμων είναι οι ηλεκτροχημικοί βιοαισθητήρες για την ταχεία ανίχνευση και εκτίμηση των τροφικών τοξινών. Πολλές πλατφόρμες έχουν αναπτυχθεί για να επιτρέπουν στις εξατομικευμένες και εξατομικευμένες συσκευές να πληρούν συγκεκριμένες περιβαλλοντικές και οργανωτικές απαιτήσεις και να φτάνουν τα όρια ανίχνευσης nM έως fM. Για παράδειγμα, για να ενθαρρύνουν μοναδικά δεσμευτικά προφίλ, οι συστοιχίες βιοϋποδοχέων απευθύνονται σε μεμονωμένα ηλεκτρόδια που λειτουργούν με διαφορετικούς βιοϋποδοχείς με δεσμευτικούς στόχους. Εκτός από την ηλεκτροχημική βιοαισθητοποίηση, η τοξίνη και η χημική ανίχνευση στην παραγωγή τροφίμων έχουν εφαρμοστεί σε άλλους βιοαισθητήρες όπως η οπτική και η πιεζοηλεκτρική ανίχνευση (Εικόνα 4). Για την αίσθηση των τοξινών, φθορίζοντα νανοσωματίδια έχουν παραχθεί σε τρόφιμα και σώματα, συμπεριλαμβανομένων των επιφανειακών, ενδοκυτταρικών και ενδοκυτταρικών τροφών.

Εικόνα 4. Κυρίαρχοι ρύποι τροφίμων και αναλυτές στόχοι στις βιομηχανίες παραγωγής τροφίμων

Η εξαγωγή τοξίνης από περίπλοκα δείγματα τροφίμων είναι ένα από τα κύρια εμπόδια στη δημιουργία ενός πλήρως αυτοματοποιημένου ανιχνευτή τοξινών. Για να εκτιμηθούν αυτόματα τα επιβλαβή τους επίπεδα από δείγματα τροφίμων και νερού, τα πιθανά συστήματα αναμένεται να εξαγάγουν, να επεξεργαστούν και να μετρήσουν τις τοξίνες. Κατά τον εντοπισμό, τη διάκριση και τον ποσοτικό προσδιορισμό των χημικών τοξινών σε μήτρες τροφίμων, συνδυάστηκαν εξελιγμένες στρατηγικές διαχωρισμού με το SERS. Επιπλέον, παρόλο που είναι συνήθως σε μικρότερες ποσότητες, οι χημικοί μολυσματικοί παράγοντες από την επεξεργασία των τροφίμων μπορεί να είναι μια πρόκληση. Η χαμηλότερη σταθερότητα, η επιλεκτικότητα και η ευαισθησία είναι μια άλλη πρόκληση στην ανίχνευση τοξινών τροφίμων, όπου τα MIP μπορούν να είναι μια λύση για την παροχή σταθερών και χαμηλού κόστους εναλλακτικών λύσεων.

Τα βαρέα μέταλλα όπως Ag+, As3+, Cd2+, Hg2+, Pb2+, and Zn2+ είναι γνωστά ως χημικοί ρύποι που σχηματίζουν σταθερές καταστάσεις οξείδωσης και παρεμβαίνουν στα μεταβολικά μονοπάτια, με αποτέλεσμα προβλήματα υγείας. Οι βιοαισθητήρες Aptamer και DNA μπορούν να ανιχνεύσουν βαρέα μέταλλα τόσο σε νανοκλίμακα όσο και σε πολύ μεγάλης κλίμακας επίπεδα, τα οποία είναι κατάλληλα για τον έλεγχο και την παρακολούθηση της ασφάλειας των τροφίμων. Για να ανιχνευθεί το αρσενικό στα τρόφιμα, ένας βιοαισθητήρας ανίχνευσης βαρέων μετάλλων βασίζεται σε γενετικά τροποποιημένα βακτηριακά κύτταρα και έναν πράσινο, φθορίζοντα ενισχυτή σήματος. Με εύρος ανίχνευσης 5-140 μg/L αρσενικού, η ανίχνευση αρσενικού διαρκεί μόνο μία ώρα και μπορεί να ενσωματωθεί με οπτική ισχύ εξόδου για τη μελλοντική βιοαισθητοποίηση οπτικών ινών. Άλλες τεχνολογίες βιοαισθητοποίησης όπως τα απτάμερα, τα νανοσωματίδια και τα ηλεκτρόδια γραφενίου έχουν εφαρμοστεί με επιτυχία στην αναγνώριση και την αξιολόγηση του αρσενικού, με τη δυνατότητα να παράγονται ως γρήγορες, απλές, εύχρηστες και χαμηλού κόστους συσκευές.

Η νανοτεχνολογία έχει προσαρμοστεί σε δύο χωριστά πεδία γεωργικών τροφίμων: ως φορέας χορήγησης φυτοφαρμάκων για τη διαχείριση φυτοφαρμάκων και ως ανιχνευτής ιχνοστοιχείων για φυτοφάρμακα. Στο πρώτο πεδίο, τα νανοσωματίδια μπορούν να τροποποιήσουν αργά τα φυτοφάρμακα για να στοχεύσουν τα παράσιτα εντόμων, γεγονός που βοηθά στην πρόληψη της ρύπανσης των υπόγειων υδάτων και του επιφανειακού εδάφους, μειώνει τα επίπεδα φυτοφαρμάκων και βελτιώνει την αποδοτικότητα. Στο δεύτερο πεδίο, η βιο-ή βιομιμητική νανοτεχνολογία, όπως αντισώματα, ένζυμα, απταμερή και μακρομόρια που μοιάζουν με MIP, βελτιώνει τη σταθερότητα, την εκλεκτικότητα, την ευαισθησία και την ταχύτητα ανίχνευσης. Επιπλέον, τα βακτηριακά, τα μυκητιακά, τα φύκια και τα θηλαστικά είναι κύτταροι βιοαισθητήρες που χρησιμοποιούνται στην ανίχνευση φυτοφαρμάκων και ζιζανιοκτόνων, βοηθώντας στη δημιουργία γρήγορων, αξιόπιστων, πραγματικών και οικονομικά αποδοτικών εργαλείων για διαδικασίες απολύμανσης και πρόληψης τραυματισμών.

Οι καρκινογόνες ουσίες, οι μυρωδιές και οι θαλάσσιοι ρύποι είναι άλλες τοξίνες που είναι σημαντικές στην παραγωγή τροφίμων. Οι καρκινογόνες ουσίες είναι μια σύνθετη ομάδα ιχνοστοιχείων τοξινών, όπως φυτοφάρμακα, βαρέα μέταλλα, μυκοτοξίνες και ακρυλαμίδιο, στην οποία η δυσκολία εντοπισμού ιχνοστοιχείων αποτελεί πρόκληση. και τα αποτυπωμένα απταμερή, η νανοτεχνολογία και η βιοαισθητοποίηση είναι αισιόδοξα για πολλά υποσχόμενη μελλοντική χρήση. Ευαίσθητα και διαλυτά μόρια αποτελεσματικά στην ανίχνευση οσμών για οσφρητικά ζωικά συστήματα είναι πρωτεΐνες που δεσμεύουν οσμή. Έχει δημιουργηθεί ένας νανοαισθητήρας που συνδυάζει τοπικό SPR και μικρές οσμές που δεσμεύουν πρωτεΐνες από μέλισσες, στο οποίο η περιοχή ανίχνευσης είναι 10 nM – 1 mM χρησιμοποιώντας μια ποσοτική σειρά νανοκουπών. Για την παρακολούθηση και τη διατήρηση ενός σταθερού περιβάλλοντος για τα συστήματα θαλάσσιων τροφίμων, χρησιμοποιείται η ανίχνευση θαλάσσιων μολυντών. Τέλος, μέσω των ευαίσθητων δυνατοτήτων ανίχνευσης, των μικροσκοπικών συσκευών, της ασύρματης επικοινωνίας και των δικτύων μικρής κλίμακας, οι βιοαισθητήρες μπορούν να εφαρμοστούν στην ασφάλεια των θαλάσσιων τροφίμων που θα καθιερωθούν ως προηγμένα εργαλεία ανάλυσης και παρακολούθησης.

Ένα άλλο κιτ ανάπτυξης βιοαισθητήρων για την ασφάλεια των τροφίμων επικεντρώνεται στην ανίχνευση γενετικά τροποποιημένων οργανισμών (ΓΤΟ) σε τρόφιμα. Από τη δεκαετία του 1990, οι ΓΤΟ σε όλους τους τομείς των γεωργικών προϊόντων θεωρούνται επανάσταση στη βιοτεχνολογία. Μέχρι σήμερα, περισσότερο από το 45 % της σόγιας στον κόσμο, το 40 % του καλαμποκιού και το 50 % του βαμβακιού είναι ΓΤ προϊόντα και οι ΓΤΟ χρησιμοποιείται επίσης στην κτηνοτροφία. Πρόσφατη έρευνα, ωστόσο, δείχνει ότι τα προϊόντα ΓΤΟ μπορούν να επηρεάσουν ανθρώπινα και ζωικά σώματα μέσω γαστρεντερικών προβλημάτων, αντοχής στα αντιβιοτικά, αλλεργιογένεσης, ποικιλίας υποβάθμισης των αγροτικών προϊόντων και ανεπιθύμητης ροής γονιδίων σε άλλα είδη. Οι βιοαισθητήρες έχουν σχεδιαστεί για τη μέτρηση των ΓΤΟ σε τρόφιμα και ζωοτροφές χρησιμοποιώντας ισοθερμική ενίσχυση DNA και ανίχνευση σήματος ταχείας ανίχνευσης για τον εντοπισμό ΓΤ γονιδίων. Η ανίχνευση μη αναγνωρισμένων γονιδίων DNA που μπορούν να επιλυθούν με τεχνολογία υψηλής απόδοσης, όπως ο συνδυασμός βιοαισθητοποίησης και συστοιχιών, και η ανάπτυξη βάσεων δεδομένων με γονίδια ΓΤΟ είναι οι βασικές προκλήσεις στην ανίχνευση ΓΤΟ.

Βιοαισθητήρες & Βιοτσίπ για παρακολούθηση του περιβάλλοντος

Λόγω της ισχυρής σύνδεσης μεταξύ ρύπανσης του περιβάλλοντος και ανθρώπινης υγείας/ κοινωνικοοικονομικής προόδου, η παρακολούθηση του περιβάλλοντος έχει καταστεί μία από τις προτεραιότητες σε ευρωπαϊκή και παγκόσμια κλίμακα. Οι βιοαισθητήρες έχουν χρησιμοποιηθεί συνήθως ως οικονομικά αποδοτικές, γρήγορες, επί τόπου και τεχνικές ανάλυσης σε πραγματικό χρόνο σε αυτόν τον τομέα. Η πρόσφατη ανάπτυξη βιοαισθητήρων με νέα υλικά μεταγωγής που προέρχονται από τη νανοτεχνολογία και για πολλαπλή ανίχνευση ρύπων, με τη συμμετοχή πολυεπιστημονικών ειδικών, εξηγεί την ανάγκη για συμπαγείς, γρήγορες και έξυπνες συσκευές βιοαισθητοποίησης. Αρκετές πρόσφατες εξελίξεις υπάρχουν στην παρακολούθηση των ρύπων του αέρα, του νερού και του εδάφους από βιοαισθητήρες σε πραγματικές συνθήκες, όπως φυτοφάρμακα, πολύ τοξικά συστατικά και μικρά οργανικά μόρια, συμπεριλαμβανομένων τοξινών και χημικών που διαταράσσουν ενδοκρινικά.

Οι βιοαισθητήρες που χρησιμοποιούνται στην περιβαλλοντική παρακολούθηση μπορούν να κατηγοριοποιηθούν ως οπτικοί (συμπεριλαμβανομένων των βιοαισθητήρων οπτικών ινών και επιφανειακού συντονισμού πλάσματος), ηλεκτροχημικοί (συμπεριλαμβανομένων των βιοαισθητήρων αμπερομετρικών και σύνθετων αντιστάσεων) και πιεζοηλεκτρικοί (συμπεριλαμβανομένων των βιοαισθητήρων μικροζυγοσταθμίσεων κρυστάλλου χαλαζία) με βάση τη μεταγωγή τους ή ως ανοσοαισθητήρες, ευαισθητήρες, γεννητήρες και ενζυματικοί βιοαισθητήρες με βάση τα στοιχεία αναγνώρισής τους, αντίστοιχα όταν χρησιμοποιούνται αντισώματα, απταμερή, νουκλεϊκά οξέα και ένζυμα. Η πλειοψηφία των βιοαισθητήρων στην περιβαλλοντική παρακολούθηση αναγνωρίζονται ως ανοσοαισθητήρες και ενζυματικοί βιοαισθητήρες, αλλά η ανάπτυξη των απτοαισθητήρων έχει αυξηθεί πρόσφατα λόγω των ευεργετικών χαρακτηριστικών των απταμερών, όπως η ευκολία τροποποίησης, η θερμική σταθερότητα, η σύνθεση in vitro και η ικανότητα σχεδιασμού της δομής τους, να διαφοροποιήσουν στόχους με διαφορετικές λειτουργικές ομάδες και να επαναυβριδοποιήσουν.

Μελέτη για το σχεδιασμό βιοαισθητήρων για την παρακολούθηση οργανικών ρύπων, δυνητικά τοξικών στοιχείων και παθογόνων παραγόντων στο περιβάλλον έχει οδηγήσει στη βιώσιμη ανάπτυξη του πολιτισμού λόγω των περιβαλλοντικών ρύπων που αντιμετωπίζει η ανθρώπινη υγεία. Διάφορες χρωματογραφικές τεχνικές (όπως αέρια χρωματογραφία και υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης σε συνδυασμό με τριχοειδή ηλεκτροφόρηση ή φασματομετρία μάζας) είναι συμβατικές αναλυτικές μέθοδοι που χρησιμοποιούνται για την περιβαλλοντική παρακολούθηση των ρύπων, αλλά απαιτούν δαπανηρά αντιδραστήρια, χρονοβόρο προεπεξεργασία δείγματος και δαπανηρό εξοπλισμό. Ως εκ τούτου, για την παρακολούθηση των ρύπων που είναι υπεύθυνες για δυσμενείς επιπτώσεις στους βιότοπους και την ανθρώπινη υγεία, χρειάζονται απελπιστικά πιο ευαίσθητες, οικονομικά αποδοτικές, γρήγορες, εύχρηστες και συμπαγείς συσκευές βιοαισθητοποίησης για να ξεπεραστεί η μεγέθυνση των περιβαλλοντικών ζητημάτων. Σε περίπτωση τυχαίας απελευθέρωσης φυτοφαρμάκων ή οξείας δηλητηρίασης, για παράδειγμα, οι κοινές μέθοδοι δεν είναι κατάλληλες για επιτόπιες μετρήσεις όπου απαιτείται γρήγορος, μικροσκοπικός και φορητός εξοπλισμός όπως βιοαισθητήρες παρακολούθησης του περιβάλλοντος. Από αυτή την άποψη, ο ρόλος της νανοτεχνολογίας στη δημιουργία ταχείων και ευφυών συσκευών βιοαισθητοποίησης είναι καθοριστικός για την επιτυχία της ανίχνευσης περιβαλλοντικών ρύπων. Οι πιο πρόσφατοι βιοαισθητήρες περιλαμβάνουν νανοϋλικά και νέα νανοσύνθετα στα συστήματά τους, τα οποία είναι ευεργετικά για τη βελτίωση της αναλυτικής απόδοσης, όπως η ευαισθησία και τα όρια ανίχνευσης.

Για την ανίχνευση και την παρακολούθηση διαφόρων περιβαλλοντικών ρύπων, έχουν τεκμηριωθεί βιοαισθητήρες, συμπεριλαμβανομένων ανοσοαισθητήρων, απταισθητήρων, γεννητήρων και ενζυματικών βιοαισθητήρων, χρησιμοποιώντας αντισώματα, απταμερή, νουκλεϊκά οξέα και ένζυμα ως στοιχεία αναγνώρισης.

Φυτοφάρμακα

Τα φυτοφάρμακα είναι από τους σημαντικότερους περιβαλλοντικούς ρύπους λόγω της μεγάλης παρουσίας τους στο περιβάλλον. Τα εντομοκτόνα οργανικού φωσφόρου, για παράδειγμα, χρησιμοποιούνται συνήθως στη γεωργία και αντιπροσωπεύουν μια ομάδα φυτοφαρμάκων τα οποία, λόγω της υψηλής τοξικότητάς τους, αποτελούν τεράστιο περιβαλλοντικό ενδιαφέρον. Ως εκ τούτου, καθιερώθηκαν εύκολες, ανταποκρινόμενες και μικροσκοπικές μεθοδολογίες επί τόπου, όπως οι βιοαισθητήρες, ως αναλυτικές στρατηγικές για τον εντοπισμό και την παρακολούθησή τους, χωρίς να απαιτείται πλήρης προεπεξεργασία τουδείγματος.

Προτάθηκαν μίας χρήσης αμπερομετρικοί ενζυματικοί βιοαισθητήρες (ακετυλοχολινεστεράση) για την ανίχνευση εντομοκτόνων οργανικού φωσφόρου χρησιμοποιώντας paraoxon ως πρότυπο αναλύτη που εφαρμόζει αυτοσυναρμολογημένη μονοστιβάδα κυστεαμίνης σε ηλεκτρόδια με εκτύπωση χρυσού. Οι βιοαισθητήρες μιας χρήσης έδειξαν γραμμικό φάσμα έως 40 ppb με όριο ανίχνευσης 2 ppb και ευαισθησία 113 μA mM cm-2. Χρησιμοποιώντας την αυτοσυναρμολογημένη μονοστιβάδα, η καλή αναλυτική απόδοση θα μπορούσε να οφείλεται στην ακινητοποίηση του ενζύμου με υψηλό προσανατολισμό. Ανακτήσεις 97 ± 5 τοις εκατό (n = 3) αναφέρθηκαν μετά από δοκιμή σε δείγματα νερού ποταμών που είχαν κολληθεί με 10 ppb παραόξον, υποδεικνύοντας την αποτελεσματικότητα τέτοιων ενζυματικών βιοαισθητήρων. Επιπλέον, η χρήση ηλεκτροδίων μίας χρήσης απορρίπτει χρονοβόρες μεθόδους όπως η επαναενεργοποίηση ακινητοποιημένων ενζύμων που χρησιμοποιούν, για παράδειγμα, διάλυμα οβιδοξίμης και ιωδιούχο πραλιδοξίμη (PAM) ή τη χρήση της ανανεώσιμης ενζυμικής μεμβράνης που απαιτείται για τη δεύτερη εφαρμογή βιοαισθητήρων. Το

Τα νανοσωματίδια που βασίζονται σε οξείδιο του ιριδίου έχουν χρησιμοποιηθεί στον ενζυματικό βιοαισθητήρα μιας χρήσης με τυροσινάση βασισμένη σε χαμηλού κόστους ηλεκτρόδια άνθρακα με εκτύπωση για την ανίχνευση χλωροπυρίφου σε δείγματα νερού ποταμών. Αναφέρθηκαν γραμμική απόκριση βιοαισθητήρα (0,01-0,1 μΜ) και χαμηλό όριο ανίχνευσης (3 nM), τα οποία θα μπορούσαν να οφείλονται στην υψηλή αγωγιμότητα των νανοσωματιδίων του οξειδίου του ιριδίου και της αποτελεσματικότητας της τυροσινάσης. Πραγματοποιήθηκαν δοκιμές ανάκτησης σε δείγματα νερού ποταμού με την προσθήκη 0,1 μΜ χλωροπυρίφου και ανακτήθηκαν 90 ± 9,6 τοις εκατό με υπολειπόμενη τυπική απόκλιση (RSD) μικρότερη από 10 τοις εκατό (n = 3) για να καταδειχθεί η δυνατότητα εφαρμογής του βιοαισθητήρα.

Η ακεταμιπρίδη ανιχνεύθηκε με χρωματομετρικούς απταισθητήρες και δείγματα νερού από μη μετρητές ευαισθητοποίησης σε πραγματικά περιβαλλοντικά δείγματα, όπως δείγματα εδάφους φρέσκιας επιφάνειας. Παρατηρήθηκε γραμμικό εύρος 75 nM έως 7,5 μM και όριο ανίχνευσης 5 nM με τον χρωματομετρικό απτααισθητήρα, ενώ ένα ευρύτερο γραμμικό εύρος (50 fM έως 10 μM) και ένα χαμηλότερο όριο ανίχνευσης (17 fM) παρατηρήθηκε με τον απινιδόμετρο απτααισθητήρα. Τα νανοσωματίδια χρυσού, οι νανοσωλήνες άνθρακα πολλαπλών τοιχωμάτων (MWCNT) και οι νανοκορδέλες μειωμένου οξειδίου του γραφενίου χρησιμοποιήθηκαν σε αυτόν τον βιοαισθητήρα ως σύνθετο υλικό για τη διατήρηση του απταμερούς ακεταμιπρίδης επιφάνειας ηλεκτροδίου, το οποίο θα μπορούσε να είναι υπεύθυνο για υψηλότερη μεταφορά ηλεκτρονίων και βελτιωμένη αναλυτική απόδοση του βιοαισθητήρα. Ένα σχετικό όριο ανίχνευσης (33 fM) παρατηρήθηκε από έναν απτααισθητήρα βασισμένο σε νανοσωματίδια αργύρου αγκυροβολημένα σε νανοσύνθετο οξείδιο του γραφενίου με νότες αζώτου κατασκευασμένο για ανίχνευση ακεταμιπρίδης σε δείγματα λυμάτων.

Παθογόνοι παράγοντες

Η ύπαρξη παθογόνων παραγόντων σε περιβαλλοντικές μήτρες, και ιδιαίτερα σε υδατικά διαμερίσματα, θα μπορούσε να αποτελέσει σοβαρό κίνδυνο για την ανθρώπινη υγεία και πρόσφατα έχουν προταθεί ορισμένοι βιοαισθητήρες για την παρακολούθηση του περιβάλλοντος. Για παράδειγμα, για την ανίχνευση μεταβολικά δραστικής Legionella pneumophila σε πολύπλοκα περιβαλλοντικά δείγματα νερού, έχουν προταθεί γρήγοροι και ακριβείς οπτικοί βιοαισθητήρες βασισμένοι σε συντονισμό πλασμονίου επιφάνειας. Σε μια μελέτη, η αρχή της ανίχνευσης βασίστηκε στην ταυτοποίηση του βακτηριακού RNA από τον ακινητοποιημένο ανιχνευτή ανιχνευτή RNA στη χρυσή επιφάνεια του βιοτσίπ. Για ενίσχυση σήματος, χρησιμοποιήθηκαν κβαντικές κουκίδες συζευγμένες με στρεπταβιδίνη και η περίοδος ανίχνευσης ήταν περίπου τρεις ώρες, υποδεικνύοντας τη βιωσιμότητα της συσκευής βιοαισθητοποίησης για επιτυχή ανίχνευση βακτηρίων στην περιοχή 104-108 CFU mL-1.

Δυνητικά τοξικά στοιχεία

Η μόλυνση από βαρέα μέταλλα και αντίστοιχα ιόντα των φυσικών υδάτων μπορεί να θέσει σημαντικούς κινδύνους για την ανθρώπινη υγεία και οι συμπαγείς, χαμηλού κόστους και γρήγορες αναλύσεις βαρέων μετάλλων αποτελούν παγκόσμια προτεραιότητα. Ως πρότυπος στόχος για τη δοκιμή ενός βιοαισθητήρα οπτικού DNA για την ανίχνευση ιόντων βαρέων μετάλλων που είναι εξαιρετικά τοξικά και συνηθισμένοι ρύποι στο περιβάλλον, χρησιμοποιήθηκαν ιόντα υδραργύρου (Hg2+). Ο βιοαισθητήρας ήταν συμπαγής, χαμηλού κόστους και γρήγορος με επιτόπιο έλεγχο Hg2+ σε φυσικά νερά σε λιγότερο από 10 λεπτά. Η αρχή της ανίχνευσης επικεντρώνεται στην ικανότητα ορισμένων μεταλλικών ιόντων να δεσμεύονται επιλεκτικά σε ορισμένες βάσεις για να σχηματίσουν σταθερά διπλά DNA με τη μεσολάβηση μετάλλων. στην περίπτωση του Hg2+, οι βάσεις θυμίνης μπορούν να συντονιστούν επιλεκτικά για να σχηματίσουν σταθερά σύμπλοκα θυμίνης- Hg2+-θυμίνης. Στο εύρος ανίχνευσης μεταξύ 0 και 1000 nM, επιτεύχθηκε όριο ανίχνευσης 1,2 nM, το οποίο είναι χαμηλότερο από τη μέγιστη τιμή που ζήτησε η Υπηρεσία Προστασίας του Περιβάλλοντος των Ηνωμένων Πολιτειών (10 nM)

Για την ανίχνευση Pb2+ σε δείγματα νερού (δείγματα λίμνης και νερού λίμνης) με χρήση DNA ενζύμων/καρβοξυλιωμένων μαγνητικών σφαιριδίων και απταμερών DNA, προτάθηκαν πρόσφατα δύο οπτικοί βιοαισθητήρες με βάση τον φθορισμό. Τα όρια ανίχνευσης των 5 ηΜ και 61 ηΜ, αντίστοιχα, παρατηρήθηκαν από βιοαισθητήρες βασισμένους σε DNA ένζυμα και απταμερή DNA, με αντίστοιχο εύρος γραμμικής ανίχνευσης από 0 έως 50 ηΜ και 100 έως 1000 ηΜ. Η χρήση μοναδικής βαφής χωρίς ετικέτα (SYBER Green I), η οποία συνδυάστηκε με δίκλωνο DNA, εμφανίζοντας ισχυρές εντάσεις φθορισμού, όπως φαίνεται στο σχήμα 5. Επιπλέον, η απουσία έντασης φθορισμού βιοαισθητήρα παρατηρείται μόνο με τη βαφή (καμπύλη a ). Με το DNAzyme + Pb2+ (καμπύλη b) η ένταση φθορισμού αυξάνεται με την προσθήκη της βαφής + DNAzyme + Pb2+, απεικονίζοντας την ευαισθησία του βιοαισθητήρα προς το Pb2+.

Εικόνα 5. Φάσματα εκπομπών φθορισμού για ανίχνευση Pb2+

Τοξίνες

Επιβλαβείς τοξίνες όπως οι μπρεβετοξίνες και οι μικροκυστίνες δημιουργούνται από τον ευτροφισμό των υδάτινων συστημάτων από τα φύκια των κυανοβακτηρίων, και έτσι απαιτούνται ακριβή και οικονομικά αποδοτικά συστήματα για την έγκαιρη ανίχνευση τέτοιων τοξινών. Για την ευαίσθητη ανίχνευση της μπρεβετοξίνης 2, μιας θαλάσσιας νευροτοξίνης, έχει χρησιμοποιηθεί ένας ηλεκτροχημικός απτααισθητήρας που αποτελείται από ηλεκτρόδια χρυσού που λειτουργούν με αυτοσυναρμολογημένες μονοστιβάδες κυστεαμίνης. Επιτεύχθηκε όριο ανίχνευσης 106 pg mL-1 και παρατηρήθηκε ισχυρή εκλεκτικότητα για τη μπρεβετοξίνη-2 έναντι άλλων τοξινών διαφόρων ομάδων, όπως το οκαδαϊκό οξύ και η μικροκυστίνη. Η σκοπιμότητα του απτασένσορα για την ανίχνευση της brevetoxin-2 σε πραγματικά δείγματα επιτεύχθηκε με την ανάλυση οστρακοειδών και αναφέρθηκαν ισχυρές ανακτήσεις (102-110 %), υποδεικνύοντας καμία αλληλεπίδραση με την απόκριση απτασένσορα από τη μήτρα οστρακοειδών.

Χημικές ενδοκρινικές διαταραχές

Σε δείγματα νερού, η δισφαινόλη Α ανιχνεύθηκε ως ενδοκρινική διαταραχή χημικής ουσίας από ευαισθητοποιητές με βάση την αρχή του φθορισμού με λειτουργικά απταμερή (αμιδίτη φθοροσκεΐνης) και νανοσωματίδια χρυσού και με βάση οπτική ίνα κύματος που φεύγει. Ο απαλαισθητήρας οπτικών ινών με διαβροχή κύματος ήταν συμπαγής και διαπιστώθηκε ότι ήταν γρήγορος, οικονομικά αποδοτικός, ευαίσθητος και επιλεκτικός για την ανίχνευση της δισφαινόλης Α σε δείγματα νερού, χωρίς να απαιτείται κανένα στάδιο προ-συγκέντρωσης ή επεξεργασίας. Επιπρόσθετα, ο απτοαισθητήρας μπορεί να επαναχρησιμοποιηθεί για 90 δευτερόλεπτα με αναγέννηση με διάλυμα 0,5% δωδεκυλοθειικό νάτριο (SDS) και περαιτέρω πλύση με διάλυμα αλατούχου ρυθμιστικού φωσφορικού (PBS) (ρΗ 7,2) για πάνω από εκατό κύκλους ανάλυσης χωρίς καμία αξιοσημείωτη απώλεια αποδοτικότητα. Παρόμοια όρια ανίχνευσης (0,1 και 0,45 ng mL-1) παρατηρήθηκαν και στους δύο οπτικούς βιοαισθητήρες όπου ο ανιχνευτής μορίου DNA, που είναι η συμπληρωματική αλληλουχία ενός μικρού κλάσματος του απταμερούς δισφαινόλης Α, προσροφήθηκε με ηλεκτροστατική αλληλεπίδραση στην επιφάνεια των νανοσωματιδίων χρυσού και ακινητοποιήθηκε ομοιοπολικά στην επιφάνεια της ίνας. Πρόσφατα, για την ανίχνευση της δισφαινόλης Α σε δείγματα νερού ποταμών με χρήση νανοσωλήνων καρβιδίου μολυβδαινίου, προτάθηκε ένας άλλος απτααισθητήρας με βάση τον φθορισμό. Με έναν τέτοιο απτοαισθητήρα χωρίς ετικέτα, φθηνό και εύκολο στη χρήση, έχει επιτευχθεί ένα χαμηλό όριο ανίχνευσης 0,23 ng mL − 1. Η ειδικότητα του aptasensor αξιολογήθηκε με ανάλυση άλλων μορίων με δομές παρόμοιες με αυτές της δισφαινόλης Α (π.χ., 4,4J-διφαινόλη, διφαινόλη AF και 4,4J-σουλφονυλοδιφαινόλη) και εντοπίστηκαν μόνο σήματα υποβάθρου που δείχνουν υψηλή εξειδίκευση για τη δισφαινόλη Α για αυτά τα μόρια.

Ένας ηλεκτροχημικός ανοσοαισθητήρας μιας χρήσης και χωρίς ετικέτες, βασισμένος σε τρανζίστορ φαινομένου πεδίου με SWCNT, χρησιμοποιήθηκε πρόσφατα σε δείγματα θαλασσινού νερού για την αξιολόγηση μιας άλλης ενδοκρινικής διαταραχής χημικής ουσίας-4-νονυλοφαινόλης. Ο ανοσοαισθητήρας έχει υψηλή αναπαραγωγιμότητα (0,56 ± 0,08%), μέση ανάκτηση 97,8% έως 104,6% και χαμηλό όριο ανίχνευσης (5 μg L-1), το οποίο είναι χαμηλότερο από τη συνιστώμενη μέγιστη συγκέντρωση 7 μg L-1 που καθορίζεται με τους αντίστοιχους κανονισμούς. Σε δείγματα θαλασσινού νερού όπως η 4-νονυλοφαινόλη, ο βιοαισθητήρας θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό επικίνδυνων ουσιών προτεραιότητας, ακόμη και σε χαμηλές συγκεντρώσεις και με εύκολη και χαμηλού κόστους μεθοδολογία.

Άλλες περιβαλλοντικές ενώσεις

Νέες, γρήγορες και ακριβείς αναλυτικές μεθοδολογίες χρειάστηκαν για την έγκαιρη ανίχνευση και παρακολούθηση διαφόρων άλλων επικίνδυνων ενώσεων που απελευθερώθηκαν κατά τη διάρκεια της ανθοφορίας των φυκιών. Λόγω της εξαιρετικής ευαισθησίας και εξειδίκευσης των ανιχνευτών νουκλεϊνικού οξέος στους συμπληρωματικούς συνεργάτες δέσμευσής τους, έχουν αναπτυχθεί βιοαισθητήρες για την ανίχνευση RNA φυκιών. Για την ενισχυμένη επιλεκτική και ευαίσθητη ανίχνευση RNA από 13 επιβλαβείς οργανισμούς φυκιών, πρόσφατα αναφέρθηκε ένας ηλεκτροχημικός γενοαισθητήρας βασισμένος σε ηλεκτρόδιο χρυσού με εκτύπωση οθόνης, ο γενοαισθητήρας θα μπορούσε να διακρίνει τους στόχους RNA από περιβαλλοντικά δείγματα (δείγματα θαλασσινού νερού με αιχμές) που περιέχουν 105 κύτταρα, που θεωρούνται ως το όριο ανίχνευσης.

Test: LO3 Προχωρημένο επίπεδο

Βιβλιογραφικές αναφορές

  • Adami A; Mortari A; Morganti E; Lorenzelli L. 2018. Microfluidic Sample Preparation Methods for the Analysis of Milk Contaminants. Available online: https://www.hindawi.com/journals/js/2016/2385267/
  • Al-Mawali A. 2015. Non-communicable diseases: shining a light on cardiovascular dis- ease, Oman’s biggest killer. Oman Med. J., 30 (4): 227.
  • Arduini F, Guidone S, Amine A, Palleschi G, Moscone D. 2013. Acetylcholinesterase biosensor based on self-assembled monolayer-modified gold-screen printed electrodes for organophosphorus insecticide detection. Sens. Actuators B Chem., 179: 201–208.
  • Arduini F, Cinti S, Scognamiglio V, Moscone D. 2016. Nanomaterials in electrochemical biosensors for pesticide detection: advances and challenges in food analysis. Microchim. Acta, 183: 2063–2083.
  • Arugula MA, Simonian AL. 2016. Biosensors for Detection of Genetically Modified Organisms in Food and Feed. In Genetically Modified Organisms in Food, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 97–110, ISBN 978-0-12-802259-7.
  • Ayari-Jeridi H. et al. 2015. Mutation spectrum of RB1 gene in unilateral retinoblastoma cases from Tunisia and correlations with clinical features. PLoS One, 10 (1): e0116615.
  • Bahadır EB, Sezgintürk MK. 2017. Biosensor technologies for analyses of food contaminants. In Nanobiosensors, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 289–337, ISBN 978-0-12-804301-1.
  • Baldwin CJ. 2015. Introduction to the Principles. In The 10 Principles of Food Industry Sustainability, John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, USA, pp. 1–14, ISBN 978-1-118-44769-7.
  • Beck MB, Walker VR. 2013. On water security, sustainability, and the water-food-energy-climate nexus. Front. Environ. Sci. Eng., 7: 626–639.
    Belkhamssa N, da Costa JP, Justino CIL, Santos PSM, Cardoso S, Duarte AC, Rocha-Santos T, Ksibi M. 2016. Development of an electrochemical biosensor for alkylphenol detection. Talanta, 158: 30–34.
  • Bhalla N. et al. 2016. Introduction to biosensors. Essays Biochem., 60 (1): 1–8.
  • Bohunicky B, Mousa SA. 2011. Biosensors: the new wave in cancer diagnosis. Nanotechnol. Sci. Appl., 4: 1.
  • Bourne MC. 2014. Food Security: Postharvest Losses. In Encyclopedia of Agriculture and Food Systems, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 338–351, ISBN 978-0-08-093139-5.
  • Bruen D et al. 2017. Glucose sensing for diabetes monitoring: recent developments. Sensors, 1866.
  • Burris KP, Stewart CN. 2012. Fluorescent nanoparticles: Sensing pathogens and toxins in foods and crops. Trends Food Sci. Technol., 28: 143–152.
    Byrne B et al. 2009. Antibody-based sensors: principles, problems and potential for detection of pathogens and associated toxins. Sensors, 9 (6): 4407–4445.
  • Cash KJ, Clark HA. 2010. Nanosensors and nanomaterials for monitoring glucose in diabetes. Trends Mol. Med., 16 (12): 584–593.
  • Chao R, Mishra S, Si T, Zhao H. 2017. Engineering biological systems using automated biofoundries. Metab. Eng., 42: 98–108.
  • Chen Y, Li H, Gao T, Zhang T, Xu L, Wang B, Wang J, Pei R. 2018. Selection of DNA aptamers for the development of light-up biosensor to detect Pb(II). Sens. Actuators B Chem., 254: 214–221.
  • Eissa S, Siaj M, Zourob M. 2015. Aptamer-based competitive electrochemical biosensor for brevetoxin-2. Biosens. Bioelectron., 69: 148–154.
  • Elmore S. 2007. Apoptosis: a review of programmed cell death. Toxicol. Pathol., 35 (4): 495–516.
  • Enrico DL, Manera MG, Montagna G, Cimaglia F, Chesa M, Poltronieri P, Santino A, Rella R. 2013. PR based immunosensor for detection of Legionella pneumophila in water samples. Opt. Commun., 294: 420–426.
  • EPA. National Recommended Water Quality Criteria—Aquatic Life Criteria Table. Available online: http://www.epa.gov/wqc/national-recommended-water-quality-criteria-aquatic-life-criteria-table
  • Fei A, Liu Q, Huan J, Qian J, Dong X, Qiu B, Mao H, Wang K. 2015. Label-free impedimetric aptasensor for detection of femtomole level acetamiprid using gold nanoparticles decorated multiwalled carbon nanotube-reduced graphene oxide nanoribbon composites. Biosens. Bioelectron., 70: 122–129.
  • Foudeh AM, Trigui H, Mendis N, Faucher SP, Veres T, Tabrizian M. 2015. Rapid and specific SPRi detection of L. pneumophila in complex environmental water samples. Anal. Bioanal. Chem., 407: 5541–5545.
  • Garnet TF. 2013. Food sustainability: Problems, perspectives and solutions. Proc. Nutr. Soc., 72: 29–39.
  • Gheorghe I, Czobor I, Lazar V, Chifiriuc MC 2017. Present and perspectives in pesticides biosensors development and contribution of nanotechnology. In New Pesticides and Soil Sensors, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 337–372, ISBN 978-0-12-804299-1.
  • Ghorashi M. 2018. Technology’s Role in Eradicating Foodborne Illness. Available online: https://www.foodsafetymagazine.com/signature-series/technologye28099s-role-in-eradicating-foodborne-illness/
  • Giacinti C, Giordano A. 2006. RB and cell cycle progression. Oncogene, 25 (38): 5220–5227.
  • Guo L, Li Z, Chen H, et al. 2017. Colorimetric biosensor for the assay of paraoxon in environmental water samples based on the iodine-starch color reaction. Anal. Chim. Acta, 967: 59–63.
  • Hameed I, et al. 2015. Type 2 diabetes mellitus: from a metabolic disorder to an inflammatory condition. World J. Diabetes, 6 (4): 598.
    Hassani S, Momtaz S, Vakhshiteh F, et al. 2017. Biosensors and their applications in detection of organophosphorus pesticides in the environment. Arch. Toxicol., 91: 109–130.
  • He MQ, Wang K, Wang J, Yu YL, He RH. 2017. A sensitive aptasensor based on molybdenum carbide nanotubes and label-free aptamer for detection of bisphenol A. Anal. Bioanal. Chem., 409: 1797–1803.
  • Holford TR et al. 2012. Recent trends in antibody based sensors. Biosens. Bioelectron., 34 (1): 12–24.
  • Hughes RA, Ellington AD. 2017. Synthetic DNA synthesis and assembly: Putting the synthetic in synthetic biology. Cold Spring Harb. Perspect. Biol., 9.
  • Husu I, Rodio G, Touloupakis E, et al. 2013. Insights into photo-electrochemical sensing of herbicides driven by Chlamydomonas reinhardtii cells. Sens. Actuators B Chem., 185: 321–330.
  • Jain KK. 2004. “Applications of biochips: from diagnostics to personalized medicine.” Curr Opin Drug Discov Devel, 7(3): 285-289.
  • Jiang D, Du X, Liu Q, Zhou L, Dai L, Qian J, Wang K. 2015. Silver nanoparticles anchored on nitrogen-doped graphene as a novel electrochemical biosensing platform with enhanced sensitivity for aptamer-based pesticide assay. Analyst, 140: 6404–6411.
  • Justino CIL, Freitas AC, Duarte AC, Santos TAPR. 2015. Sensors and biosensors for monitoring marine contaminants. Trends Environ. Anal. Chem., 6–7: 21–30.
  • Justino CIL, Freitas AC, Pereira R, Duarte AC, Rocha-Santos TAP. 2015. Recent developments in recognition elements for chemical sensors and biosensors. Trends Anal. Chem., 68: 2–17.
  • Kazemi-Darsanaki R et al. 2012. Biosensors: functions and applications. J. Biol. Today’s World, 2 (1): 20–23.
  • Khot LR, Sankaran S, Maja JM, Ehsani R, Schuster EW. 2012. Applications of nanomaterials in agricultural production and crop protection: A review. Crop Prot., 35: 64–70.
  • Kost GJ, Tran NK., 2005. Point-of-care testing and cardiac biomarkers: the standard of care and vision for chest pain centers. Cardiol. Clin., 23 (4): 467–490.
  • Lang Q, Han L, Hou C, Wang F, Liu A. 2016. A sensitive acetylcholinesterase biosensor based on gold nanorods modified electrode for detection of organophosphate pesticide. Talanta, 156: 34–41.
  • Lee EY, Muller WJ. 2010. Oncogenes and tumor suppressor genes. Cold Spring Harb. Perspect. Biol., 2 (10): a003236.
  • Li Z, Yu Y, Li Z, Wu T. 2015. A review of biosensing techniques for detection of trace carcinogen contamination in food products. Anal. Bioanal. Chem., 407: 2711–2726.
  • Liao W, Lu X. 2016. Determination of chemical hazards in foods using surface-enhanced Raman spectroscopy coupled with advanced separation techniques. Trends Food Sci. Technol., 54: 103–113.
  • Long F, Zhu A, Shi H, Wang H, Liu J. 2013. Rapid on-site/in-situ detection of heavy metal ions in environmental water using a structure-switching DNA optical biosensor. Sci. Rep., 3: 2308.
  • Loo C, et al. 2005. Immunotargetednanoshells for integrated cancer imaging and therapy. Nano Lett., 5 (4): 709–711.
  • Maduraiveeran G, Jin W. 2017. Nanomaterilas based electrochemical sensor and biosensor platforms for environmental applications. Trends Environ. Anal. Chem., 13: 10–23.
  • Marcellin E, Nielsen LK 2018. Advances in analytical tools for high throughput strain engineering. Curr. Opin. Biotechnol., 54: 33–40.
  • Martín-Timón I et al. 2014. Type 2 diabetes and cardiovascular disease: have all risk factors the same strength? World J. Diabetes, 5 (4): 444.
  • Mayorga-Martinez C, Pino F, Kurbanoglua S, et al. 2014. Iridium oxide nanoparticles induced dual catalytic/inhibition based detection of phenol and pesticide compounds. J. Mater. Chem. B, 2: 2233–2239.
  • McPartlin DA, Loftus JH, Crawley AS, et al. 2017. Biosensors for the monitoring of harmful algal blooms. Curr. Opin. Biotechnol., 45: 164–169.
  • Mehrotra P. 2016. Biosensors and their applications – a review. J. Oral. Biol. Craniofac Res., 6 (2): 153–159.
  • Meriç S, Çakır Ö, Turgut-Kara N, Arı S. 2014. Detection of genetically modified maize and soybean in feed samples. Genet. Mol. Res., 13: 1160–1168.
  • Moran KLM, Fitzgerald J, McPartlin DA, Loftus JH, O’Kennedy R. 2016. Biosensor-Based Technologies for the Detection of Pathogens and Toxins. In Comprehensive Analytical Chemistry, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, Volume 74, pp. 93–120, ISBN 978-0-444-63579-2.
  • Mungroo NA, Neethirajan S. 2014. Biosensors for the Detection of Antibiotics in Poultry Industry—A Review. Biosensors, 4: 472–493.
  • Ngoepe M et al. 2013. Integration of biosensors and drug delivery technologies for early detection and chronic management of illness. Sensors, 13 (6): 7680–7713.
  • Omidfar K. et al. 2013. New analytical applications of gold nanoparticles as label in antibody based sensors. Biosens. Bioelectron., 43: 336–347.
    Orozco J, Villa E, Manes C, Medlin LK, Guillebault D. 2016. Electrochemical RNA genosensors for toxic algal species: Enhancing selectivity and sensitivity. Talanta, 161: 560–566.
  • Patra S, Roy E, Madhuri R, Sharma PK. 2017. A technique comes to life for security of life: The food contaminant sensors. In Nanobiosensors, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 713–772, ISBN 978-0-12-804301-1.
  • Pola-López LA, Camas-Anzueto JL, Martínez-Antonio A, et al. 2018. Novel arsenic biosensor “POLA” obtained by a genetically modified E. coli bioreporter cell. Sens. Actuators B Chem., 254: 1061–1068.
  • Ragavan KV, Selvakumar LS, Thakur MS. 2013. Functionalized aptamers as nano-bioprobes for ultrasensitive detection of bisphenol-A. Chem. Commun., 49: 5960–5962.
  • Rapini R, Marrazza G. 2016. Biosensor Potential in Pesticide Monitoring. In Comprehensive Analytical Chemistry, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, Volume 74, pp. 3–31, ISBN 978-0-444-63579-2.
  • Ravikumar A, Panneerselvam P, Radhakrishnan K, et al. 2017. DNAzyme based amplified biosensor on ultrasensitive fluorescence detection of Pb(II) ions from aqueous system. J. Fluoresc., 27: 2101–2109.
  • Rocchitta G, et al. 2016. Enzyme biosensors for biomedical applications: strategies for safeguarding analytical performances in biological fluids. Sensors, 16 (6).
  • Rotariu L, Lagarde F, Jaffrezic-Renault N, Bala C. 2016. Electrochemical biosensors for fast detection of food contaminants—Trends and perspective. TrAC Trends Anal. Chem., 79: 80–87.
  • Saucedo NM, Mulchandan A. 2016. Sensing of Biological Contaminants. In Comprehensive Analytical Chemistry, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, Volume 74, pp. 73–91, ISBN 978-0-444-63579-2.
  • Shi H, Zhao G, Liu M, Fan L, Cao T. 2013. Aptamer-based colorimetric sensing of acetamiprid in soil samples: Sensitivity, selectivity and mechanism. J. Hazard. Mater., 260: 754–761.
  • Singh M, del Valle M. 2015. Arsenic Biosensors. In Handbook of Arsenic Toxicology, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 575–588, ISBN 978-0-12-418688-0.
  • Sinha K, Ghosh J, Sil PC. 2017. New pesticides: A cutting-edge view of contributions from nanotechnology for the development of sustainable agricultural pest control. In New Pesticides and Soil Sensors, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 47–79, ISBN 978-0-12-804299-1.
  • Sodano V, Gorgitano MT, Quaglietta M, Verneau F. 2016. Regulating food nanotechnologies in the European Union: Open issues and political challenges. Trends Food Sci. Technol., 54: 216–226.
  • Specht K, Siebert R, Hartmann I, et al. 2014. Urban agriculture of the future: An overview of sustainability aspects of food production in and on buildings. Agric. Hum. Values, 31: 33–51.
  • Stadler RH. 2016. Foreword for Food Processing—Derived Contaminants in Food Analysis. In Reference Module in Food Science, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, ISBN 978-0-08-100596-5.
  • Tabish SA. 2007. Is diabetes becoming the biggest epidemic of the twenty-first century? Int J. Health Sci. 1 (2), V–VIII.
  • Templier V, Roux A, Roupioz Y, Livache T. 2016. Ligands for label-free detection of whole bacteria on biosensors: A review. TrAC Trends Anal. Chem., 79: 71–79.
  • Thomas S, et al. 2015. The expression of retinoblastoma tumor suppressor protein in oral cancers and precancers: a clinicopathological study. Dent. Res. J., 12 (4): 307.
  • Tian L, Hires SA, Mao T, et al. 2009. Imaging neural activity in worms, flies and mice with improved GAaMP calcium indicators. Nat. Methods, 6: 875–881.
  • Turner AP. 2013. Biosensors: Sense and sensibility. Chem. Soc. Rev., 42: 3184–3196.
  • USEPA. Mercury Update: Impact of Fish Advisories, EPA Fact Sheet EPA-823-F-01-011, EPA, Office of Water: Washington, DC, USA, 2001.
  • Valastyan S, Weinberg RA. 2011. Tumor metastasis: molecular insights and evolving paradigms. Cell, 147 (2): 275–292.
  • Verma N, Kaur G. 2016. Trends on Biosensing Systems for Heavy Metal Detection. In Comprehensive Analytical Chemistry, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, Volume 74, pp. 33–71, ISBN 978-0-444-63579-2.
  • Vu T, Claret FX. 2012. Trastuzumab: updated mechanisms of action and resistance in breast cancer. Front. Oncol., 2: 62.
  • Way JC, Collins JJ, Keasling JD, Silver PA. 2014. Integrating biological redesign: Where synthetic biology came from and where it needs to go. Cell, 157: 151–161.
  • Weng X, Neethirajan S. 2017. Ensuring food safety: Quality monitoring using microfluidics. Trends Food Sci. Technol., 65: 10–22.
  • Xiao Y, Lubin AA, Heeger AJ, Plaxco KW. 2005. Label-free electronic detection of thrombin in blood serum by using an aptamer-based sensor. Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 44: 5456–5459.
  • Yildirim N, Long F, He M, Shi HC, Gu AZ. 2014. A portable optic fiber aptasensor for sensitive, specific and rapid detection of bisphenol-A in water samples. Environ. Sci. Process Impacts, 16: 1379–1386.
  • Yoshida K, Miki Y. 2004. Role of BRCA1 and BRCA2 as regulators of DNA repair, transcription, and cell cycle in response to DNA damage. Cancer Sci., 95 (11): 866–871.
  • Zhang D, Lu Y, Zhang Q, et al. 2015. Nanoplasmonic monitoring of odorants binding to olfactory proteins from honeybee as biosensor for chemical detection. Sens. Actuators B Chem., 221: 341–349.
  • Zhang F, Zhang Q, Zhang D, Lu Y, Liu Q, Wang P. 2014. Biosensor analysis of natural and artificial sweeteners in intact taste epithelium. Biosens. Bioelectron., 54: 385–392.
  • Zhang W, Asiri AM, Liu D, Du D, Lin Y. 2015. Nanomaterial-based biosensors for environmental and biological monitoring of organophosphorus pesticides and nerve agents. Trends Anal. Chem., 54: 1–10.
  • Adami A; Mortari A; Morganti E; Lorenzelli L. 2018. Microfluidic Sample Preparation Methods for the Analysis of Milk Contaminants. Available online: https://www.hindawi.com/journals/js/2016/2385267/
  • Al-Mawali A. 2015. Non-communicable diseases: shining a light on cardiovascular dis- ease, Oman’s biggest killer. Oman Med. J., 30 (4): 227.
  • Arduini F, Guidone S, Amine A, Palleschi G, Moscone D. 2013. Acetylcholinesterase biosensor based on self-assembled monolayer-modified gold-screen printed electrodes for organophosphorus insecticide detection. Sens. Actuators B Chem., 179: 201–208.
  • Arduini F, Cinti S, Scognamiglio V, Moscone D. 2016. Nanomaterials in electrochemical biosensors for pesticide detection: advances and challenges in food analysis. Microchim. Acta, 183: 2063–2083.
  • Arugula MA, Simonian AL. 2016. Biosensors for Detection of Genetically Modified Organisms in Food and Feed. In Genetically Modified Organisms in Food, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 97–110, ISBN 978-0-12-802259-7.
  • Ayari-Jeridi H. et al. 2015. Mutation spectrum of RB1 gene in unilateral retinoblastoma cases from Tunisia and correlations with clinical features. PLoS One, 10 (1): e0116615.
  • Bahadır EB, Sezgintürk MK. 2017. Biosensor technologies for analyses of food contaminants. In Nanobiosensors, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 289–337, ISBN 978-0-12-804301-1.
  • Baldwin CJ. 2015. Introduction to the Principles. In The 10 Principles of Food Industry Sustainability, John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, USA, pp. 1–14, ISBN 978-1-118-44769-7.
  • Beck MB, Walker VR. 2013. On water security, sustainability, and the water-food-energy-climate nexus. Front. Environ. Sci. Eng., 7: 626–639.
    Belkhamssa N, da Costa JP, Justino CIL, Santos PSM, Cardoso S, Duarte AC, Rocha-Santos T, Ksibi M. 2016. Development of an electrochemical biosensor for alkylphenol detection. Talanta, 158: 30–34.
  • Bhalla N. et al. 2016. Introduction to biosensors. Essays Biochem., 60 (1): 1–8.
  • Bohunicky B, Mousa SA. 2011. Biosensors: the new wave in cancer diagnosis. Nanotechnol. Sci. Appl., 4: 1.
  • Bourne MC. 2014. Food Security: Postharvest Losses. In Encyclopedia of Agriculture and Food Systems, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 338–351, ISBN 978-0-08-093139-5.
  • Bruen D et al. 2017. Glucose sensing for diabetes monitoring: recent developments. Sensors, 1866.
  • Burris KP, Stewart CN. 2012. Fluorescent nanoparticles: Sensing pathogens and toxins in foods and crops. Trends Food Sci. Technol., 28: 143–152.
    Byrne B et al. 2009. Antibody-based sensors: principles, problems and potential for detection of pathogens and associated toxins. Sensors, 9 (6): 4407–4445.
  • Cash KJ, Clark HA. 2010. Nanosensors and nanomaterials for monitoring glucose in diabetes. Trends Mol. Med., 16 (12): 584–593.
  • Chao R, Mishra S, Si T, Zhao H. 2017. Engineering biological systems using automated biofoundries. Metab. Eng., 42: 98–108.
  • Chen Y, Li H, Gao T, Zhang T, Xu L, Wang B, Wang J, Pei R. 2018. Selection of DNA aptamers for the development of light-up biosensor to detect Pb(II). Sens. Actuators B Chem., 254: 214–221.
  • Eissa S, Siaj M, Zourob M. 2015. Aptamer-based competitive electrochemical biosensor for brevetoxin-2. Biosens. Bioelectron., 69: 148–154.
  • Elmore S. 2007. Apoptosis: a review of programmed cell death. Toxicol. Pathol., 35 (4): 495–516.
  • Enrico DL, Manera MG, Montagna G, Cimaglia F, Chesa M, Poltronieri P, Santino A, Rella R. 2013. PR based immunosensor for detection of Legionella pneumophila in water samples. Opt. Commun., 294: 420–426.
  • EPA. National Recommended Water Quality Criteria—Aquatic Life Criteria Table. Available online: http://www.epa.gov/wqc/national-recommended-water-quality-criteria-aquatic-life-criteria-table
  • Fei A, Liu Q, Huan J, Qian J, Dong X, Qiu B, Mao H, Wang K. 2015. Label-free impedimetric aptasensor for detection of femtomole level acetamiprid using gold nanoparticles decorated multiwalled carbon nanotube-reduced graphene oxide nanoribbon composites. Biosens. Bioelectron., 70: 122–129.
  • Foudeh AM, Trigui H, Mendis N, Faucher SP, Veres T, Tabrizian M. 2015. Rapid and specific SPRi detection of L. pneumophila in complex environmental water samples. Anal. Bioanal. Chem., 407: 5541–5545.
  • Garnet TF. 2013. Food sustainability: Problems, perspectives and solutions. Proc. Nutr. Soc., 72: 29–39.
  • Gheorghe I, Czobor I, Lazar V, Chifiriuc MC 2017. Present and perspectives in pesticides biosensors development and contribution of nanotechnology. In New Pesticides and Soil Sensors, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 337–372, ISBN 978-0-12-804299-1.
  • Ghorashi M. 2018. Technology’s Role in Eradicating Foodborne Illness. Available online: https://www.foodsafetymagazine.com/signature-series/technologye28099s-role-in-eradicating-foodborne-illness/
  • Giacinti C, Giordano A. 2006. RB and cell cycle progression. Oncogene, 25 (38): 5220–5227.
  • Guo L, Li Z, Chen H, et al. 2017. Colorimetric biosensor for the assay of paraoxon in environmental water samples based on the iodine-starch color reaction. Anal. Chim. Acta, 967: 59–63.
  • Hameed I, et al. 2015. Type 2 diabetes mellitus: from a metabolic disorder to an inflammatory condition. World J. Diabetes, 6 (4): 598.
    Hassani S, Momtaz S, Vakhshiteh F, et al. 2017. Biosensors and their applications in detection of organophosphorus pesticides in the environment. Arch. Toxicol., 91: 109–130.
  • He MQ, Wang K, Wang J, Yu YL, He RH. 2017. A sensitive aptasensor based on molybdenum carbide nanotubes and label-free aptamer for detection of bisphenol A. Anal. Bioanal. Chem., 409: 1797–1803.
  • Holford TR et al. 2012. Recent trends in antibody based sensors. Biosens. Bioelectron., 34 (1): 12–24.
  • Hughes RA, Ellington AD. 2017. Synthetic DNA synthesis and assembly: Putting the synthetic in synthetic biology. Cold Spring Harb. Perspect. Biol., 9.
  • Husu I, Rodio G, Touloupakis E, et al. 2013. Insights into photo-electrochemical sensing of herbicides driven by Chlamydomonas reinhardtii cells. Sens. Actuators B Chem., 185: 321–330.
  • Jain KK. 2004. “Applications of biochips: from diagnostics to personalized medicine.” Curr Opin Drug Discov Devel, 7(3): 285-289.
  • Jiang D, Du X, Liu Q, Zhou L, Dai L, Qian J, Wang K. 2015. Silver nanoparticles anchored on nitrogen-doped graphene as a novel electrochemical biosensing platform with enhanced sensitivity for aptamer-based pesticide assay. Analyst, 140: 6404–6411.
  • Justino CIL, Freitas AC, Duarte AC, Santos TAPR. 2015. Sensors and biosensors for monitoring marine contaminants. Trends Environ. Anal. Chem., 6–7: 21–30.
  • Justino CIL, Freitas AC, Pereira R, Duarte AC, Rocha-Santos TAP. 2015. Recent developments in recognition elements for chemical sensors and biosensors. Trends Anal. Chem., 68: 2–17.
  • Kazemi-Darsanaki R et al. 2012. Biosensors: functions and applications. J. Biol. Today’s World, 2 (1): 20–23.
  • Khot LR, Sankaran S, Maja JM, Ehsani R, Schuster EW. 2012. Applications of nanomaterials in agricultural production and crop protection: A review. Crop Prot., 35: 64–70.
  • Kost GJ, Tran NK., 2005. Point-of-care testing and cardiac biomarkers: the standard of care and vision for chest pain centers. Cardiol. Clin., 23 (4): 467–490.
  • Lang Q, Han L, Hou C, Wang F, Liu A. 2016. A sensitive acetylcholinesterase biosensor based on gold nanorods modified electrode for detection of organophosphate pesticide. Talanta, 156: 34–41.
  • Lee EY, Muller WJ. 2010. Oncogenes and tumor suppressor genes. Cold Spring Harb. Perspect. Biol., 2 (10): a003236.
  • Li Z, Yu Y, Li Z, Wu T. 2015. A review of biosensing techniques for detection of trace carcinogen contamination in food products. Anal. Bioanal. Chem., 407: 2711–2726.
  • Liao W, Lu X. 2016. Determination of chemical hazards in foods using surface-enhanced Raman spectroscopy coupled with advanced separation techniques. Trends Food Sci. Technol., 54: 103–113.
  • Long F, Zhu A, Shi H, Wang H, Liu J. 2013. Rapid on-site/in-situ detection of heavy metal ions in environmental water using a structure-switching DNA optical biosensor. Sci. Rep., 3: 2308.
  • Loo C, et al. 2005. Immunotargetednanoshells for integrated cancer imaging and therapy. Nano Lett., 5 (4): 709–711.
  • Maduraiveeran G, Jin W. 2017. Nanomaterilas based electrochemical sensor and biosensor platforms for environmental applications. Trends Environ. Anal. Chem., 13: 10–23.
  • Marcellin E, Nielsen LK 2018. Advances in analytical tools for high throughput strain engineering. Curr. Opin. Biotechnol., 54: 33–40.
  • Martín-Timón I et al. 2014. Type 2 diabetes and cardiovascular disease: have all risk factors the same strength? World J. Diabetes, 5 (4): 444.
  • Mayorga-Martinez C, Pino F, Kurbanoglua S, et al. 2014. Iridium oxide nanoparticles induced dual catalytic/inhibition based detection of phenol and pesticide compounds. J. Mater. Chem. B, 2: 2233–2239.
  • McPartlin DA, Loftus JH, Crawley AS, et al. 2017. Biosensors for the monitoring of harmful algal blooms. Curr. Opin. Biotechnol., 45: 164–169.
  • Mehrotra P. 2016. Biosensors and their applications – a review. J. Oral. Biol. Craniofac Res., 6 (2): 153–159.
  • Meriç S, Çakır Ö, Turgut-Kara N, Arı S. 2014. Detection of genetically modified maize and soybean in feed samples. Genet. Mol. Res., 13: 1160–1168.
  • Moran KLM, Fitzgerald J, McPartlin DA, Loftus JH, O’Kennedy R. 2016. Biosensor-Based Technologies for the Detection of Pathogens and Toxins. In Comprehensive Analytical Chemistry, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, Volume 74, pp. 93–120, ISBN 978-0-444-63579-2.
  • Mungroo NA, Neethirajan S. 2014. Biosensors for the Detection of Antibiotics in Poultry Industry—A Review. Biosensors, 4: 472–493.
  • Ngoepe M et al. 2013. Integration of biosensors and drug delivery technologies for early detection and chronic management of illness. Sensors, 13 (6): 7680–7713.
  • Omidfar K. et al. 2013. New analytical applications of gold nanoparticles as label in antibody based sensors. Biosens. Bioelectron., 43: 336–347.
    Orozco J, Villa E, Manes C, Medlin LK, Guillebault D. 2016. Electrochemical RNA genosensors for toxic algal species: Enhancing selectivity and sensitivity. Talanta, 161: 560–566.
  • Patra S, Roy E, Madhuri R, Sharma PK. 2017. A technique comes to life for security of life: The food contaminant sensors. In Nanobiosensors, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 713–772, ISBN 978-0-12-804301-1.
  • Pola-López LA, Camas-Anzueto JL, Martínez-Antonio A, et al. 2018. Novel arsenic biosensor “POLA” obtained by a genetically modified E. coli bioreporter cell. Sens. Actuators B Chem., 254: 1061–1068.
  • Ragavan KV, Selvakumar LS, Thakur MS. 2013. Functionalized aptamers as nano-bioprobes for ultrasensitive detection of bisphenol-A. Chem. Commun., 49: 5960–5962.
  • Rapini R, Marrazza G. 2016. Biosensor Potential in Pesticide Monitoring. In Comprehensive Analytical Chemistry, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, Volume 74, pp. 3–31, ISBN 978-0-444-63579-2.
  • Ravikumar A, Panneerselvam P, Radhakrishnan K, et al. 2017. DNAzyme based amplified biosensor on ultrasensitive fluorescence detection of Pb(II) ions from aqueous system. J. Fluoresc., 27: 2101–2109.
  • Rocchitta G, et al. 2016. Enzyme biosensors for biomedical applications: strategies for safeguarding analytical performances in biological fluids. Sensors, 16 (6).
  • Rotariu L, Lagarde F, Jaffrezic-Renault N, Bala C. 2016. Electrochemical biosensors for fast detection of food contaminants—Trends and perspective. TrAC Trends Anal. Chem., 79: 80–87.
  • Saucedo NM, Mulchandan A. 2016. Sensing of Biological Contaminants. In Comprehensive Analytical Chemistry, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, Volume 74, pp. 73–91, ISBN 978-0-444-63579-2.
  • Shi H, Zhao G, Liu M, Fan L, Cao T. 2013. Aptamer-based colorimetric sensing of acetamiprid in soil samples: Sensitivity, selectivity and mechanism. J. Hazard. Mater., 260: 754–761.
  • Singh M, del Valle M. 2015. Arsenic Biosensors. In Handbook of Arsenic Toxicology, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 575–588, ISBN 978-0-12-418688-0.
  • Sinha K, Ghosh J, Sil PC. 2017. New pesticides: A cutting-edge view of contributions from nanotechnology for the development of sustainable agricultural pest control. In New Pesticides and Soil Sensors, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, pp. 47–79, ISBN 978-0-12-804299-1.
  • Sodano V, Gorgitano MT, Quaglietta M, Verneau F. 2016. Regulating food nanotechnologies in the European Union: Open issues and political challenges. Trends Food Sci. Technol., 54: 216–226.
  • Specht K, Siebert R, Hartmann I, et al. 2014. Urban agriculture of the future: An overview of sustainability aspects of food production in and on buildings. Agric. Hum. Values, 31: 33–51.
  • Stadler RH. 2016. Foreword for Food Processing—Derived Contaminants in Food Analysis. In Reference Module in Food Science, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, ISBN 978-0-08-100596-5.
  • Tabish SA. 2007. Is diabetes becoming the biggest epidemic of the twenty-first century? Int J. Health Sci. 1 (2), V–VIII.
  • Templier V, Roux A, Roupioz Y, Livache T. 2016. Ligands for label-free detection of whole bacteria on biosensors: A review. TrAC Trends Anal. Chem., 79: 71–79.
  • Thomas S, et al. 2015. The expression of retinoblastoma tumor suppressor protein in oral cancers and precancers: a clinicopathological study. Dent. Res. J., 12 (4): 307.
  • Tian L, Hires SA, Mao T, et al. 2009. Imaging neural activity in worms, flies and mice with improved GAaMP calcium indicators. Nat. Methods, 6: 875–881.
  • Turner AP. 2013. Biosensors: Sense and sensibility. Chem. Soc. Rev., 42: 3184–3196.
  • USEPA. Mercury Update: Impact of Fish Advisories, EPA Fact Sheet EPA-823-F-01-011, EPA, Office of Water: Washington, DC, USA, 2001.
  • Valastyan S, Weinberg RA. 2011. Tumor metastasis: molecular insights and evolving paradigms. Cell, 147 (2): 275–292.
  • Verma N, Kaur G. 2016. Trends on Biosensing Systems for Heavy Metal Detection. In Comprehensive Analytical Chemistry, Elsevier: Amsterdam, The Netherlands, Volume 74, pp. 33–71, ISBN 978-0-444-63579-2.
  • Vu T, Claret FX. 2012. Trastuzumab: updated mechanisms of action and resistance in breast cancer. Front. Oncol., 2: 62.
  • Way JC, Collins JJ, Keasling JD, Silver PA. 2014. Integrating biological redesign: Where synthetic biology came from and where it needs to go. Cell, 157: 151–161.
  • Weng X, Neethirajan S. 2017. Ensuring food safety: Quality monitoring using microfluidics. Trends Food Sci. Technol., 65: 10–22.
  • Xiao Y, Lubin AA, Heeger AJ, Plaxco KW. 2005. Label-free electronic detection of thrombin in blood serum by using an aptamer-based sensor. Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 44: 5456–5459.
  • Yildirim N, Long F, He M, Shi HC, Gu AZ. 2014. A portable optic fiber aptasensor for sensitive, specific and rapid detection of bisphenol-A in water samples. Environ. Sci. Process Impacts, 16: 1379–1386.
  • Yoshida K, Miki Y. 2004. Role of BRCA1 and BRCA2 as regulators of DNA repair, transcription, and cell cycle in response to DNA damage. Cancer Sci., 95 (11): 866–871.
  • Zhang D, Lu Y, Zhang Q, et al. 2015. Nanoplasmonic monitoring of odorants binding to olfactory proteins from honeybee as biosensor for chemical detection. Sens. Actuators B Chem., 221: 341–349.
  • Zhang F, Zhang Q, Zhang D, Lu Y, Liu Q, Wang P. 2014. Biosensor analysis of natural and artificial sweeteners in intact taste epithelium. Biosens. Bioelectron., 54: 385–392.
  • Zhang W, Asiri AM, Liu D, Du D, Lin Y. 2015. Nanomaterial-based biosensors for environmental and biological monitoring of organophosphorus pesticides and nerve agents. Trends Anal. Chem., 54: 1–10.

Κοινωνική και πολιτική αποδοχή των σύγχρονων εργαλείων βιοτεχνολογίας

ΑΡΧΑΡΙΟ ΕΠΙΠΕΔΟ

Η βιοτεχνολογία είναι μια σύγχρονη προηγμένη τεχνολογία βασισμένη σε επιστημονικούς κλάδους όπως η μοριακή βιολογία, η βιοχημεία, η βιολογία των κυττάρων.

Περιεχόμενα

 

Μοντέρνα βιοτεχνολογία με μια ματιά

Η βιοτεχνολογία είναι μια σύγχρονη προηγμένη τεχνολογία βασισμένη σε επιστημονικούς κλάδους όπως η μοριακή βιολογία, η βιοχημεία, η βιολογία των κυττάρων. Δέχεται πολλές νέες τεχνικές, όπως καλλιέργεια κυττάρων και ιστών, σύντηξη κυττάρων, ανασυνδυασμός γονιδίων, μικροβιακή ζύμωση, καθώς και αντιγραφή και ανασυνδυασμός οργανισμών σε κυτταρικό, χρωμοσωμικό και γονιδιακό επίπεδο. Με αυτόν τον τρόπο, μπορεί να κάνει τους οργανισμούς να ανταποκρίνονται στις ανθρώπινες ανάγκες, να παράγουν νέα προϊόντα και να αναπαράγουν νέα φυτά με νέα χαρακτηριστικά υψηλής απόδοσης και αντοχής στο στρες. Η σύγχρονη βιοτεχνολογία αποτελείται από τέσσερα τεχνολογικά συστήματα. Είναι μηχανική γενετικής, κυττάρων, ενζύμων και ζύμωσης, εκ των οποίων η γενετική μηχανική και η κυτταρική μηχανική είναι οι πιο προηγμένες.

Εκτός από τα μεγάλα κοινωνικά και οικονομικά οφέλη της σύγχρονης βιοτεχνολογίας, υπάρχει πιθανότητα να βλάψει την ανθρώπινη υγεία και το περιβάλλον. Αυτό μπορεί να οδηγήσει σε πολλά κοινωνικοοικονομικά προβλήματα, όπως καταστροφή των πρωτότυπων κοινωνικών και οικονομικών προτύπων, απειλή για τη βιοποικιλότητα και τις παραδοσιακές ποικιλίες καλλιεργειών, τραυματισμό της κοινωνικοοικονομικής ευημερίας χωρών ή κοινοτήτων, παραβίαση των παραδοσιακών ηθικών, ηθικών και θρησκευτικών αξιών.

Η σύγχρονη βιοτεχνολογική πρακτική στην παραγωγή ινών, φαρμάκων και τροφίμων έχει μια ισχυρή ανάπτυξη στα τέλη του 20ου και στις αρχές του 21ου αιώνα. Αυτή η αναδυόμενη τεχνολογία είναι συχνά αποδεκτή ως η επόμενη τεχνολογική επανάσταση που έχει τη δυνατότητα να αλλάξει ριζικά τον τρόπο κοινωνικής διευθέτησης σχετικά με την παραγωγή και τη διανομή αγαθών. Έχουν ήδη πραγματοποιηθεί σημαντικές επενδύσεις στη βιοτεχνολογική έρευνα για την ανάπτυξη νέων προϊόντων. Επί του παρόντος, η επιστήμη και η τεχνολογία αναμένεται να φέρουν στους καταναλωτές μια μεγάλη ποικιλία γενετικά τροποποιημένων προϊόντων (ΓΤ). Εξάλλου, πολλά ΓΤ προϊόντα έχουν ήδη μπει στις αλυσίδες διανομής τροφίμων. Παρά την υπόσχεσή της να αποφέρει σημαντικά οφέλη στην κοινωνία, η δημόσια αποδοχή της σύγχρονης βιοτεχνολογίας είναι αρκετά διαφορετική στην παγκόσμια διάσταση. Για να μπορέσει η βιοτεχνολογία να συμβάλει σημαντικά οφέλη για τον άνθρωπο, η διεθνής κοινωνία έχει δώσει σοβαρή προσοχή στη βιοασφάλεια της συνολικής βιοτεχνολογικής παραγωγής για να προωθήσει την καλύτερη αποδοχή της.

Πρακτικές εφαρμογές της σύγχρονης βιοτεχνολογίας

Σήμερα, η βιοτεχνολογία έχει ταξινομηθεί σε λίγες κατηγορίες με βάση τις εφαρμογές της. Φαίνονται στην Εικόνα. 1.

Κοινωνική στάση στη σύγχρονη βιοτεχνολογία

Γενικά, η βιοτεχνολογία σκοπεύει να δώσει έμφαση στα πιθανά οφέλη για την κοινωνία μέσω της μείωσης της πείνας και του υποσιτισμού, της αναστολής και της επούλωσης ασθενειών και της αύξησης της υγείας και της γενικής ευημερίας. Από την άλλη πλευρά, υπάρχει η άποψη ότι τα προϊόντα ΓΤ χρησιμοποιούνται ως άσκοπη παρέμβαση στη φύση και μπορούν να προκαλέσουν άγνωστες και δυνητικά καταστροφικές συνέπειες. Ταυτόχρονα στις ΗΠΑ, οι γενετικά τροποποιημένες καλλιέργειες εισήλθαν στις αλυσίδες εφοδιασμού σιτηρών χωρίς να προκαλέσουν μεγάλη ανησυχία στο κοινό. Εξάλλου, η γεωργική βιοτεχνολογία αντιμετωπίζει σημαντική αντίθεση στην Ευρώπη και σε πολλές άλλες ανεπτυγμένες χώρες. Όσον αφορά τα προφανή προβλήματα του κοινού σχετικά με τους αντιληπτούς κινδύνους για τον άνθρωπο και το περιβάλλον, η Ευρωπαϊκή Ένωση (ΕΕ) δέχτηκε μάλλον περιορισμένους κανονισμούς για όλες τις διαγονιδιακές καλλιέργειες σε οποιοδήποτε μέρος του τροφικού συστήματος της ΕΕ. Σε παγκόσμιο επίπεδο, η κατάσταση είναι ακόμη πιο διαφορετική: στο Ηνωμένο Βασίλειο, οι κινήσεις αντίρρησης ρίχνουν τις γενετικά τροποποιημένες καλλιέργειες σε διαφορετικές περιπτώσεις. Μέχρι πρόσφατα, η Βραζιλία και η Ινδία αρνούνταν να εγκρίνουν οποιαδήποτε ΓΤ καλλιέργεια. Λόγω παρόμοιων ανησυχιών των καταναλωτών, ορισμένες αλυσίδες εφοδιασμού γρήγορου φαγητού αποφάσισαν να μην χρησιμοποιήσουν ΓΤ πατάτα στα προϊόντα τους.
Ο λόγος για τη χρήση των γονιδιακών τεχνολογιών στη γεωργική παραγωγή βασίζεται στο γεγονός ότι ορισμένοι άνθρωποι και ιδρύματα αντιμετωπίζουν κινδύνους για τον άνθρωπο και το περιβάλλον, ενώ άλλοι αντιτίθενται σε αυτό με γνώμονα τις ηθικές, ηθικές και κοινωνικές ανησυχίες. Η βιοτεχνολογία συχνά υποβαθμίζεται λόγω της εφαρμογής των εργαλείων της σε φυτά και ζώα, ιδίως στη μεταφορά γονιδίων σε είδη, με βάση την κατανόηση των «χώρων του Θεού» και ενάντια στον «νόμο της φύσης». Επίσης, υπάρχει η άποψη ότι δεδομένου ότι τα γονίδια είναι φυσικά απαντώμενα μέρη, τα οποία αποτελούν αντικείμενο ανακάλυψης (όχι εφεύρεσης), η κατοχή διπλώματος ευρεσιτεχνίας για γενετικά ευρήματα και διαδικασίες είναι ηθικά και ηθικά αφερέγγυα.
Οι δημόσιες συζητήσεις για τη γεωργική βιοτεχνολογία θέτουν επίσης ορισμένες κοινωνικές και πολιτικές συζητήσεις. Γίνεται λόγος για την εφαρμογή σύγχρονων γενετικών τεχνολογιών στην παραγωγή προϊόντων σε ανεπτυγμένες χώρες που εισάγονται επί του παρόντος σε αναπτυσσόμενες χώρες. Ισχυρίζεται ότι τέτοιες εξελίξεις θα έχουν σημαντικές αρνητικές επιπτώσεις στην κατάσταση της φτώχειας στον Τρίτο κόσμο και θα οδηγήσουν σε παγκόσμια αστάθεια. Ταυτόχρονα, άλλοι ερευνητές έχουν αντίθετη άποψη. Μια άλλη πηγή φροντίδας είναι η πιθανότητα οι αγρότες να εξαρτώνται σταθερά από τις πολυεθνικές εταιρείες για τα “μέσα παραγωγής” τους, επιφέροντας επιβλαβείς οικονομικές, κοινωνικές και πολιτικές επιπτώσεις.
Η σημασία αυτού του θέματος καθορίζει την ανάγκη για πλήρη κατανόηση των δημόσιων συμφερόντων και προβληματισμών σχετικά με τη συμφωνία μεταξύ ιδιωτικών και δημόσιων αποφάσεων σχετικά με τη βιοτεχνολογία τροφίμων. Η αποδοχή από τους καταναλωτές της βιοτεχνολογίας συνδέεται στενά όχι μόνο με τους αναμενόμενους κινδύνους και οφέλη που σχετίζονται με τα ΓΤ προϊόντα αλλά και με την ηθική και ηθική τους διάσταση. Επιπλέον, οι απόψεις του κοινού σχετικά με τις πολυεθνικές εταιρείες, η εμπιστοσύνη στην κυβέρνηση, η επιστήμη και η τεχνολογική ανάπτυξη αποκαλύπτουν επίσης τη στάση τους απέναντι στη βιοτεχνολογία. Διαπιστώθηκε ότι οι γνωστικοί παράγοντες των καταναλωτών (π. Έτσι, οι δημόσιες αντιλήψεις για τη βιοτεχνολογία έχουν πολλές διαστάσεις και πιθανώς επηρεάζονται από πολλαπλές δυνάμεις, προτιμήσεις και γεγονότα. Για παράδειγμα, τα θετικά οφέλη (π.χ. διατροφικά οφέλη από βελτιωμένα/νέα προϊόντα, περιβαλλοντικά οφέλη μέσω μειωμένης χρήσης φυτοφαρμάκων κ.λπ.) μπορούν να ενθαρρύνουν την αποδοχή της βιοτεχνολογίας τροφίμων από τους καταναλωτές. Από την άλλη πλευρά, η ευαισθησία σχετικά με τους κινδύνους για τον άνθρωπο και το περιβάλλον αναμένεται να έχει δυσμενείς επιπτώσεις στην αποδοχή από το κοινό των ΓΤ προϊόντων. Έτσι, οι δραστηριότητες για την ανάλυση και τον προσδιορισμό των παραγόντων που επηρεάζουν τη στάση των καταναλωτών απέναντι στη βιοτεχνολογία πρέπει να ακολουθήσουν τη διαδικασία, που υποδεικνύεται στην Εικόνα 2.

Κοινωνικός αντίκτυπος

Για να αξιολογηθεί ο αντίκτυπος της σύγχρονης βιοτεχνολογίας στην κοινωνία, δεν αρκεί μόνο η μέτρησή της με συγκεκριμένους δείκτες. Όταν εστιάζεται σε τέτοιες διαστάσεις όπως η αύξηση του αριθμού διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας σε γενετικά τροποποιημένους οργανισμούς (ΓΤΟ), αυτό δεν θα υποδεικνύει τις δυναμικές δυνάμεις που διαμορφώνουν τον αντίκτυπο της βιοτεχνολογίας στις βιομηχανικές και κοινωνικές δομές. Η ανάλυση επιπτώσεων συνδυάζει πολύπλοκα προβλήματα και έχει ποικίλες διαφορετικές εισροές, οι οποίες έχουν τόσο βραχυπρόθεσμες όσο και μακροπρόθεσμες επιπτώσεις και επηρεάζουν τα αποτελέσματα του προβλήματος ή της χρήσης της τεχνολογίας, με τρόπο που δεν σέβεται. Η συνειδητοποίηση της αίσθησης σχετικά με τη φύση των δεσμών μεταξύ κοινωνιών, ατόμων και την ισορροπία δυνάμεων μεταξύ κοινωνικών ομάδων που αντιμετωπίζουν νέες τεχνολογίες είναι βασικής σημασίας.

Εδραίωση και διάδοση της γνώσης

Ένα σημείο εκκίνησης είναι το αποτέλεσμα του τεχνολογικού αντίκτυπου, το οποίο εξαρτάται από την καθιέρωση και τη διάδοση της γνώσης. Θεωρείται ως προτιμώμενες αξίες, κοινωνικές πρακτικές και πρότυπα συμπεριφοράς των εμπλεκόμενων παραγόντων στην ανάπτυξη και χρήση της βιοτεχνολογίας. Η γνώση εκτείνεται πέρα ​​από τη συλλογή πληροφοριών για τη βιοτεχνολογία, όπως τεχνικές, κινδύνους κλπ. Αγκαλιάζει επίσης τον τρόπο εμφάνισης και σχολιασμού τους από άτομα. Ο κίνδυνος και η ασφάλεια για το κοινό δεν μπορούν να εκτιμηθούν με τον ίδιο τρόπο που γίνεται ο επιστημονικός κίνδυνος. Για να ληφθούν υπόψη αυτές οι διαφορές, είναι απαραίτητο να εξηγηθεί πώς δημιουργείται εμπιστοσύνη μεταξύ καταναλωτών και κατασκευαστών. Εν ολίγοις, ένας τέτοιος ορισμός της γνώσης δίνει μια ανάλυση σχετικά με τον αντίκτυπο της βιοτεχνολογίας και ευρύτερα, τις περιβαλλοντικές πολιτικές και πρακτικές.

Από εννοιολογική άποψη, αυτή η προσέγγιση θα μπορούσε να αντιμετωπιστεί ως λόγος βασισμένος στη γνώση. Είναι χρήσιμο λαμβάνοντας υπόψη την έκφραση του βιοτεχνολογικού αντίκτυπου με την έννοια του εκπαιδευτικού, κοινωνικού και πολιτικού υπόβαθρου. Λαμβάνονται επίσης υπόψη οι περιβαλλοντικοί λόγοι της γνώσης της βιοτεχνολογίας, και πιο συγκεκριμένα, πώς κατασκευάζεται, γίνεται αποδεκτή και ίσως το πιο σημαντικό, διαδίδεται και διατηρείται μέσα στην κοινωνία.

Επιστήμη και Τεχνολογία (S&T) αντίκτυπο στην κοινωνία

Στην ΕΕ γίνεται συζήτηση για τη βιοτεχνολογία και ιδιαίτερα για τη γενετική μηχανική και τις επιπτώσεις που προκύπτουν από αυτήν την τεχνολογία. Αυτό το ζήτημα πρέπει να αντιμετωπιστεί στενά συνδεδεμένο με το αποτέλεσμα των κοινωνικών αλληλεπιδράσεων. Επομένως, ο τρόπος υλοποίησης αυτών των δυναμικών δυνάμεων θα πρέπει να λαμβάνει υπόψη τις αλληλεπιδράσεις και τη μορφή της προκύπτουσας πολυπλοκότητας μεταξύ των φορέων.

Ένα άλλο σημείο που πρέπει να εκτιμηθούν, είναι δύο βασικά θέματα κατά την εξέταση των πιθανών επιπτώσεων της τεχνολογίας. Αυτοί είναι i) ο άμεσος αντίκτυπος της χρήσης και ανάπτυξης της τεχνολογίας και ii) οι υπερβαίνοντες κίνδυνοι της τεχνολογίας. Αυτό σημαίνει εξάρτηση από τη μακροπρόθεσμη εφαρμογή της τεχνολογίας και τον τρόπο επίτευξης και διατήρησης μιας κυρίαρχης θέσης στον αντίκτυπό της στην κοινωνία από εκπαιδευτική, πολιτική και κοινωνική σκοπιά. Αυτό θα μπορούσε να διατηρηθεί γενικά μέσω περισσότερης ανησυχίας για τις μακροπρόθεσμες συνέπειες των δραστηριοτήτων Ε & Τ που αναφέρονται παρακάτω:

– Δημοσίευση εκπαιδευτικών προσπαθειών στην κοινωνία: Εκτέλεση εντατικών προσπαθειών για να συμπεριληφθούν επιστήμονες, βασικοί ηγέτες της κοινής γνώμης και μέσα ενημέρωσης σε μια υπάρχουσα συζήτηση για τη βιοτεχνολογία και ιδιαίτερα για τη γενετική μηχανική. Ο βασικός στόχος είναι να αποφευχθεί ένα κενό πληροφοριών, το οποίο μπορεί να διευκολύνει την αντι-βιοτεχνολογική δραστηριότητα και να δημιουργήσει αρνητισμό στις δομές της γνώσης.

– Ρόλος της ρυθμιστικής πολιτικής στην κοινωνία: Εστίαση στην αποτελεσματική επικοινωνία κινδύνου και κατανόηση του γεγονότος ότι η αντίληψη του κοινού για τον κίνδυνο μπορεί να είναι πολύ διαφορετική από αυτή της επιστημονικής κοινότητας.

Αντίληψη σύγχρονων εφαρμογών βιοτεχνολογίας

Τρία βασικά θέματα προσδιορίζονται και βασίζονται γύρω από: i) την επιστήμη, την ηθική και το φύλο της βιοτεχνολογίας ii) τη διεθνή πολιτική οικονομία, το εμπόριο και το περιβάλλον · iii) η ασφάλεια του κράτους και του συστήματος και ο πόλεμος μέσω της βιοτεχνολογίας. Αυτά τα γενικά θέματα προέρχονται από τις διεθνείς σχέσεις της βιοτεχνολογίας. Υπονοούν την έννοια της ισχύος στη Διεθνή Πολιτική Οικονομία (IPE) για να πλαισιώσουν τους διαφορετικούς λόγους και τα πολύπλοκα ζητήματα των επιπτώσεων της τεχνολογίας. Με βάση αυτά τα θέματα λαμβάνονται υπόψη οι διάφοροι δείκτες (Εικ. 3):

Η σύγχρονη βιοτεχνολογία θεωρείται ως ένα σύνθετο αναδυόμενο πεδίο που παρουσιάζει υψηλή επιστήμη σε συνδυασμό με περιορισμένη γνώση μέρους της κοινωνίας. Συνδέεται με τη στάση απέναντι στο φυσικό περιβάλλον, την τεχνολογική πρόοδο, τις θρησκευτικές και ηθικές πεποιθήσεις και πολλά άλλα σύνολα. Ένας πίνακας μεταβλητών, συμπεριλαμβανομένου του ενδιαφέροντος των δημόσιων τομέων, όπως η επιστήμη και η πολιτική, η αισιοδοξία για τις τεχνολογίες, οι κοινωνικές και πολιτιστικές αξίες, η ενασχόληση με το ζήτημα της βιοτεχνολογίας και η εμπιστοσύνη στη βιομηχανία, οι κανονισμοί και άλλες ομάδες της κοινωνίας των πολιτών, όλοι αυτοί οι παράγοντες συμβάλλουν για την εκπροσώπηση και τη γνώμη του κοινού σχετικά με τις βιοτεχνολογίες (Εικ. 4). Βασικά χαρακτηριστικά όπως το φύλο, η εκπαίδευση, η ηλικία και η θρησκεία έχουν βρεθεί ότι επηρεάζουν και τη στάση των ανθρώπων.

Η σοβαρή συζήτηση σχετικά με την αποδοχή της γενετικής μηχανικής συνοδεύεται από πολλά στοιχεία που αντιτίθενται στην εστίαση σε συγκεκριμένες εφαρμογές της τεχνολογίας από τη γενετική μηχανική καθαυτή. Μελέτες δείχνουν ότι οι στάσεις των καταναλωτών σχετικά με τη μεταφορά γονιδίων επηρεάζονται από τον τύπο των μεταφορών. Το εύρος αποδοχής περιλαμβάνει τα ακόλουθα: i) μεταφορές γονιδίων από φυτό σε φυτό. ii) μεταφορά ζώου σε ζώο · iii) ζώο-φυτό ή άνθρωπος-ζώο, το τελευταίο είναι το λιγότερο αποδεκτό.

Μια έρευνα σχετικά με την αντίληψη για τις σύγχρονες εφαρμογές βιοτεχνολογίας, που πραγματοποιήθηκε μεταξύ ανθρώπων από διαφορετικές χώρες/ηπείρους, έδειξε ότι οι ιατρικές εφαρμογές (που οδηγούν στην ανάπτυξη φαρμάκων και εμβολίων και γενετικές δοκιμές) είναι πολύ αποδεκτές σε σύγκριση με εφαρμογές βιοτεχνολογίας τροφίμων ή καλλιεργειών. Ωστόσο, οι ιατρικές εφαρμογές που σχετίζονται με ξενομεταμόσχευση ή κλωνοποίηση ζώων για την παραγωγή γάλακτος αντιμετωπίζουν σοβαρά προβλήματα. Οι Ασιάτες, για παράδειγμα, είναι λιγότερο προβληματισμένοι για τα ιατρικά γενετικά τροποποιημένα προϊόντα παρά για τα γενετικά τροποποιημένα τρόφιμα. Η έρευνα σχετικά με την κλωνοποίηση ανθρώπινων κυττάρων και τη βιοεξυγίανση μεταξύ των Ευρωπαίων βρίσκεται στο ενδιάμεσο επίπεδο, λιγότερο υποθετική από τη γενετική εξέταση, αλλά καλύτερα αποδεκτή από τις γενετικά τροποποιημένες καλλιέργειες και τρόφιμα.

Μια άλλη έρευνα ανέφερε ότι οι γενετικές δοκιμές εξακολουθούν να έχουν τη μεγαλύτερη υποστήριξη στον ευρωπαϊκό πληθυσμό, ακολουθούμενη από κλωνοποίηση ανθρώπινων κυττάρων, παραγωγή γενετικά τροποποιημένων ενζύμων για φιλικά προς το περιβάλλον σαπούνια και ξενομεταμόσχευση. Στο κάτω μέρος αυτής της σειράς τοποθετούνται γενετικά τροποποιημένες καλλιέργειες και τρόφιμα. Επίσης, παρέχεται υψηλότερη υποστήριξη στις τεχνικές για τον χειρισμό των βακτηρίων για τον καθαρισμό των πετρελαιοκηλίδων που ακολουθούνται από ανθεκτικές στις ασθένειες καλλιέργειες. στη συνέχεια, οι αιτήσεις για κρέας με λίπος και καλύτερη γεύση ντομάτας και η λιγότερη υποστήριξη λαμβάνουν τεχνολογίες για την ενίσχυση της παραγωγής γάλακτος στις αγελάδες.

Οι Μαλαισιανοί καταναλωτές είναι πιο ανοιχτοί στη χρήση σύγχρονων εφαρμογών βιοτεχνολογίας, οι οποίες δεν περιλαμβάνουν μεταφορά γονιδίων μεταξύ ειδών, όπως η παραγωγή τροφίμων και οι γενετικά τροποποιημένες καλλιέργειες που περιλαμβάνουν μόνο τη μεταφορά φυτικών γονιδίων. Για αυτούς, οι γονιδιακές τροποποιήσεις είναι πιο αποδεκτές με την ακόλουθη σειρά: i) μεταφορά γονιδίων φοινικέλαιου για να μειωθεί η περιεκτικότητα σε λιπαρά (κορεσμένο), ii) μεταφορά ανθρώπινων γονιδίων σε βακτήρια για παραγωγή ινσουλίνης, iii) μεταφορά γονιδίων βακτηρίων σε σόγια για την παραγωγή του ανθεκτικά στα ζιζανιοκτόνα.

Η στάση ενός ατόμου απέναντι σε μια νέα τεχνολογία εξαρτάται από διάφορους συναφείς παράγοντες, όπως η αντίληψή του/της για τους κινδύνους και τα οφέλη της, καθώς και οι κοινωνικά επικοινωνούμενες αξίες και οι καταπιστεύσεις σε ιδρύματα που εκπροσωπούν αυτές τις τεχνολογίες. Όσον αφορά την αντίληψη του κοινού για τη βιοτεχνολογία, εικάζεται ότι η στάση απέναντι στη γενετική μηχανική καθορίζεται από την αξία των δυνητικών πλεονεκτημάτων που προσφέρονται, τη γνώση για τη γενετική μηχανική και την επιστημονική κοσμοθεωρία, από την οποία ο αντιληπτός κίνδυνος (ορθολογικές ανησυχίες) και τα άγχη ή οι φόβοι ( παράλογες ανησυχίες) πρέπει να αποκλειστούν. Επιπλέον, πρέπει να προστεθούν διάφοροι δευτερεύοντες παράγοντες, όπως παραγοντικοί παράγοντες. Θεωρείται ότι η κύρια επίδραση στην αποδοχή φαίνεται να βασίζεται στο επίπεδο γνώσης, την επίγνωση των οφελών, την εμπιστοσύνη και την εμπιστοσύνη.

Οι μελέτες της στάσης του κοινού απέναντι στη βιοτεχνολογία υποδεικνύουν πολλές ομοιότητες με τις μελέτες αντίληψης κινδύνου. Ορισμένοι συγγραφείς έχουν χρησιμοποιήσει την ψυχομετρική προσέγγιση που βασίζεται στη γνωστική ψυχολογία και είναι αποδεκτή ως το πιο ώριμο και κυρίαρχο παράδειγμα στις μελέτες αντίληψης κινδύνου. Αυτές οι ψυχομετρικές μέθοδοι διευθετούνται με βάση τις ακόλουθες απόψεις:

– Εκτέλεση «κινδύνου» ως υποκειμενικής ιδέας και όχι αντικειμενικής.

– Συμμετοχή τεχνικών/φυσικών και κοινωνικών/ψυχολογικών προοπτικών σε κριτήρια κινδύνου.

– Να λαμβάνει γνώμες του «κοινού» (δηλαδή των λαϊκών, όχι των ειδικών) ως αντικείμενο ενδιαφέροντος.

Έτσι, η δημόσια αποδοχή της σύγχρονης βιοτεχνολογίας βασίζεται στην ανάλυση της γνωστικής δομής των κρίσεων κινδύνου, συνήθως χρησιμοποιώντας πολυμεταβλητές στατιστικές διαδικασίες όπως η ανάλυση παραγόντων, η πολυδιάστατη κλιμάκωση και η πολλαπλή παλινδρόμηση. Αυτή η ψυχομετρική προσέγγιση προϋποθέτει ότι το κοινό δεν αντιλαμβάνεται τον τεχνολογικό κίνδυνο λόγω μιας μόνο διάστασης που συνδέεται με αναμενόμενους τραυματισμούς ή θανάτους κοντά στην άποψη του εκτιμητή κινδύνου, αλλά ερμηνεύει τον κίνδυνο ως μια πολυδιάστατη έννοια, που αφορά ευρύτερες ποιοτικές διαστάσεις.

Οι βασικές ποικιλίες μιας μελέτης αντίληψης κινδύνου είναι το αντιληπτό μέγεθος κινδύνου ή τρόμου, η αποδοχή του κινδύνου, η εξοικείωση με τον κίνδυνο και τουλάχιστον – το όφελος του παράγοντα. Η σημασία μιας άλλης διάστασης, της «παρέμβασης στη φύση» στις μελέτες αντίληψης κινδύνου για τη γενετική μηχανική είναι επίσης πολύ σημαντική.

Η βιοτεχνολογία βρίσκεται στη συμβολή της επιστήμης και της ηθικής. Η ανάπτυξη της τεχνολογίας συνδέεται με ένα ηθικό όραμα, το οποίο με τη σειρά του διαμορφώνεται από συγκεκριμένα ζητήματα. Φορτία βιοτεχνολογίας μπορούν να αξιολογηθούν προς όφελος τους για την ανθρώπινη κοινωνία. Αλλά πρέπει να ληφθεί υπόψη ότι η βιοτεχνολογία έχει επίσης ένα επικίνδυνο μέρος. Μπορεί να προκαλέσει απρόβλεπτες συνέπειες, οι οποίες μπορούν να προκαλέσουν βλαβερές συνέπειες ή να εξανθρωπίσουν τους ανθρώπους. Επομένως, τα ηθικά ζητήματα των προτεινόμενων αποτελεσμάτων πρέπει να διερευνηθούν προσεκτικά.

Η ηθική αξιολόγηση των νέων τεχνολογιών, συμπεριλαμβανομένης της βιοτεχνολογίας, απαιτεί διαφορετική προσέγγιση της ηθικής. Υπάρχει ανάγκη για αλλαγές επειδή μια νέα τεχνολογία μπορεί να έχει βαθύτερο αντίκτυπο στον κόσμο λόγω i) περιορισμών σε μια προσέγγιση ηθικής που βασίζεται στα δικαιώματα. ii) τη σημασία και τη δυσκολία πρόβλεψης των συνεπειών · iii) ευκαιρία τώρα να χειραγωγήσουμε τους ίδιους τους ανθρώπους.

Τα ηθικά ζητήματα που αφορούν τη βιοτεχνολογία είναι πολύ διαφορετικά. Λόγω της πιθανότητας βαθιάς αλλαγής στο ανθρώπινο μέλλον, τέτοιες ερωτήσεις πρέπει να εξεταστούν προσεκτικά. Πρώτον, είναι απαραίτητο να διατυπωθούν και να προβλεφθούν οι ευθύνες απέναντι στη φύση και τις άλλες, συμπεριλαμβανομένων των μελλοντικών γενεών, και στη συνέχεια να επικεντρωθούμε στα δικαιώματα και την ελευθερία. Η πραγματική δύναμη και το δυναμικό της βιοτεχνολογίας απαιτούν μεγάλη προσοχή για να διασφαλιστεί η ηθική πρόοδος, καθώς η βιοτεχνολογία είναι αποδεκτή ως σημαντική δύναμη για τη βελτίωση της ποιότητας της ζωής των ανθρώπων στον 21ο αιώνα.

Η βιοτεχνολογία συνδέεται εγγενώς με την επιστήμη και την επιστημονική γνώση. Αλλά μερικές φορές υπάρχει αμφιβολία ότι η βιοτεχνολογία συνδέεται στενά με την ηθική. Τέλος, διαφορετικές βιοτεχνολογικές τάσεις προωθούν ένα ορισμένο όραμα ζωής, μερικά από τα οποία είναι καλά για τη ζωή και αξίζουν να ενθαρρυνθούν ή να επιδιωχθούν, άλλα είναι κακά και πρέπει να εξαλειφθούν. Αυτό το όραμα επηρεάζει τις επιλογές των ανθρώπων και επηρεάζει την αίσθηση της ηθικά κατάλληλης βιοτεχνολογίας.

Μερικές φορές, η σχέση μεταξύ βιοτεχνολογίας και ηθικής περιγράφεται ως αντικρουόμενο σημείο. Κάποτε, υπάρχει η εντύπωση ότι η ηθική χρειάζεται μόνο σε περίπτωση που κάποιος θέλει να πει στους άλλους ότι κάνουν λάθος πράγματα. Σε κάποιο βαθμό, αυτό είναι διαυγές, δεδομένου ότι η διαμάχη, η συζήτηση και το επιχείρημα είναι κοινά μέρη της διαβούλευσης για την ηθική. Αλλά η ηθική είναι εξίσου σημαντική στην περίπτωση συναίνεσης ότι το επιλεγμένο μονοπάτι είναι καλό και σωστό. Φυσικά, δεν υπάρχει καμία ανάγκη για μια ηθική συζήτηση όταν η αναζήτηση είναι μια θεραπεία για τον καρκίνο. Έτσι, η λύση για την πραγματοποίηση μιας τέτοιας αναζήτησης προβλέπεται από μια κοινή αντίληψη ότι για τη θεραπεία του καρκίνου υπάρχει ένας ηθικός λόγος. Οι προσπάθειες, οι πόροι και η δημιουργικότητα που αφιερώνονται στην επεξεργασία καλύτερων θεραπειών είναι ηθικά επιλέξιμες και τα περισσότερα από αυτά τα επιτεύγματα οφείλονται στη βιοτεχνολογία.

Οφέλη και κίνδυνοι από εφαρμογές βιοτεχνολογίας

Η κοινωνική αποδοχή των οφελών και των κινδύνων που επιβάλλονται από τις σύγχρονες εφαρμογές βιοτεχνολογίας αφορούν:

  • Οφέλη έναντι κινδύνων κοινωνική διαμάχη
  • Η αποδοχή του κινδύνου ως βασικό στοιχείο στην αντίληψη του κινδύνου
  • Εργαλεία για τη μέτρηση της στάσης του κοινού απέναντι στους κινδύνους και τα οφέλη: διαχείριση κινδύνου

Οφέλη έναντι κινδύνων κοινωνικών διαμαχών

Για να καθοριστεί η αποδοχή των βιοτεχνολογικών εφαρμογών είναι πολύ σημαντικό να αξιολογηθούν τα αντιληπτά οφέλη και κίνδυνοι. Η εικόνα 5 τα συνοψίζει.

Αποδοχή κινδύνου

Μια άλλη βασική μεταβλητή είναι η αποδοχή κινδύνου, η οποία είναι σημαντική για τη μέτρηση της αντίληψης του κινδύνου. Αλλά σπάνια χρησιμοποιείται στη στάση απέναντι στις μελέτες βιοτεχνολογίας. Τόνισαν τη σκληρή κατάσταση με τις σύγχρονες τεχνολογίες, συνδέονται πάντα με κάποιου είδους κινδύνους που θέτουν σοβαρά προβλήματα για τις κοινωνίες. Οι υπεύθυνοι χάραξης πολιτικής θεώρησαν την ανάλυση κόστους-οφέλους ως τη βάση της μεθοδολογίας λήψης αποφάσεων για την αποδοχή του κοινωνικού κινδύνου. Το βασικό ερώτημα που πρέπει να λυθεί στην ανάλυση κινδύνου-οφέλους είναι: εάν αυτό το προϊόν (δραστηριότητα, τεχνολογία) είναι επιλέξιμο ασφαλές ή πόσο ασφαλές είναι αρκετά ασφαλές; Υπάρχουν δύο κύριες προσεγγίσεις για την απόδοση της ανάλυσης κινδύνου-οφέλους (Εικ. 6).

Διαχείριση κινδύνου

Η διαχείριση του κινδύνου είναι η διαδικασία που στοχεύει στη μείωση του αποτελέσματος και στην εξισορρόπηση του τρόπου ανταπόκρισης των ανθρώπων σε αυτόν. Αν κάποιος θέλει να διώξει όλους τους κινδύνους, αυτός δεν είναι βιώσιμος στόχος. Οι άνθρωποι αναλαμβάνουν εύκολα ρίσκα εκτελώντας ένα ευρύ φάσμα δραστηριοτήτων. Έτσι, το ερώτημα σχετικά με τον αποδεκτό κίνδυνο δεν είναι εντελώς τεχνικό, η απάντησή του εξαρτάται από τις τιμές. Με απλοποιημένο τρόπο, είναι δυνατόν να τεθεί ένα απλό όριο για αποδεκτό κίνδυνο, για παράδειγμα – έναν σε κίνδυνο εκατομμυρίου ζωής. Όλες οι δραστηριότητες που είναι πιο επικίνδυνες από αυτό το όριο είναι «απαράδεκτες» καθώς και όλες εκείνες που είναι λιγότερο επικίνδυνες είναι «αποδεκτές».

Ωστόσο, υπάρχουν δύο λόγοι για τους οποίους αυτή η προσέγγιση δεν λειτουργεί. Το πρώτο συνδέεται με την προαναφερθείσα αντίληψη κινδύνου. Οι άνθρωποι δεν αντιδρούν απλά στον κίνδυνο, η αποδοχή του κινδύνου στο μυαλό του κοινού δεν είναι απλώς θέμα πιθανών θανατηφόρων πραγμάτων, αλλά περιλαμβάνει άλλα στοιχεία της δραστηριότητας. Για παράδειγμα, εάν οι δραστηριότητες ληφθούν εθελοντικά, εάν η διαδικασία που οδηγεί στον κίνδυνο είναι νέα/παλιά ή οικεία, εάν η διαδικασία προκαλεί διαισθητική, συναισθηματική αντίδραση τρόμου ή όχι. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο, για να καθοριστεί ένας αποδεκτός κίνδυνος, πρέπει να συμπεριληφθούν οι διαδικασίες επικοινωνίας και εμπλοκής κινδύνου που περιγράφονται παραπάνω. Στο δεύτερο τεύχος, ορισμένες δραστηριότητες είναι ουσιώδεις και πρέπει να αντιμετωπιστούν ακόμη και αν προκαλούν σχετικά υψηλούς κινδύνους.

Επιπλέον, θα μπορούσαν να υπάρχουν άλλες περιπτώσεις όπου υπάρχουν φθηνές εναλλακτικές λύσεις για την εκτέλεση λιγότερο επικίνδυνων ή τροποποιημένων δραστηριοτήτων. Σε αυτές τις περιπτώσεις, ο κίνδυνος μπορεί να προβλεφθεί ως απαράδεκτος, λόγω έτοιμων εναλλακτικών λύσεων. Αυτό είναι ένα οικονομικό ζήτημα που ασχολείται με διάφορους πόρους αφιερωμένους στη μείωση του κινδύνου. Εκτός από τα οικονομικά προβλήματα, είναι δυνατόν να ληφθούν υπόψη οι κίνδυνοι, όχι ως προς τις απόλυτες αξίες αλλά ως προς τις εσωτερικές διαφορές μεταξύ των εναλλακτικών λύσεων.

Ωστόσο, πολύ συχνά δεν είναι δυνατόν να ξεφύγουμε πλήρως από τον κίνδυνο. μάλλον κάποιος πρέπει να επιλέξει ανάμεσα σε διαφορετικούς κινδύνους. Επομένως, δεν υπάρχει κάποιο αποδεκτό όριο επιτρεπόμενου κινδύνου, καθώς επίσης δεν υπάρχει μια ενιαία βολική τιμή για δημιουργία εσόδων για μείωση του κινδύνου. Η κοινωνική επιθυμία να επενδύσει στη μείωση του κινδύνου εξαρτάται από το ευρύ φάσμα παραγόντων που διαχειρίζονται την αντίληψη κινδύνου, όπως ο φόβος που σχετίζεται με τον κίνδυνο, οι καταστροφικές του δυνατότητες κ.λπ.

Κοινωνικά οφέλη της σύγχρονης βιοτεχνολογίας

Οι βιοτεχνολογίες χρησιμοποιούνται ευρέως σε τομείς όπως η ιατρική και η υγιεινή, η γεωργία, η δασοκομία, η αναπαραγωγή, η αλιεία, η ενέργεια και οι χημικές βιομηχανίες, οι μεταλλουργικές και μεταλλευτικές βιομηχανίες, οι βιομηχανίες τροφίμων και ελαίων, η προστασία του περιβάλλοντος. Η σύγχρονη βιοτεχνολογία έχει αποδείξει σταδιακά την τεράστια δυνητική συμβολή της στην παραγωγικότητα, αν και έχει μια σύντομη ιστορία μόλις δεκάδων ετών μέχρι στιγμής. Η σύγχρονη βιοτεχνολογία θα γίνει ισχυρό μέσο για τη μείωση των παγκόσμιων περιορισμών στους τομείς της τροφής, της υγείας, της ενέργειας, των πόρων και του περιβάλλοντος. Η ανάπτυξη και η εφαρμογή της σύγχρονης βιοτεχνολογίας θα επηρεάσει, για πολύ καιρό, τα ανθρώπινα όντα και την κοινωνία βαθιά.

Οι βιοτεχνολογικές βιομηχανίες είναι πιθανό να γίνουν οι κορυφαίες βιομηχανίες στον 21ο αιώνα. Για παράδειγμα, οι ποικιλίες καλλιεργειών, που παράγονται από βιοτεχνολογία, με νέα χαρακτηριστικά υψηλής παραγωγικότητας και αντοχής στο στρες (ξηρότητα, ψυχρότητα, υψηλό αλάτι κ.λπ.) αναμένεται όχι μόνο να αυξήσουν την παραγωγή σιτηρών αλλά και να μειώσουν τη χρήση γεωργικών χημικών ουσιών (όπως φυτοφάρμακα , ζιζανιοκτόνα και λιπάσματα), τα οποία θα είναι ευεργετικά για το περιβάλλον. Όσον αφορά την ιατρική και την υγιεινή, πολλά φάρμακα όπως εμβόλια DNA, ιατρική μηχανικής πρωτεΐνης, μονοκλωνικά αντισώματα, αντινόημα RNA φάρμακα έχουν αναπτυχθεί από τη βιοτεχνολογία. Τα διαγονιδιακά ζώα και φυτά που παράγουν ορισμένα είδη φαρμάκων (όπως εμβόλια και ορμόνες) μπορεί να βοηθήσουν στη μείωση των ασθενειών στη διαδικασία της καθημερινής διατροφής. Το Πρόγραμμα Ανθρώπινου Γονιδιώματος (HGP) και η έρευνα σε ορισμένα γονίδια ασθενειών θα ανακαλύψουν τους γενετικούς λόγους για ορισμένες ασθένειες. Η περιβαλλοντική ρύπανση επιδεινώνεται προς το παρόν, αλλά οι αντιδραστήρες βιολογικού μετασχηματισμού που δημιουργήθηκαν από τη βιοτεχνολογία υπόσχονται να απορροφήσουν ρύπους ή απόβλητα και να τους αποσυνθέσουν σε υλικά χαμηλής ή καθόλου τοξικότητας.

Επομένως, στην παρούσα κοινωνία που χαρακτηρίζεται από βιομηχανίες έντασης γνώσης, χώρες σε όλο τον κόσμο, ειδικά οι βιομηχανικές, λαμβάνουν σοβαρά υπόψη τη βιοτεχνολογία. Μεγάλες ποσότητες εργατικού δυναμικού και οικονομικών πόρων διατίθενται στην Ε & Α στη βιοτεχνολογία. Σχεδιάζονται σχετικές στρατηγικές και πολιτικές ανάπτυξης και υποστηρίζονται μηχανισμοί για την τόνωση της ανάπτυξης της βιοτεχνολογίας.

Αποδοχή και διάδοση της σύγχρονης βιοτεχνολογίας

Αν και έχουν γίνει πολλές μελέτες σχετικά με τη στάση ή την αντίληψη του κοινού απέναντι στη βιοτεχνολογία και ορισμένοι ερευνητές προσπάθησαν να εντοπίσουν παράγοντες που προβλέπουν τη στάση χρησιμοποιώντας είτε παλινδρόμηση είτε συσχέτιση, υπάρχουν περιορισμένες μελέτες που προσπαθούν να δημιουργήσουν ένα δομικό μοντέλο πρόβλεψης στάσης απέναντι στη βιοτεχνολογία.

Το πρώτο τεκμηριωμένο μοντέλο αναπτύχθηκε από τον Kelley (1995) ο οποίος πρότεινε έναν δομημένο τρόπο για την έγκριση της γενετικής μηχανικής από τους Αυστραλούς (Εικ. 7). Αργότερα, οι Pardo et al. (2002) πρότεινε ένα άλλο μοντέλο για την εξήγηση της ευρωπαϊκής στάσης απέναντι στις εφαρμογές της βιοτεχνολογίας. Ο Kelley διαπίστωσε ότι η έγκριση της γενετικής μηχανικής προβλεπόταν κυρίως από γεωργικούς και υγειονομικούς στόχους (ευεργετικές πτυχές). Από την άλλη πλευρά, οι επιστημονικές και γενετικές μηχανικές γνώσεις δεν προέβλεπαν έγκριση. Οι δημογραφικές μεταβλητές δεν επηρέασαν επίσης άμεσα την έγκριση της γενετικής μηχανικής (οι επιπτώσεις τους δεν ήταν στατιστικά σημαντικές). Το φύλο βρέθηκε ότι επηρεάζει τη γνώση και την επιστημονική κοσμοθεωρία, ενώ η ηλικία επηρεάζει τη γνώση, το στόχο και την επιστημονική κοσμοθεωρία, ασκώντας έτσι πολύ αδύναμη (έμμεση) επίδραση στην έγκριση. Η εκπαίδευση είχε μεγάλη επίδραση στη γνώση αλλά όχι στις συμπεριφορές. Το επάγγελμα και η θρησκεία δεν είχαν καμία επίδραση σε καμία από τις ενδιάμεσες μεταβλητές. Οι υποστηρικτές των Πράσινων ήταν λιγότερο ευνοϊκοί για τη γενετική μηχανική (αρνητική άμεση επίδραση στην έγκριση της γενετικής μηχανικής) σε σύγκριση με τους υποστηρικτές του Εργατικού Συνασπισμού (πολιτικοί).

It is often speculated that biotechnology is the technology to deeply transform the economy and society. Following such opinions, the development and application of biotechnology have considerable potential for far-reaching economic, social, and environmental impacts. That is why biotechnology is of strategic importance to knowledge-based economies and their governments. Nations that failed to develop biotechnology capabilities fail in realizing economic impacts.

Biotechnology-related applications are diffused over several very different industrial sectors, e.g., food production, textile finishing, pulp and paper, agriculture, power generation, chemicals and petrochemicals, and pharmaceuticals. The products manufactured by these sectors do not usually distinguish between alternative production processes. Thus, for many products, a distinction between biotech and conventional (e.g., chemical) production processes and also the introduction of some new ones would be necessary. Moreover, biotechnology is a dynamic field and certain biotechnological production methods will probably soon be re-developed, and completely new, products will appear. Current official statistics and existing companies’ surveys can provide specialized information about the diffusion of biotechnological applications, and their economic impact. The data have been constantly renovated and different techno-economic studies are performed to provide future production foresight and scenarios. Applying a blend of methods and sources, they frequently focus on expert judgment, case-studies, and various statistics.

An alternative to measuring the diffusion of biotechnology in use for major manufacturing sectors is the biotechnology-related-sales (BRS) concept. Existing studies have used various approaches for measurement (definition of the biotechnology aggregation level, examined sectors, scenario assumptions, etc.). Moreover, to assess the impact of biotechnology diffusion, an input-output model and relevant indicators have been introduced to study its effect on employment. The model studies in a comparative manner how biotechnology is affecting major application sectors. It compares the market penetration in 2004 and 2020 through the diffusion rates, measured with upper and lower limits. This approach helps not to overestimate the impact of biotechnology while capturing certain innovative biotechnological applications. The data of this survey indicate a nearly similar diffusion pattern in pharmaceuticals, food-processing, and agriculture. Diffusion is expected to increase in all sectors greatly by 2025, as indicated by the penetration of certain product groups. However, it was shown that there is a serious level of suspicion about the diffusion of biotechnology; the expectations for 2025 are highly uncertain. The analysis of this tendency, indicate that there are diffusion barriers specified in Fig. 7.

Συχνά εικάζεται ότι η βιοτεχνολογία είναι η τεχνολογία που μετατρέπει βαθιά την οικονομία και την κοινωνία. Μετά από τέτοιες γνωμοδοτήσεις, η ανάπτυξη και η εφαρμογή της βιοτεχνολογίας έχει σημαντικές δυνατότητες για εκτεταμένες οικονομικές, κοινωνικές και περιβαλλοντικές επιπτώσεις. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο η βιοτεχνολογία έχει στρατηγική σημασία για τις οικονομίες της γνώσης και τις κυβερνήσεις τους. Τα έθνη που απέτυχαν να αναπτύξουν ικανότητες βιοτεχνολογίας αποτυγχάνουν να πραγματοποιήσουν οικονομικές επιπτώσεις.

Οι εφαρμογές που σχετίζονται με τη βιοτεχνολογία διαχέονται σε διάφορους πολύ διαφορετικούς βιομηχανικούς τομείς, όπως παραγωγή τροφίμων, φινίρισμα υφασμάτων, χαρτοπολτού, χαρτοποιίας, γεωργίας, παραγωγής ενέργειας, χημικών και πετροχημικών και φαρμακευτικών προϊόντων. Τα προϊόντα που παράγονται από αυτούς τους τομείς δεν κάνουν συνήθως διάκριση μεταξύ εναλλακτικών διαδικασιών παραγωγής. Έτσι, για πολλά προϊόντα, θα ήταν απαραίτητη η διάκριση μεταξύ βιοτεχνολογικών και συμβατικών (π.χ. χημικών) διαδικασιών παραγωγής και επίσης η εισαγωγή ορισμένων νέων. Επιπλέον, η βιοτεχνολογία είναι ένα δυναμικό πεδίο και ορισμένες βιοτεχνολογικές μέθοδοι παραγωγής πιθανότατα θα αναπτυχθούν σύντομα και θα εμφανιστούν εντελώς νέα προϊόντα. Οι τρέχουσες επίσημες στατιστικές και οι έρευνες των υφιστάμενων εταιρειών μπορούν να παρέχουν εξειδικευμένες πληροφορίες σχετικά με τη διάδοση των βιοτεχνολογικών εφαρμογών και τον οικονομικό αντίκτυπό τους. Τα δεδομένα ανανεώνονται συνεχώς και πραγματοποιούνται διάφορες τεχνοοικονομικές μελέτες για την παροχή μελλοντικής προοπτικής παραγωγής και σεναρίων. Εφαρμόζοντας ένα μείγμα μεθόδων και πηγών, εστιάζουν συχνά στην κρίση ειδικών, στις μελέτες περιπτώσεων και σε διάφορες στατιστικές.

Μια εναλλακτική λύση για τη μέτρηση της διάχυσης της βιοτεχνολογίας που χρησιμοποιείται για μεγάλους κατασκευαστικούς τομείς είναι η έννοια των πωλήσεων που σχετίζονται με τη βιοτεχνολογία (BRS). Οι υπάρχουσες μελέτες έχουν χρησιμοποιήσει διάφορες προσεγγίσεις για τη μέτρηση (ορισμός του επιπέδου συνάθροισης βιοτεχνολογίας, εξεταζόμενοι τομείς, υποθέσεις σεναρίων κ.λπ.). Επιπλέον, για να εκτιμηθεί ο αντίκτυπος της διάχυσης της βιοτεχνολογίας, εισήχθη ένα μοντέλο εισροών-εκροών και σχετικοί δείκτες για τη μελέτη της επίδρασής του στην απασχόληση. Το μοντέλο μελετά συγκριτικά πώς η βιοτεχνολογία επηρεάζει σημαντικούς τομείς εφαρμογών. Συγκρίνει τη διείσδυση στην αγορά το 2004 και το 2020 μέσω των ποσοστών διάχυσης, μετρούμενα με ανώτερα και κατώτερα όρια. Αυτή η προσέγγιση βοηθάει να μην υπερεκτιμηθεί ο αντίκτυπος της βιοτεχνολογίας, ενώ παράλληλα αποτυπώνονται ορισμένες καινοτόμες βιοτεχνολογικές εφαρμογές. Τα δεδομένα αυτής της έρευνας δείχνουν ένα σχεδόν παρόμοιο μοτίβο διάχυσης στα φαρμακευτικά προϊόντα, την επεξεργασία τροφίμων και τη γεωργία. Η διάχυση αναμένεται να αυξηθεί σε όλους τους τομείς σε μεγάλο βαθμό έως το 2025, όπως φαίνεται από τη διείσδυση ορισμένων ομάδων προϊόντων. Ωστόσο, αποδείχθηκε ότι υπάρχει σοβαρό επίπεδο υποψίας σχετικά με τη διάχυση της βιοτεχνολογίας. οι προσδοκίες για το 2025 είναι εξαιρετικά αβέβαιες. Η ανάλυση αυτής της τάσης, δείχνει ότι υπάρχουν εμπόδια διάχυσης που καθορίζονται στην Εικόνα 7.

Πιθανές αρνητικές επιπτώσεις της σύγχρονης βιοτεχνολογίας

Κοινωνικοοικονομικές επιπτώσεις

Με κίνητρο να αντιληφθούν το μεγάλο οικονομικό κέρδος, πολλές διάσημες διεθνείς επιχειρηματικές εταιρείες πραγματοποίησαν σημαντικές επενδύσεις κεφαλαίου στην Ε&Α της βιοτεχνολογίας και με αυτόν τον τρόπο αλλάζουν τις προηγούμενες κοινωνικές και οικονομικές τάσεις του κόσμου. Ένα τέτοιο παράδειγμα είναι η εταιρεία Monsanto (πρώην αμερικανική έδρα και τώρα μέρος της παγκόσμιας κοινοπραξίας BASF). Παραδοσιακά εργαζόμενος στη χημική βιομηχανία, μετά το 1985 η εταιρεία έκανε σοβαρές ανακατατάξεις των επιχειρήσεων, επένδυσε σε 3 βιοτεχνολογικούς τομείς και έγινε μια σημαντική κοινοπραξία που ασχολείται με την Ε&Α στη βιοεπιστήμη. Μετά το 1998, περίπου 20 εκατομμύρια εκτάρια χωραφιών σε όλο τον κόσμο φυτεύτηκαν με σπόρους GM της Monsanto. Λίγο αργότερα, η Monsanto προχώρησε στη διεθνή αγορά σπόρων καλλιεργειών μέσω ενός πλήρως ενσωματωμένου συστήματος για την εμπορία γενετικά τροποποιημένων σπόρων και γεωργικών χημικών. Με αυτόν τον τρόπο, η Monsanto έλαβε τον έλεγχο σε ένα μεγάλο μέρος της τροφικής αλυσίδας του ανθρώπινου πληθυσμού κερδίζοντας τεράστιο κέρδος που τους τροφοδοτούσε με ΓΤ καλλιέργεια. Αυτό είναι ένα παράδειγμα του πώς στον σημερινό παγκοσμιοποιημένο κόσμο, προκύπτει η δυνατότητα για μερικές πολυεθνικές εταιρείες να αποφασίσουν για την κατανάλωση τροφής από τον άνθρωπο.

Σε περίπτωση χρήσης σε γαλακτοκομικά, αυξητική ορμόνη βοοειδών (BGH) που παράγεται με γενετική μηχανική, η απόδοση γάλακτος μιας αγελάδας γαλακτοπαραγωγής μπορεί να αυξηθεί κατά 30 τοις εκατό, Πράγμα που σημαίνει 10 τοις εκατό λιγότερη χρήση ζωοτροφών. Έτσι, το αποτέλεσμα είναι πολύ εντυπωσιακό για τη γαλακτοβιομηχανία.

Πολλά φάρμακα, όπως τα εμβόλια για τη θεραπεία της ελονοσίας και της χολέρας παρέχονται στους ασθενείς μέσω νέων αντιγόνων που συντίθενται με σύγχρονες βιοτεχνολογικές μεθόδους. Καθιστούν τα ποσοστά ασθενειών και θανάτων σε πολλές χώρες (ειδικά στις αναπτυσσόμενες) να πέφτουν γρήγορα, συνυπολογίζοντας τα ποσοστά αύξησης του πληθυσμού. Σε αυτό το πλαίσιο, τίθεται ένα ερώτημα σχετικά με τις επιπτώσεις στα ήδη ανεπαρκή οικονομικά και υποδομές των εν λόγω χωρών.

Επιπτώσεις στη βιοποικιλότητα και τη βιώσιμη γεωργία

Πολλές γενετικά τροποποιημένες καλλιέργειες περιέχουν ξένα γονίδια από άλλα φυτά, ζώα και μικρόβια. Όλα αυτά τα ξένα γονίδια μπορούν να μεταφερθούν σε άλλα φυτά στη φύση μέσω της γύρης των γενετικά μετασχηματισμένων φυτών και θα προκαλέσουν ρύπανση στη φυσική δεξαμενή γενετικών πόρων. Επομένως, καθώς η πλειοψηφία των διαγονιδιακών φυτών διέθετε οικονομικά χρήσιμα χαρακτηριστικά, όπως υψηλή παραγωγικότητα, αντοχή σε ασθένειες, παράσιτα, και οι αγρότες προσελκύονται από οικονομικά συμφέροντα για την καλλιέργεια αυτών των φυτών και όχι για τις παραδοσιακές ποικιλίες καλλιέργειας, ο προβλεπόμενος κίνδυνος για τους φυσικούς πόρους είναι σοβαρός. Επίσης, οι τεχνολογίες για την παρασκευή μονοκαλλιέργειας ποικιλιών καλλιεργειών σε ορισμένους τομείς μπορεί να προσθέσουν στην απώλεια της βιοποικιλότητας. Έτσι, μακροπρόθεσμα, αυτή η υποβάθμιση της γενετικής βάσης μπορεί να μειώσει τη φυσική αντίσταση των φυτών σε ασθένειες και παράσιτα εντόμων και αυτό μπορεί να προκαλέσει μείωση των αποδόσεων των καλλιεργειών. Με αυτόν τον τρόπο, η παγκόσμια βιώσιμη ανάπτυξη θα μπορούσε να τεθεί σε κίνδυνο.

Το Bacillus thuringiensis (Bt) είναι ένα βακτήριο του εδάφους, το οποίο χρησιμοποιείται για τη σύνθεση μιας τοξίνης ενάντια στα έντομα μέσα στα φυτά. Έχει χρησιμοποιηθεί ως μικροβιακό παρασιτοκτόνο για πολλά χρόνια και τα γονίδια που κωδικοποιούν αυτές τις εντομοκτόνες τοξίνες θα μπορούσαν να εισαχθούν στο κύτταρο πολλών καλλιεργειών όπως το βαμβάκι, η σόγια και ο βιασμός, για να δημιουργήσουν καλλιέργειες ανθεκτικές σε παράσιτα. Σε αυτήν την περίπτωση, οι ειδικοί στην προστασία του περιβάλλοντος και η Green Peace Corporation προβληματίζονται από το γεγονός ότι η παραγωγή τοξινών πραγματοποιείται στον ύστερο κύκλο ζωής των διαγονιδιακών φυτών και υπάρχει η ευκαιρία να αυξηθεί συνήθως η αντίσταση των παρασίτων στις τοξίνες Bt Το Έτσι, αυτή η κατάσταση θα οδηγούσε σε μεγαλύτερη χρήση φυτοφαρμάκων που βασίζονται σε Bt, λόγω απώλειας της αποτελεσματικότητάς τους και προκαλώντας μεγάλες οικονομικές απώλειες.

Επιπτώσεις στη δημόσια ευημερία

Η εκμετάλλευση της τεχνολογίας της γενετικής μηχανικής στους ανθρώπους θα μπορούσε να διευκολύνει τη διάγνωση και τη θεραπεία γενετικά συγγενών ασθενειών, όπως ορισμένοι καρκίνοι, αιμορροφιλία, κ.λπ. Μέσω ζώων γενετικής μηχανικής, τα φυτά και τα μικρόβια μπορούν να μετατραπούν σε βιο-εργοστάσια για την παραγωγή διαφόρων ειδών χημικών. Έτσι, μπορούν να αντιμετωπιστούν ως σταθεροί βιολογικοί παραγωγοί και ταυτόχρονα, η αυξανόμενη δυνατότητα παραγωγής προϊόντων μπορεί να προκαλέσει κοινωνικοοικονομικά προβλήματα. Ας υποθέσουμε ότι ειδικά μικροβιακά στελέχη έχουν σχεδιαστεί για να παράγουν μια πολύτιμη ουσία σε μεγάλη κλίμακα. Σε μια τέτοια περίπτωση, είναι σημαντικό να προβλεφθεί ο αντίκτυπος αυτής της παραγωγής στους μεγαλύτερους παραγωγούς της ίδιας ουσίας παγκοσμίως. Εάν αυτή η ουσία μετρά για ένα σημαντικό ποσοστό του εισοδήματος μιας δεδομένης χώρας, ποια θα είναι η επιρροή και οι συνέπειες αυτής της βιοτεχνολογικής παραγωγής στη γεωργία και τη χρηματοπιστωτική υποδομή της χώρας.

Θέματα βιοασφάλειας της σύγχρονης βιοτεχνολογίας

Η αλόγιστη εφαρμογή της βιοτεχνολογίας μπορεί να προκαλέσει πολλούς κινδύνους, όπως άλλες προηγμένες τεχνολογίες. Για παράδειγμα, τα νεοεισαχθέντα γονίδια σε καλλιέργειες που παράγονται από γενετική μηχανική μπορεί να οδηγήσουν σε αλλεργικές αντιδράσεις. Τα οικονομικά σημαντικά χαρακτηριστικά αντοχής στα παράσιτα, ανθεκτικότητα σε ζιζανιοκτόνα ή αντοχή στο στρες, που εισάγονται στα φυτά μπορεί να απομακρύνουν αυτούς τους διαγονιδιακούς ξενιστές από τα γεωργικά συστήματα καλλιέργειας. Τα γονίδια ανθεκτικότητας στα διαγονιδιακά φυτά μπορούν να μεταφερθούν στους συγγενείς τους με τα άγρια ​​ζιζάνια και τα τελευταία μπορούν να μετατραπούν σε “υπερ” ζιζάνια, τα οποία θα είναι πολύ δύσκολο να ελεγχθούν. Έτσι, οι μεγάλης κλίμακας απελευθερώσεις διαγονιδιακών καλλιεργειών ανθεκτικών σε παράσιτα στο περιβάλλον θα προκαλέσουν σοβαρές πιέσεις επιλογής για την ενίσχυση της αντίστασης των παρασίτων στόχων.

Τα διαγονιδιακά φυτά ανθεκτικά στον ιό που έχουν ήδη μετασχηματιστεί με ξένα γονίδια ιού διαθέτουν πρωτεΐνες κωδικοποιημένες από ιούς που μπορεί να ανασυνδυαστούν με το γενετικό υλικό άλλων ιών για να αποδώσουν νέους τύπους ιών με υψηλότερη τοξικότητα. Εάν δεν είναι δυνατή η επιλεκτική θανάτωση των παρασίτων και των παθογόνων-στόχων, οι διαγονιδιακές καλλιέργειες αντοχής σε παράσιτα και ασθένειες μπορούν να δηλητηριάσουν ταυτόχρονα άλλους οργανισμούς και επίσης να προκαλέσουν επιβλαβείς ενέργειες μέσω τροφικών αλυσίδων σε ωφέλιμους μικροοργανισμούς, έντομα, πτηνά και θηλαστικά.

Επιπλέον, πολλά βιοτεχνολογικά προϊόντα είναι ζωντανοί οργανισμοί και μπορούν να κινούνται και να αναπαράγονται από μόνα τους. Μόλις απελευθερωθούν στο περιβάλλον και αποδειχθεί ότι είναι τοξικά, τότε είναι σχεδόν αδύνατο να τα απορρίψουμε και η βλάβη που δημιουργούν μπορεί να αυξηθεί με την πάροδο του χρόνου να γίνεται όλο και πιο σοβαρή. Με αυτόν τον τρόπο, οι περιβαλλοντικές απελευθερώσεις διαγονιδιακών φυτών σε μεγάλη κλίμακα μπορεί να βλάψουν τη φυσική οικολογική ισορροπία σε μακροχρόνια προοπτική.

Οι ανησυχίες για τη βιοασφάλεια εμπόδισαν τις εφαρμογές Ε & Α της βιοτεχνολογίας. Το κοινό σε πολλές χώρες έχει δηλώσει την αρνητική του γνώμη, το απωθημένο, πράγματι το φόβο σχετικά με τα βιοτεχνολογικά προϊόντα. Αυτό εκφράζεται ακόμη και μέσω διαδηλώσεων, σύνθλιψης καλλιεργειών αγροτεμαχίων, συγκράτησης των εισαγωγών ή απαγόρευσης των βιοτεχνολογικών προϊόντων. Αυτό καθιστά τα θέματα βιοασφάλειας στην κορυφή της ατζέντας πολλών χωρών και διεθνών κοινωνιών. Νόμοι και κανονισμοί για τη βιοασφάλεια διατυπώνονται σε πολλές χώρες και τα ζητήματα της βιοασφάλειας λαμβάνονται υπόψη σε πολλά διεθνή έγγραφα και συνθήκες, όπως η Ατζέντα 21 και η Σύμβαση για τη Βιοποικιλότητα.

Συμπεράσματα

Η βιοτεχνολογία πρόκειται να γίνει σοβαρά σχετική με την οικονομία και μπορεί να αποκτήσει σημαντική σημασία σε διάφορους τομείς εφαρμογών στα επόμενα 10 έως 15 χρόνια. Ωστόσο, οι συνολικές επιπτώσεις της σύγχρονης βιοτεχνολογίας στην οικονομία είναι αρκετά διαφορετικές. Για παράδειγμα, οι εκτιμήσεις για την απασχόληση δείχνουν ότι η αύξηση του μέρους της βιοτεχνολογίας στους τομείς των εφαρμογών και η σύνδεσή της με τους προμηθευτές υποδεικνύει την τάση μείωσης της απασχόλησης λόγω των επιπτώσεων στην παραγωγικότητα. Η οικονομική σημασία της βιοτεχνολογίας αυξάνεται λόγω της διάδοσής της σε ώριμους μεταποιητικούς τομείς. Ωστόσο, η διάχυση σε αυτούς τους κύριους τομείς εφαρμογών μπορεί να επηρεάσει μόνο περιορισμένα τμήματα της συνολικής απασχόλησης. Μόνο εάν η βιοτεχνολογία αυξηθεί σε άλλους τομείς, μπορεί να προκύψει σημαντικός αντίκτυπος σε ολόκληρη την οικονομία.

Το βάθος του βιοτεχνολογικού μετασχηματισμού της οικονομίας εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τις δυνατότητές της να προτείνει τη δημιουργία νέων προϊόντων και να βελτιώσει την αποδοτικότητα στην παραγωγή των υπαρχόντων. Ως εκ τούτου, αναμένεται ότι η βιοτεχνολογία θα επέτρεπε τη δημιουργία πολλών προϊόντων, αλλά η δυνατότητα αύξησης της παραγωγικότητας της εργασίας εκτιμάται ότι είναι περιορισμένη. Μια σημαντική άποψη είναι ότι η βιοτεχνολογία μπορεί να μεταμορφώσει διαφορετικά την οικονομία και την κοινωνία, συνεργαζόμενη με άλλες τεχνολογίες όπως οι ΤΠΕ. Σημαντικές ενισχύσεις για μια τέτοια οικονομική ανάπτυξη μπορεί να προκύψουν σε συνδυασμό με άλλες τεχνολογίες ή κέρδη απόδοσης, τα οποία αυξάνουν την παραγωγικότητα και την αγοραστική δύναμη για να πραγματοποιήσουν τους καρπούς της βιοτεχνολογίας.

Test: LO6 Αρχάριο επίπεδο

Βιβλιογραφικές αναφορές

  • Agreements on Trade-Related Aspects of Intellectual Property Rights (TRIPS) available from https://www.wto.org/english/docs_e/legal_e/27-trips.pdf
  • Amin L, Hashim H, Sidik NM, Zainol ZA, Anua N. 2011. Public attitude towards modern biotechnology. African Journal of Biotechnology Vol. 10(58), pp. 12409-12417, Available online at http://www.academicjournals.org/AJB DOI: 10.5897/AJB11.1061
  • Amin L. 2013. Modern Biotechnology in Malaysia (UM Press)
  • Biology Online. Blue Biotechnology. http://www.biologyonline.org/kb/biology_articles/biotechnology/blue_biotechnology.html
  • Gaskell G, Alum N, Baouer M, Durant J, Allansdottir A, Bonfadelli H, Boy D, Cheveigne DS, Fjaestad B, Gutteling JM, Hampel J, Jelsoe E, Jesuino JG, Kohring M, Kronberger N, Midden Holden C. 1990. Activists urge ban on herbicide R & D. Science, 247:1539.
  • Horst W, Doelle J, Rokem S, Berovic M. 2019. Biotechnology – Volume XIII: Fundamentals in Biotechnology, EOLSS Publications, p 364.
  • ISAAA & The University of Illinois at Urbana Champaign (UIUC). 2003. The social and cultural dimensions of Agricultural Biotechnology in Southeast Asia Report.
  • Kelley J. 1995. Public perceptions of genetic engineering: Australia, Final report to the Department of Industry, Science and Technology, May 1995.
  • Lorenz P, Zinke H. 2005. White Biotechnology: Differences in US and EU approaches? Trends. Biotechnol. 23(12): 570-574.
  • Luscombe N, Greenbaum D, Gerstein M. 2001. What is Bioinformatics? A Proposed Definition and Overview of the Field. Method. Inform. Med. 4: 346-358.
  • Miller H, Huttner S. 1998. A baroque solution to nonproblem. Nature biotechnology, 16: 698-699.
  • Nielsen TH, Przestalski A, Rusanen T, Sakellaris G, Torgersen H, Twardowski T, Wagner W. 2000. Biotechnology and the European public. Nat. Biotechnol. (18): 935-938.
  • O’Mathúna DP. 2007. Bioethics and biotechnology. Cytotechnology. 53(1-3): 113–119. doi: 10.1007/s10616-007-9053-8
  • Pardo R, Midden C, Miller JD. 2002. Attitudes toward biotechnology in the European Union. Journal of Biotechnology 98, 9-24.
  • Wydra S, Nusser M. 2011. Diffusion and economic impacts of biotechnology – a case study for Germany. Int. J. Biotechnology, Vol. 12, Nos. 1/2, 2011 87 DOI: 10.1504/IJBT.2011.042683.
  • Agreements on Trade-Related Aspects of Intellectual Property Rights (TRIPS) available from https://www.wto.org/english/docs_e/legal_e/27-trips.pdf
  • Amin L, Hashim H, Sidik NM, Zainol ZA, Anua N. 2011. Public attitude towards modern biotechnology. African Journal of Biotechnology Vol. 10(58), pp. 12409-12417, Available online at http://www.academicjournals.org/AJB DOI: 10.5897/AJB11.1061
  • Amin L. 2013. Modern Biotechnology in Malaysia (UM Press)
  • Biology Online. Blue Biotechnology. http://www.biologyonline.org/kb/biology_articles/biotechnology/blue_biotechnology.html
  • Gaskell G, Alum N, Baouer M, Durant J, Allansdottir A, Bonfadelli H, Boy D, Cheveigne DS, Fjaestad B, Gutteling JM, Hampel J, Jelsoe E, Jesuino JG, Kohring M, Kronberger N, Midden Holden C. 1990. Activists urge ban on herbicide R & D. Science, 247:1539.
  • Horst W, Doelle J, Rokem S, Berovic M. 2019. Biotechnology – Volume XIII: Fundamentals in Biotechnology, EOLSS Publications, p 364.
  • ISAAA & The University of Illinois at Urbana Champaign (UIUC). 2003. The social and cultural dimensions of Agricultural Biotechnology in Southeast Asia Report.
  • Kelley J. 1995. Public perceptions of genetic engineering: Australia, Final report to the Department of Industry, Science and Technology, May 1995.
  • Lorenz P, Zinke H. 2005. White Biotechnology: Differences in US and EU approaches? Trends. Biotechnol. 23(12): 570-574.
  • Luscombe N, Greenbaum D, Gerstein M. 2001. What is Bioinformatics? A Proposed Definition and Overview of the Field. Method. Inform. Med. 4: 346-358.
  • Miller H, Huttner S. 1998. A baroque solution to nonproblem. Nature biotechnology, 16: 698-699.
  • Nielsen TH, Przestalski A, Rusanen T, Sakellaris G, Torgersen H, Twardowski T, Wagner W. 2000. Biotechnology and the European public. Nat. Biotechnol. (18): 935-938.
  • O’Mathúna DP. 2007. Bioethics and biotechnology. Cytotechnology. 53(1-3): 113–119. doi: 10.1007/s10616-007-9053-8
  • Pardo R, Midden C, Miller JD. 2002. Attitudes toward biotechnology in the European Union. Journal of Biotechnology 98, 9-24.
  • Wydra S, Nusser M. 2011. Diffusion and economic impacts of biotechnology – a case study for Germany. Int. J. Biotechnology, Vol. 12, Nos. 1/2, 2011 87 DOI: 10.1504/IJBT.2011.042683.

Βιοηθική και σύγχρονη βιοτεχνολογία

ΠΡΟΧΩΡΗΜΕΝΟ ΕΠΙΠΕΔΟ

Η συνθετική βιολογία είναι μια πρόσφατη επέκταση της βιοτεχνολογίας στην οποία τα γονίδια και οι πρωτεΐνες θεωρούνται ως μέρη ή συσκευές, με στόχο την αναδιάταξη ή/και τη συναρμολόγηση αυτών των τμημάτων με νέους τρόπους για τη δημιουργία νέων και χρήσιμων λειτουργιών.

Περιεχόμενα

 

Συνθετική Βιολογία και Κλωνοποίηση

Εισαγωγή

Η συνθετική βιολογία είναι μια πρόσφατη επέκταση της βιοτεχνολογίας στην οποία τα γονίδια και οι πρωτεΐνες θεωρούνται ως μέρη ή συσκευές, με στόχο την αναδιάταξη ή/και τη συναρμολόγηση αυτών των τμημάτων με νέους τρόπους για τη δημιουργία νέων και χρήσιμων λειτουργιών. Οι πρόσφατες εξελίξεις στην παραγωγή βιοκαυσίμων, στη βιοχημική παραγωγή και στην κατανόηση του ελάχιστου γονιδιώματος επωφελούνται από τις προσεγγίσεις συνθετικής βιολογίας. Συχνά, αυτά τα έργα βασίζονται στην διατεταγμένη συναρμολόγηση πολλαπλών αλληλουχιών DNA για να δημιουργήσουν μεγάλες, τεχνητές δομές DNA. Για το σκοπό αυτό, έχουν εξελιχθεί μέθοδοι για την απλοποίηση αυτής της διαδικασίας.

Η συνθετική βιολογία συνδυάζει μοριακή βιολογία και βιολογία συστημάτων με αρχές μηχανικής για τον σχεδιασμό βιολογικών συστημάτων και βιοεργοστασίων. Ο στόχος είναι να δημιουργηθούν βελτιωμένες βιολογικές λειτουργίες για την αντιμετώπιση των τρεχουσών και μελλοντικών προκλήσεων.

Τι σημαίνει η «Συνθετική Βιολογία»

Για πάνω από μια δεκαετία, ο όρος “συνθετική βιολογία” (για συντομία Synbio) έχει χρησιμοποιηθεί για να περιγράψει ερευνητικά έργα, μεθόδους και διαδικασίες για την “ανασυγκρότηση φυσικών οργανισμών”. Αυτό πηγαίνει περισσότερο από ό, τι ήταν προηγουμένως δυνατό με τη βοήθεια της γενετικής μηχανικής. Οι προσεγγίσεις επεκτείνονται στη δημιουργία (πλήρων) τεχνητών «βιολογικών» συστημάτων. Η βραχυπρόθεσμη και μεσοπρόθεσμη σημασία καθώς και οι μακροπρόθεσμες δυνατότητες αυτού του πολύ ετερογενούς πεδίου εκτιμώνται εντελώς διαφορετικά στην επιστήμη, τη βιομηχανία και την πολιτική, γεγονός που οφείλεται επίσης στον ακόμη ελλιπή αυστηρό ορισμό.

Η βασική διάκριση του synbio σε στενότερη και synbio με την ευρύτερη έννοια γίνεται και χρησιμοποιείται για την ανάλυση και τη συζήτηση επιπτώσεων:

Το Synbio με τη στενή έννοια αναφέρεται στην παραγωγή κυττάρων ή οργανισμών (ή βιολογικών ή βιοχημικών συστημάτων χωρίς κύτταρα) που έχουν σχεδιαστεί “στον πίνακα σχεδίασης” και έχουν κατασκευαστεί de novo. Αυτά προορίζονται να χρησιμοποιηθούν για την παραγωγή οποιωνδήποτε, ακόμη και εντελώς καινοτόμων ουσιών ή εφαρμογών με όραμα στους τομείς της υγείας, της ενέργειας ή του περιβάλλοντος. Χαρακτηριστικές ερευνητικές προσεγγίσεις και μέθοδοι

(1.) παραγωγή πλήρων συνθετικών γονιδιωμάτων,

(2.) η κατασκευή των λεγόμενων “ελάχιστων κυττάρων” (είτε “από πάνω προς τα κάτω” με μείωση των φυσικών κυττάρων είτε “από κάτω προς τα πάνω” ή “από την αρχή” από βασικά βιοχημικά συστατικά), και

(3.) η χρήση μη φυσικών μορίων («ξενοβιολογία»).

Το Synbio με την ευρύτερη έννοια, από την άλλη πλευρά, είναι ένας συλλογικός όρος για όλες τις επί του παρόντος επιδιωκόμενες, όλο και περισσότερο βασισμένες σε πληροφορίες και κυρίως εφαρμογές προσανατολισμένες στην εφαρμογή μοριακές βιολογικές τροποποιήσεις γνωστών οργανισμών. Αυτά στοχεύουν στην κατασκευή νέων συνθετικών οδών για την παραγωγή χημικών ουσιών ή στο σχεδιασμό γενετικών κυκλωμάτων για νέες αισθητηριακές και ρυθμιστικές λειτουργίες σε υπάρχοντες οργανισμούς. Το Synbio με μια ευρύτερη έννοια υπερβαίνει τις προηγούμενες απλές προσεγγίσεις γενετικής μηχανικής για να επηρεάσει το μεταβολισμό των οργανισμών (αποκαλούμενη “μεταβολική μηχανική”). Όλο και περισσότερο, χρησιμοποιούνται διαδικασίες σχεδιασμού και μοντελοποίησης με τη βοήθεια υπολογιστή.

Το Synbio με την ευρύτερη έννοια περιλαμβάνει επίσης διαδικασίες επεξεργασίας γονιδιώματος, οι οποίες δεν έχουν καλυφθεί μέχρι σήμερα με την ετικέτα Synbio. Την άνοιξη του 2015, η ταχεία ανάπτυξη και η πιθανή εφαρμογή τους στα φυτά, τα ζώα και τους ανθρώπους έδωσε το έναυσμα για την εντατικοποίηση της συζήτησης για τη γενετική μηχανική τόσο σε διεθνές όσο και σε εθνικό επίπεδο, η οποία θα περιλαμβάνει επίσης το synbio ως ερευνητική περιοχή και αντικείμενο χρηματοδότησης.

Με άλλα λόγια, το synbio συγκεντρώνει διάφορους επιστημονικούς κλάδους όπως η μοριακή βιολογία, η οργανική χημεία, η νανοτεχνολογία, οι επιστήμες της πληροφορίας και οι περιοχές της ιατρικής για να τροποποιήσουν σκόπιμα τους βιολογικούς οργανισμούς, να τους συνδυάσουν με τεχνητά στοιχεία ή να δημιουργήσουν τελείως τεχνητούς οργανισμούς (“arificial life” ή “Μια ζωή”).

Περιγράφεται ως μία από τις νεότερες και πιο ελπιδοφόρες εξελίξεις στη σύγχρονη βιολογία. Είναι μέρος της νέας και αναδυόμενης επιστήμης και τεχνολογίας (NEST). Μέχρι στιγμής, δεν έχει βρεθεί ένας ενοποιημένος επιστημονικός – και επομένως ακόμη περισσότερο νομικός – ορισμός. Οι ηθικές, θεολογικές και νομικές προκλήσεις που σχετίζονται με το synbio συζητούνται ευρέως λόγω του προσανατολισμού εφαρμογής του, της τεράστιας επιστημονικής προόδου και του σημαντικού (συγκεκριμένου) δυναμικού εφαρμογής της συνθετικής βιολογίας.

Πέντε υποομάδες ορίζονται ως οι κύριες περιοχές εφαρμογής του Synbio:

(α) Σύνθεση DNA: χημική κατασκευή γενετικών κωδίκων με βάση τη μήτρα ενός γενετικού κώδικα ενός υπάρχοντος οργανισμού (με γνωστά νουκλεϊκά οξέα).

β) Βιολογικά κυκλώματα με βάση το DNA: Μεταφορά πλήρων βιολογικών συστημάτων από βιοκτίσματα.

γ) Ελάχιστο γονιδίωμα ή ελάχιστη μορφή ζωής (διαδικασία από πάνω προς τα κάτω)

δ) Πρωτοκύτταρα: ζωντανά κύτταρα που επανασχεδιάζονται από κάτω προς τα πάνω

ε) Ξενοβιολογία: δημιουργία ορθογώνιων βιολογικών συστημάτων που δεν βρίσκονται στη φύση, με βάση βιοχημικές αρχές που δεν βρίσκονται στη φύση (XNA).

Αυτές οι πέντε υποομάδες μπορούν να μειωθούν σε τρία βασικά στοιχεία:

  1. τροποποίηση,
  2. αντιγραφή και
  3. νέα δημιουργία της “ζωής”.

Το μόνο ρυθμιστικό κενό που θα μπορούσε να εντοπιστεί αφορά το στοιχείο της «νέας δημιουργίας». Έτσι, τίθεται το ερώτημα εάν επίσης ένα “de novo” συνθετικά δημιουργημένο κύτταρο ή ένα ορθογώνιο βιολογικό σύστημα που δεν υπάρχει στη φύση είναι μια “βιολογική οντότητα ικανή να αναπαράγει ή να ανταλλάσσει γενετικό υλικό” κατά την έννοια του GenTG. Η Κεντρική Επιτροπή για τη Βιολογική Ασφάλεια (ZKBS) στη Γερμανία δήλωσε στην τρέχουσα ενδιάμεση έκθεσή της της 06.11.2012 ότι οι περισσότερες επιστημονικές προσεγγίσεις στη συνθετική βιολογία εμπίπτουν στο πεδίο εφαρμογής του GenTG. Μόνο νέα ζωντανά συστήματα όπως τεχνητά κύτταρα (προσέγγιση από κάτω προς τα πάνω) χωρίς μοντέλο στη φύση δεν καλύπτονται από το GenTG. Από αυτή την άποψη, μια μικρή διευκρινιστική προσθήκη στον νομικό ορισμό του όρου οργανισμός στο GenTG θα ήταν αρκετή για να καλύψει το χάσμα. Η προσθήκη θα μπορούσε να διατυπωθεί ως εξής: «κάθε βιολογική οντότητα ικανή να αναπαράγει ή να μεταφέρει γενετικό υλικό, συμπεριλαμβανομένων των μικροοργανισμών, καθώς και κάθε βιολογική οντότητα που δημιουργήθηκε με τεχνικά μέσα που δεν συμβαίνει υπό φυσικές συνθήκες και που περιέχει γενετικό υλικό που δεν υπάρχει φύση.” Μια αντίστοιχη τροποποίηση θα διευκρινίζει ότι συνθετικά παραγόμενοι ή τροποποιημένοι οργανισμοί ή βιολογικές οντότητες και ακόμη και η χρήση γυμνού, συνθετικά παραγόμενου DNA θα εμπίπτουν σίγουρα στο πεδίο και τον έλεγχο του GenTG.

Παρόλο που η συνθετική βιολογία δεν φαίνεται να είναι μια θεμελιωδώς νέα τεχνολογία – ειδικά με τη νομική έννοια – αλλά περισσότερο ή λιγότερο μια άμεση συνέχιση της σύγχρονης μοριακής βιολογίας, της γενετικής έρευνας ή της γενετικής μηχανικής, τίθεται το ερώτημα εάν οι υπάρχοντες νόμοι είναι επαρκείς ή αν νέοι νόμοι είναι απαραίτητες, δεδομένης της σημαντικής (συγκεκριμένης) δυνατότητας εφαρμογής της συνθετικής βιολογίας.

Στην πιο πρόσφατη απόφασή του για το GenTG, το Ομοσπονδιακό Συνταγματικό Δικαστήριο διευκρίνισε ότι ο νομοθέτης έχει ειδικό καθήκον να φροντίσει για την εκτίμηση των μακροπρόθεσμων συνεπειών της γενετικής μηχανικής, επειδή η επιστημονική γνώση δεν είναι ακόμη πλήρης. Από την άποψη αυτή, πρέπει να τηρηθεί η εντολή του άρθρου 20α του γερμανικού βασικού νόμου (GG), το οποίο καλεί τον νομοθέτη να αναλάβει την ευθύνη του για τις μελλοντικές γενιές προστατεύοντας τα φυσικά θεμέλια της ζωής. “Αυτή η εντολή απαιτεί τόσο πρόληψη κινδύνων όσο και προφύλαξη κινδύνου. Μεταξύ των περιβαλλοντικών αγαθών που προστατεύονται από το άρθρο 20α του βασικού νόμου είναι η διατήρηση της βιολογικής ποικιλομορφίας και η προστασία της κατάλληλης για το είδος ζωής για απειλούμενα είδη ζώων και φυτών.” Σε αυτό το πλαίσιο, το Ομοσπονδιακό Συνταγματικό Δικαστήριο κατέστησε σαφές ότι οι κανονισμοί του GenTG αποσκοπούν κυρίως στην εξασφάλιση προστασίας από την ανεξέλεγκτη εξάπλωση γενετικά τροποποιημένων οργανισμών. Ωστόσο, ο νομοθέτης πρέπει να λάβει υπόψη νέα ευρήματα και νέες επιστημονικές γνώσεις και να εξετάσει εάν είναι απαραίτητες αλλαγές στην πρακτική της εκτίμησης κινδύνου. Εάν συμβαίνει αυτό, ο νομοθέτης πρέπει να αντιδράσει ανάλογα και να προσαρμόσει τη νομοθεσία. Εάν το νέο επίπεδο κινδύνου υπερβεί το κοινωνικά αποδεκτό επίπεδο κινδύνου, ο νομοθέτης πρέπει να λάβει μέτρα. Οι νομοθέτες έχουν καθήκον να διατηρούν ένα υψηλό, αν όχι το υψηλότερο δυνατό, επίπεδο προστασίας για την ανθρώπινη υγεία. Εάν δεν συμμορφωθούν με αυτό το καθήκον, η νομολογία μπορεί τελικά να διαπιστώσει παραβίαση της αρχής της προφύλαξης.

Θέματα ασφάλειας στην συνθετική βιολογία

Ζητήματα βιολογικής ασφάλειας συνόδευσαν την εσωτερική και εξωτερική επιστημονική συζήτηση για το synbio από την αρχή. Δεδομένου ότι τα περισσότερα προϊόντα και διαδικασίες Synbio βρίσκονται στην αρχή της ανάπτυξής τους, οι πιθανές ιδιότητες που σχετίζονται με την ασφάλεια, όπως η τοξικότητα, η αλλεργιογένεση, η συμπεριφορά διασποράς ή η επιβίωση είναι επίσης σε μεγάλο βαθμό άγνωστες. Σε σχέση με τη συζήτηση σχετικά με τη φύση και την καινοτομία του synbio, η συζήτηση για την ασφάλεια σχετικά με τη βιοασφάλεια έχει επικεντρωθεί εδώ και καιρό στο πολιτικά σημαντικό ερώτημα ή την εξέταση του κατά πόσο οι τρέχουσες και προβλέψιμες εξελίξεις (ακόμη) εμπίπτουν στους ισχύοντες κανονισμούς για τα φάρμακα, θεραπείες, ιατρικές συσκευές, χημικές ουσίες και, κυρίως, γενετικά τροποποιημένοι οργανισμοί (ΓΤΟ) ή καλύπτονται επαρκώς από αυτά – ή εάν τα όρια της κατηγορίας ανατινάζονται και οι προηγούμενες διαδικασίες εκτίμησης κινδύνου και διαχείρισης κινδύνου δεν είναι πλέον αποτελεσματικές. Ένα δεύτερο συγκρότημα θεμάτων αφορά ζητήματα βιοασφάλειας, δηλαδή την παράνομη (βιολογική εγκληματικότητα) ή ακόμη και κακόβουλη (βιοτρομοκρατία) χρήση βιολογικών παραγόντων ή την υποκείμενη γνώση. Παρόλο που τα πολυσυζητημένα και αμφιλεγόμενα πειράματα (για παράδειγμα, οι ιοί της γρίπης των πτηνών) που έχουν συσχετιστεί με τον κίνδυνο μιας τέτοιας κακής χρήσης δεν έχουν προέλθει μέχρι τώρα κυρίως από ερευνητικά προγράμματα του Synbio. Αλλά τα σενάρια μιας μελλοντικής συνθετικής βιολογίας συνδέονται με εκτεταμένους φόβους και έχουν ήδη οδηγήσει σε αρχικές κανονιστικές προσπάθειες.

Θέματα βιοασφάλειας – προκλήσεις για την εκτίμηση κινδύνου και τη ρύθμιση του κινδύνου

Η τρέχουσα ανάγκη για αναθεώρηση της ρύθμισης κινδύνου για τους ΓΤΟ στη Γερμανία και την Ευρώπη, συγκεκριμένα όσον αφορά τους “συνθετικά” τροποποιημένους οργανισμούς (SVOs), είναι ακόμα εμφανής σήμερα. Ωστόσο, ενόψει της δυναμικής της επιστημονικής και τεχνολογικής ανάπτυξης καθώς και των κανονιστικών διαφορών σε διάφορες περιοχές του κόσμου, μια μελλοντική, εντατικότερη εξέταση της ρύθμισης κινδύνου μιας πιθανής μελλοντικής έκδοσης SVOs φαίνεται να είναι απολύτως κατάλληλη.

Το κεντρικό ζήτημα για την εκτίμηση κινδύνου και την αξιολόγηση κινδύνου-οφέλους των μελλοντικών SVO είναι το ερώτημα πώς θα έπρεπε να διενεργηθεί αξιολόγηση ασφάλειας χωρίς ουσιαστική ισοδυναμία με έναν οικείο μητρικό οργανισμό με τέτοιο τρόπο ώστε το αποτέλεσμα να μπορεί να γίνει αποδεκτό από τους φορείς της έρευνας , τη βιομηχανία, την πολιτική καθώς και από οργανώσεις της κοινωνίας των πολιτών και το κοινό/πολίτες ως βάση για έγκριση για εφαρμογή πεδίου. Στην περίπτωση των φυτών, αυτό το ερώτημα προκύπτει από μια σημαντική «μετατροπή» γενετικής μηχανικής και μετά. στην περίπτωση των μικροοργανισμών, προκύπτει βασικά με κάθε τύπο εφαρμογής πεδίου, για παράδειγμα με μια ανοιχτή καλλιέργεια μικροφυκών για παραγωγή βιοκαυσίμων, επειδή αυτά μέχρι τώρα έχουν χρησιμοποιηθεί σχεδόν αποκλειστικά σε κλειστά συστήματα. Οι παρεμβάσεις στην ανθρώπινη εντερική και άλλη μικροχλωρίδα θα μπορούσαν να γίνουν ένα εξαιρετικά εκρηκτικό ζήτημα επειδή οι ρυθμιστικές αρμοδιότητες είναι ασαφείς εδώ: Ο Γερμανικός Νόμος Γενετικής Μηχανικής (GenTG) δεν αναφέρεται στην εφαρμογή της γενετικής μηχανικής στους ανθρώπους και επομένως πιθανώς όχι στα συστατικά του ανθρώπου μικρόβιο όσο βρίσκονται στο ανθρώπινο σώμα.

Το έγγραφο κοινής πολιτικής του Γερμανικού Ιδρύματος Έρευνας καταλήγει στο συμπέρασμα ότι επί του παρόντος δεν υπάρχει ανάγκη για δράση, ή τουλάχιστον καμία σημαντική ανάγκη για δράση. Οι τομείς σύγκρουσης στη συνθετική βιολογία καλύπτονται από την ισχύουσα νομοθεσία και επομένως ρυθμίζονται επαρκώς. Στο ίδιο συμπέρασμα καταλήγει και η γερμανική κυβέρνηση. Τα ζητήματα βιοασφάλειας καλύπτονται από τον νόμο για τη γενετική μηχανική (GenTG), τον νόμο για τα φάρμακα (AMG), τον νόμο για την προστασία από λοιμώξεις (IFSG) και τον νόμο για τα χημικά (ChemG). Κατά τη γνώμη του Γερμανικού Ιδρύματος Έρευνας, οι κανονισμοί αυτοί είναι επί του παρόντος επαρκείς σε μεγάλο βαθμό, έτσι ώστε να μην υπάρχει άμεση ανάγκη για δράση. Αυτή είναι και η κυρίαρχη άποψη των γερμανικών αρχών.

Το Γερμανικό Συμβούλιο Δεοντολογίας δεν βλέπει επίσης ανάγκη για δράση, δεδομένου ότι η συνθετική βιολογία στη Γερμανία εμπίπτει εξ ολοκλήρου στο πεδίο εφαρμογής του GenTG και επομένως οι πτυχές της βιοασφάλειας είναι σε μεγάλο βαθμό άσχετες. Το πιο σημαντικό καθήκον προς το παρόν είναι πιθανώς να αναπτυχθεί ένας συνεπής ορισμός της συνθετικής βιολογίας, να διακριθεί σαφώς από άλλες τεχνολογίες και να διατυπωθεί μια απάντηση στο ερώτημα από τι αποτελείται ουσιαστικά η ουσιαστική καινοτομία αυτής της τεχνολογίας. Το Συμβούλιο αναγνωρίζει επίσης ότι η ανάπτυξη της συνθετικής βιολογίας μπορεί να δημιουργήσει νέα προβλήματα και κινδύνους για την ασφάλεια που απαιτούν απάντηση ή συζήτηση για τον τρόπο ανταπόκρισης. Για το λόγο αυτό, τονίζεται η σημασία μιας διαδικασίας παρακολούθησης και η συνεχής βελτίωσή της. Αυτή η διαδικασία παρακολούθησης πρέπει να βελτιώνεται συνεχώς. Η παρακολούθηση απαιτείται από το νόμο. Η ZKBS (Κεντρική Επιτροπή για τη Βιολογική Ασφάλεια) έχει ήδη ανταποκριθεί στην πρόσκληση παρακολούθησης της συνθετικής βιολογίας και έχει υποβάλει μια πρώτη έκθεση σχετικά με τις παρατηρήσεις της/σχετικά με το θέμα (1η Ενδιάμεση Έκθεση της Κεντρικής Επιτροπής για τη Βιολογική Ασφάλεια (ZKBS) της 6ης Νοεμβρίου) , 2012, “Παρακολούθηση της Συνθετικής Βιολογίας στη Γερμανία”). Σε αυτήν την έκθεση, το ZKBS, σύμφωνα με ένα καθήκον αξιολόγησης και παρακολούθησης που του ανατέθηκε (ZKBS 2012), εξετάζει αρκετές νέες τεχνικές που ανήκουν στη συνθετική βιολογία και καταλήγει στο συμπέρασμα ότι είτε εμπίπτουν στο πεδίο εφαρμογής του GenTG είτε – αν αυτό δεν συμβαίνει την περίπτωση – μην δημιουργείτε κινδύνους που απαιτούν ρύθμιση. Το ίδιο ισχύει για κύτταρα που δημιουργούνται de novo ή για ορθογώνια βιολογικά συστήματα.

Μια προσθήκη στον σκοπό του νόμου κατά την έννοια του τμήματος 1 GenTG είναι απλώς δηλωτική και επομένως δεν είναι απαραίτητη. Στην πιο πρόσφατη απόφασή του για το GenTG, το Ομοσπονδιακό Συνταγματικό Δικαστήριο διευκρίνισε ότι ο σκοπός των κανονισμών που περιέχονται στο GenTG είναι, ιδίως, να διασφαλίσει προστασία από την ανεξέλεγκτη εξάπλωση γενετικά τροποποιημένων οργανισμών.

Επιπλέον, η Testbiotech απαιτεί τη συμπλήρωση Gen 16 GenTG ως εξής: “(2) Απαγορεύεται η απελευθέρωση γενετικά τροποποιημένων ή συνθετικά παραγόμενων οργανισμών εάν δεν μπορεί να ελεγχθεί η εξάπλωσή τους ή δεν είναι δυνατή η ανάκτησή τους.”

Κατ ‘αρχήν, ένας τέτοιος κανονισμός δεν είναι αντιφατικός από συνταγματική σκοπιά. Η εκτίμηση του κινδύνου κινδύνου εμπίπτει στο προνόμιο του νομοθέτη και δεν απαιτεί επιστημονική-εμπειρική απόδειξη του πραγματικού δυνητικού κινδύνου που θέτουν οι γενετικά τροποποιημένοι οργανισμοί και οι απόγονοί τους. Σε μια κατάσταση που δεν μπορεί να αποσαφηνιστεί επιστημονικά, ο νομοθέτης δικαιούται να εκτιμήσει τον κίνδυνο και τον κίνδυνο, ειδικά επειδή τα προστατευόμενα έννομα συμφέροντα είναι συνταγματικά καθορισμένα και έχουν μεγάλη αξία, καθώς και ο υπάρχων κίνδυνος για θανατηφόρες ή επιβλαβείς, ίσως και μη αναστρέψιμες επιπτώσεις θα πρέπει να ελέγχονται με την έννοια της μέγιστης δυνατής προφύλαξης. Το Ομοσπονδιακό Συνταγματικό Δικαστήριο παραπέμπει επίσης στην Αιτιολογική Ενημέρωση Νο. 4 και Νο. 5 στην Οδηγία 2001/18/ΕΚ.

Τελικά, δύσκολα θα είναι δυνατή η παροχή οριστικών στοιχείων ότι η ακούσια εξάπλωση γενετικά τροποποιημένων ή συνθετικά παραγόμενων οργανισμών μπορεί να ελεγχθεί και ότι η ανάκτηση / ανάκτηση τους είναι εγγυημένη σε κάθε περίπτωση. Η προσθήκη σε 16 T GenTG που υποτίθεται από το TestBiotech δεν θα επηρεάσει μόνο τη συνθετική βιολογία. Αντιθέτως, θα καθιερώσει απαγόρευση της απελευθέρωσης γενετικά τροποποιημένων οργανισμών στο περιβάλλον για όλους τους τομείς της γενετικής μηχανικής, δηλαδή για όλους τους γενετικά τροποποιημένους οργανισμούς. Ένας περιορισμός που έχει τεθεί από τις πρώτες συζητήσεις γενετικής μηχανικής θα τεθεί σε εφαρμογή. Επομένως, μια τέτοια απαίτηση δύσκολα θα είναι πολιτικά εκτελέσιμη. Η απαίτηση για έναν τόσο περιοριστικό κανονισμό σχετικά με την απελευθέρωση ΓΤΟ δημιουργεί την υπόθεση ότι οι κριτικοί/αντίπαλοι της γενετικής μηχανικής θα χρησιμοποιήσουν την υποτιθέμενη καινοτομία της συνθετικής βιολογίας για να συζητήσουν και τελικά να επιβάλουν τις παλιές απαιτήσεις τους για περιορισμό της γενετικής μηχανικής. Αυτό θα σήμαινε πιθανώς το τέλος της συνθετικής βιολογίας και της γενετικής μηχανικής στη Γερμανία. Η μακροπρόθεσμη μελέτη της περιβαλλοντικής συμβατότητας που απαιτεί η EGE θα ήταν επίσης δύσκολα εφικτή/πιθανή, επειδή μια τέτοια μελέτη θα απαιτούσε τελικά την απελευθέρωση οργανισμών. Μόνο μια ελεγχόμενη απελευθέρωση ΓΤΟ μπορεί να παράσχει “πραγματικά” και ολοκληρωμένα ευρήματα σχετικά με την περιβαλλοντική συμβατότητα στο φυσικό περιβάλλον.

Ένα άλλο ζήτημα θα μπορούσε να είναι η αναθεώρηση των απαιτήσεων ασφάλειας για τους οργανισμούς παραγωγής επίσης σε περιορισμένα συστήματα (“περιορισμένη χρήση”), ιδίως όσον αφορά πιθανούς “πλήρως συνθετικούς”, σε μεγάλο βαθμό πρόσφατα κατασκευασμένους ή ξενοβιολογικά μαζικά τροποποιημένους οργανισμούς. Παρόλο που είναι ακόμα πολύ μακριά από το να είναι έτοιμοι για χρήση, έχουν τεθεί όλο και περισσότερο προς συζήτηση από ορισμένους επιστήμονες ως μια δήθεν ιδιαίτερα ασφαλή μελλοντική επιλογή λόγω των θεμελιωδών βιοχημικών διαφορών τους, οι οποίες, μεταξύ άλλων, υποτίθεται ότι κάνουν λειτουργική ανταλλαγή γονιδίων με φυσικούς οργανισμούς αδύνατο.

Κατά πάσα πιθανότητα, η συζήτηση κινδύνου για γενετικά τροποποιημένα έντομα ή ζώα γενικά θα αποκτήσει σημασία τα επόμενα χρόνια – ειδικά λόγω των αυξανόμενων δυνατοτήτων τεχνικών επεξεργασίας γονιδιώματος. Λόγω της εμπειρίας που αποκτήθηκε με την έγκριση των διαγονιδιακών φυτών, μια συναινετική θετική εκτίμηση κινδύνου των επεμβάσεων γενετικής μηχανικής σε ζώα, ειδικά σε εκείνα με υψηλή δυνατότητα διάδοσης, όπως έντομα, φαίνεται πολύ απίθανη στην ΕΕ.

Θέματα βιοασφάλειας – προστασία από κακή χρήση

Η σκόπιμη κατάχρηση βιοεπιστημονικών ευρημάτων μπορεί να περιλαμβάνει όχι μόνο τη στοχευμένη ανάπτυξη, παραγωγή και μεταφορά βιολογικών όπλων/μαχητών από τακτικά στρατιωτικά ιδρύματα ή τρομοκρατικές οργανώσεις, αλλά και εγκληματικές δραστηριότητες όπως η παραγωγή ναρκωτικών, ουσιών ντόπινγκ ή πλαστών φαρμάκων. Από τη φύση τους, λίγα είναι γνωστά για αυτές τις παράνομες ή παράνομες δραστηριότητες, γι ‘αυτό και μια λεπτομερής, βασισμένη σε γεγονότα συζήτηση για την εκτίμηση των κινδύνων της “βιοτρομοκρατίας” και του “βιολογικού εγκλήματος” (ως αποτέλεσμα των δραστηριοτήτων synbio, αλλά και αλλιώς) δεν μπορεί να γίνει δημόσια. Ωστόσο, μπορούν να τεθούν κατ ‘αρχήν ερωτήματα σχετικά με την πιθανή κακή χρήση τεχνολογιών που μπορούν να χρησιμοποιηθούν τόσο για κοινωνικό καλό όσο και σκόπιμα για επιβλαβείς σκοπούς-τις αποκαλούμενες “τεχνολογίες διπλής χρήσης”.

Αυτό περιλαμβάνει δύο επίπεδα:

  1. τη δημιουργία ευαίσθητης γνώσης – π.χ., για τη σύνθεση και παραγωγή τοξικών ουσιών, ιών υψηλής παθογένειας ή ανθεκτικών βακτηριακών παθογόνων – και
  2. πρόσβαση στη γνώση αυτή και στις τεχνολογίες ή συσκευές (εργαστηριακός εξοπλισμός) που είναι απαραίτητες για την πραγματοποίησή της.

Ο έλεγχος της ανεπιθύμητης διάδοσης της γνώσης και των τεχνολογιών στις επιστήμες της ζωής αντιμετωπίζει μεγάλες τεχνικές, αλλά και εννοιολογικές, νομικές και ηθικές προκλήσεις. Οι τελευταίες βασίζονται σε ερωτήματα σχετικά με τον περιορισμό της συνταγματικά προστατευόμενης ελευθερίας της έρευνας, καθώς και συγκεκριμένες, δυνητικά σημαντικές δυνατότητες για έρευνα υγείας και υγειονομική περίθαλψη. αλλά και σε ερωτήσεις σχετικά με το εάν και πώς η γνώση μπορεί να μεταβιβάζεται επιλεκτικά σε επιλεγμένες ομάδες και ποιος θα μπορούσε ή θα έπρεπε να αποφασίσει σχετικά με αυτήν τη γνώση και την επιλογή αυτών που “δικαιούνται να λάβουν”. Υπάρχει συναίνεση ότι, εκτός από τις διεθνείς συμφωνίες για τον έλεγχο των όπλων, τους νόμιμους περιορισμούς στις εξαγωγές αγαθών και τεχνολογιών διπλής χρήσης και πιθανούς άλλους νομικούς κανονισμούς, απαιτούνται πρόσθετα μέτρα διακυβέρνησης για να μειωθεί ο κίνδυνος κακής χρήσης της βιοεπιστήμης γενικά και της συνθετικής βιολογίας σε ιδιαιτερος. Όλοι όσοι εργάζονται με βιολογικά δραστικές ουσίες πρέπει να αναπτύξουν μια ισχυρή επίγνωση της ασφάλειας και να γνωρίζουν ποιον, αν κάποιος, μπορεί να εμπλακεί στην εκτίμηση του κινδύνου των έργων τους χωρίς να αισθάνονται αδικαιολόγητα παρακολουθούμενοι. Όπως συμβαίνει στις ΗΠΑ, όπου το Ομοσπονδιακό Γραφείο Ερευνών [FBI] επιδιώκει να διασφαλίσει τον προληπτικό έλεγχο των απειλών για τη βιοασφάλεια και έχει ορίσει συστηματικά αξιωματικούς -συνδέσμους για το βιοσκόπιο DIY, μεταξύ άλλων).

Στη Γερμανία, το πρόβλημα διπλής χρήσης όσον αφορά ερευνητικά προγράμματα που σχετίζονται με τη βιοασφάλεια (“Dual Use Research of Concern” /DURC) υιοθετήθηκε με δέσμευση και συζητήθηκε εντατικά από επιστημονικές οργανώσεις, μη κυβερνητικές οργανώσεις (ΜΚΟ) και πολιτικούς στην τα τελευταία χρόνια. Ως αποτέλεσμα, η γερμανική κυβέρνηση ανέθεσε στο Γερμανικό Συμβούλιο Δεοντολογίας να ετοιμάσει μια δήλωση με θέμα “Βιοασφάλεια – Ελευθερία και Ευθύνη στην Επιστήμη”. Αυτό παρουσιάστηκε τον Μάιο του 2014 και είναι πιθανό να αποτελέσει το σημείο αναφοράς για περαιτέρω πολιτική αντιμετώπιση του θέματος στη Γερμανία τα επόμενα χρόνια. Το Γερμανικό Συμβούλιο Δεοντολογίας ζητά νομοθετική ρύθμιση της έρευνας διπλής χρήσης που προκαλεί ανησυχία. Βασικά σημεία των περαιτέρω συστάσεων είναι η δημιουργία ενός πανελλαδικού, δηλαδή για όλους τους τύπους δημόσιων και ιδιωτικών ερευνητικών ιδρυμάτων, έγκυρου ερευνητικού κώδικα για υπεύθυνο χειρισμό θεμάτων βιοασφάλειας καθώς και τη δημιουργία μιας κεντρικής, διεπιστημονικής επιτροπής DURC, την οποία όλοι οι ερευνητές πρέπει να ενημερώσετε πριν πραγματοποιήσετε έργα DURC.

Με σκοπό τη συγκεκριμένη μείωση των δυνατοτήτων κατάχρησης μιας σημαντικά πιο ισχυρής, φθηνότερης και πιθανώς αποκεντρωμένης σύνθεσης γονιδίου (om) στο μέλλον, φαίνεται επίσης ότι υπάρχει υποχρέωση υποβολής εκθέσεων για εγκαταστάσεις “σύνθεσης γονιδίων” καθώς και καταχώρηση συνθέσεων DNA μια επιλογή που θα μπορούσε τουλάχιστον να δοκιμαστεί – ακόμα κι αν οι κίνδυνοι για το βιολογικό έγκλημα και τη βιοτρομοκρατία είναι πιθανότερο να προκύψουν από παράγοντες οργανισμών και χωρών που δεν μπορούν να ελεγχθούν επακριβώς από (υπερ) κυβερνητικούς κανονισμούς.

Βιώσιμα μοντέλα για την προστασία και τη χρήση της πνευματικής ιδιοκτησίας

Το ερώτημα πώς μπορεί και πρέπει να προστατευθεί η πνευματική ιδιοκτησία που δημιουργείται από τις σύγχρονες επιστήμες της ζωής είναι ένα από τα πιο έντονα αμφισβητούμενα στη συζήτηση για τη γενετική μηχανική, τόσο για οικονομικούς όσο και για ηθικούς λόγους. Μεταξύ άλλων, όσον αφορά τις μελλοντικές, για παράδειγμα “σχεδιασμένες” μοριακές δομές, γονίδια ή ακόμη και οργανισμούς, θα πρέπει να σημειωθεί ότι η εμπορική προστασία θα είναι πολύ πιο αληθοφανής για αυτά παρά για πρωτίστως αναλυτικά αποτελέσματα με τη μορφή φυσικών αλληλουχιών DNA. Μια άλλη καινοτομία είναι ότι, εκτός από τον καθιερωμένο (βιο) νόμο περί διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας, ο νόμος περί πνευματικών δικαιωμάτων συζητείται όλο και περισσότερο ως μελλοντική έννοια προστασίας και αξιοποίησης. Αυτό ισχύει ιδίως για την υπόθεση ότι το μέλλον του Synbio θα περιλαμβάνει τον σχεδιασμό βιολογικών πληροφοριών, συμπεριλαμβανομένου του DNA, και στη συνέχεια άλλων μορίων ή ιδιοτήτων συνθετικών συστημάτων, παρόμοια με τον προγραμματισμό κωδικών λογισμικού.

Όσον αφορά την πολιτική έρευνας, τίθεται το ερώτημα κατά πόσον ή ποιες μορφές και σχέδια χρηματοδότησης μπορούν να συνδεθούν με τις προδιαγραφές πρόσβασης και τις συνθήκες χρήσης των αποτελεσμάτων. Αυτό το ζήτημα συζητείται έντονα εδώ και χρόνια στην επιστήμη και την πολιτική πολύ πέρα ​​από τον τομέα των βιοεπιστημών. Είναι προφανές ότι ο χειρισμός της πνευματικής ιδιοκτησίας υπό τις συνθήκες μιας ολοένα και πιο ψηφιακής οικονομίας θα παραμείνει ένα από τα σημαντικότερα ζητήματα για την επιστήμη, καθώς και για την έρευνα και την οικονομική πολιτική τα επόμενα χρόνια. Η ανάπτυξη επιστημονικά, οικονομικά, κοινωνικά, πολιτικά και νομικά ρεαλιστικά, καινοτόμα ρυθμιστικά μοντέλα θα ήταν ένα πολύ δύσκολο, δαπανηρό έργο για μια σε βάθος αξιολόγηση της τεχνολογίας. Το ζήτημα των δικαιωμάτων πνευματικής ιδιοκτησίας (IPR) συνδέεται τακτικά με διπλώματα ευρεσιτεχνίας, αν και τα τελευταία είναι μόνο ένας τύπος IPR, αν και το πιο σημαντικό. Ένα πρώτο ερώτημα σχετικά με τις πιθανές προκλήσεις στην κατοχύρωση διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας για συνθέσεις συνθετικής βιολογίας είναι εάν η διαδικασία διπλώματος ευρεσιτεχνίας για τη συνθετική βιολογία είναι σημαντικά διαφορετική από το ισχύον σύστημα διπλώματος ευρεσιτεχνίας και δεύτερον, εάν το παραδοσιακό σύστημα διπλώματος ευρεσιτεχνίας είναι αρκετά αποτελεσματικό για να αντιμετωπίσει τις νέες εξελίξεις. Όσον αφορά την τρέχουσα νομοθεσία για τα διπλώματα ευρεσιτεχνίας γενικά, μπορούμε να δηλώσουμε ότι η δυνατότητα κατοχύρωσης με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας μικροοργανισμών και μορφών ανώτερης ζωής, συμπεριλαμβανομένων των γενετικά τροποποιημένων οργανισμών, έχει επιβεβαιωθεί από τη Σύμβαση Ευρωπαϊκών Διπλωμάτων Ευρεσιτεχνίας και τη νομολογία της. Συνεπώς, δεν είναι ένα πρόβλημα ειδικό για τη συνθετική βιολογία (ζήτημα “ουσία της ζωής”).

Προκλήσεις της προβλεπόμενης νέας συζήτησης για την γενετική μηχανική

Ενώ οι προοπτικές και οι δυνατότητες του Synbio με την περιορισμένη έννοια, δηλαδή η παραγωγή κυττάρων ή οργανισμών που σχεδιάστηκαν και κατασκευάστηκαν με έναν νέο τρόπο “στο τραπέζι”, εξακολουθούν να έχουν το όραμα του μέλλοντος την άνοιξη του 2015, Το synbio με την ευρύτερη έννοια, νοείται ως το επόμενο στάδιο της βιοτεχνολογίας ή της γενετικής μηχανικής, έχει αλλάξει μαζικά τον τελευταίο καιρό. Η συζήτηση για τις νέες δυνατότητες και συνέπειες των διαδικασιών επεξεργασίας γονιδιώματος έχει γίνει τόσο διαδεδομένη και εντατικοποιήθηκε τις τελευταίες εβδομάδες κατά την προετοιμασία της έκθεσης, ώστε να υποτεθεί μια θεμελιώδης αλλαγή στη συζήτηση για την περαιτέρω ανάπτυξη και χρήση τεχνικών χειραγώγησης γονιδίων.

Είναι προβλέψιμο ότι το πρόβλημα της αξιολόγησης της ασφάλειας ή της εκτίμησης κινδύνου χωρίς ουσιαστικά παρόμοιο, οικείο συγκριτικό οργανισμό θα λάβει πολύ μεγαλύτερη επείγουσα ανάγκη εάν χρησιμοποιηθούν τεχνικές επεξεργασίας γονιδιώματος παγκοσμίως την προσεχή περίοδο για εκτεταμένη τροποποίηση γονιδιωμάτων. Από αυτή την άποψη, η εντατικοποίηση της έρευνας για τη βιοασφάλεια είναι πιθανό να είναι αναπόφευκτη, τόσο σε εθνικό όσο και σε διεθνές επίπεδο. Η παγκόσμια έκταση και οι συνέπειες αυτής της εξέλιξης δύσκολα μπορούν να προβλεφθούν λεπτομερώς. Είναι όμως σαφές ότι τα επόμενα χρόνια, όχι μόνο για την ερευνητική πολιτική και πολλά νέα, μερικές φορές μόνο ανανεωμένα ερωτήματα θα προκύψουν σχετικά με τη χρηματοδότηση, την κοινωνικοοικονομική και ηθική αξιολόγηση καθώς και τη ρύθμιση των εφαρμογών της γενετικής μηχανικής και της βιοηθικής, για την οποία τελικά δεν έχει μεγάλη σημασία αν οι τεχνολογίες και οι διαδικασίες ονομάζονται συνθετική βιολογία. Αυτό που είναι επίσης καινούργιο σε αυτό είναι η αυξημένη σημασία της διεθνούς διάστασης των θεμάτων, η οποία προκύπτει κυρίως από την αυξανόμενη και περαιτέρω αύξηση της επιστημονικής και τεχνολογικής ικανότητας των αναδυόμενων χωρών. Η συνεχής παρακολούθηση των παγκόσμιων εξελίξεων χρησιμοποιώντας επιστημονικά έγκυρους δείκτες και τακτικές αναφορές φαίνεται επομένως προφανής.

Συνολική αξιολόγηση

Συνολικά, μπορεί να συναχθεί το συμπέρασμα ότι η κατάσταση ανάπτυξης και εφαρμογής του synbio δεν είναι ακόμη πολύ προχωρημένη και ότι η μελλοντική ανωτερότητα και οικονομική σκοπιμότητα των προσεγγίσεων synbio δεν μπορεί να εκτιμηθεί σοβαρά. Το τελευταίο ισχύει ιδίως για τις πιθανές χρήσεις του synbio με την ευρύτερη έννοια, οι οποίες εξακολουθούν να είναι κυρίως οραματισμένες σήμερα. Δεν είναι προβλέψιμο εάν (περισσότερο ή λιγότερο εντελώς) τεχνητοί οργανισμοί ή συστήματα “βιολογικά” θα αποκτήσουν ποτέ μεγάλη σημασία για αποτελεσματική, αξιόπιστη και ασφαλή παραγωγή “βιολογικής βάσης”.

Οι μέθοδοι και οι διαδικασίες Synbio με την ευρεία έννοια πρέπει επίσης να διεκδικούν τις υπάρχουσες επιλογές και άλλες που επίσης αναπτύσσονται. Μεμονωμένα έργα και προϊόντα είναι ήδη ανταγωνιστικά σήμερα, ως επί το πλείστον προϊόντα μικρού όγκου αλλά υψηλής τιμής (ειδικά χημικά, αρωματικά, φαρμακευτικά προϊόντα, εμβόλια). Για αυτά, ούτε τα ζητήματα του κόστους ούτε οι πτυχές της βιοασφάλειας παίζουν τόσο σημαντικό ρόλο επειδή οι υπάρχουσες ή εναλλακτικές διαδικασίες είναι επίσης δαπανηρές και επειδή είτε μπορεί να γίνει εργασία σε ασφαλέστερα κλειστά συστήματα (βιοαντιδραστήρες) είτε οι πιθανοί κίνδυνοι/παρενέργειες γίνονται πιο εύκολα αποδεκτοί (φαρμακευτικά προϊόντα/ θεραπευτική). Δεν πρέπει να παραβλέψουμε ότι τα πιο συζητημένα παραδείγματα προϊόντων του Synbio, το φάρμακο ελονοσίας αρτεμισινίνη, η αρωματική βανιλίνη που παράγεται με τη βοήθεια τροποποιημένων κυττάρων ζύμης και ένα υποκατάστατο φοινικέλαιου από μικροφύκη, δεν απέχουν πολύ από τις “συμβατικές” εφαρμογές γενετικής μηχανικής Το

Οι προοπτικές επιτυχίας των θεραπευτικών, των εμβολίων και των προσεγγίσεων γονιδιακής θεραπείας δεν μπορούν να εκτιμηθούν με γενικούς όρους. Ειδικότερα στην ιατρική, η αποτελεσματικότητα και η σχετική αριστεία γίνονται συχνά εμφανή μόνο σε πολύ αργά στάδια ανάπτυξης ή ακόμη και εφαρμογής. Ως εκ τούτου, η κύρια συζήτηση οφέλους-κινδύνου σχετικά με τις εφαρμογές Synbio στον τομέα της υγείας κατευθύνεται προς το παρόν σε άλλα επίπεδα: στους οικολογικούς κινδύνους από τη χρήση τροποποιημένων πληθυσμών κουνουπιών και σε ζητήματα παγκόσμιας κοινωνικής δικαιοσύνης σε νέες μεθόδους παραγωγής φαρμάκων και εμβολίων. Η σημασία του Synbio είναι πιθανό να ποικίλλει σημαντικά στους διάφορους τομείς εφαρμογής ανάλογα με την οικονομική επιτυχία και την κοινωνική αποδοχή, ανάλογη με την κατάσταση με τη «συμβατική» (πράσινη, κόκκινη και λευκή) γενετική μηχανική. Η ευαίσθητη στον καταναλωτή περιοχή αρωμάτων και αρωμάτων ή άλλων συστατικών για τις βιομηχανίες τροφίμων, καλλυντικών και απορρυπαντικών θα καταλάβει μια ειδική θέση.

Κλωνοποίηση ζώων και ανθρώπων

Εισαγωγή

Το 1997, το κλωνοποιημένο πρόβατο Dolly παρουσιάστηκε στο παγκόσμιο κοινό. Έκτοτε, το θέμα της κλωνοποίησης έγινε επανειλημμένα στα πρωτοσέλιδα. Έχει τρεις μητέρες και κανένα βιολογικό πατέρα. Είναι γενετικά πανομοιότυπη με μία από τις μητέρες της. Είναι το πρώτο κλωνοποιημένο θηλαστικό που δεν είναι αποτέλεσμα ενός νέου συνδυασμού πατέρα και μητέρας, αλλά δημιουργήθηκε από ένα κύτταρο σώματος μιας από τις μητέρες της. Αλλά ενώ την εποχή της Ντόλι ορισμένοι ερευνητές αντιτάχθηκαν έντονα στην κλωνοποίηση ανθρώπινων κυττάρων, σήμερα οι ίδιοι εργάζονται με εμβρυϊκά βλαστοκύτταρα με την ελπίδα ότι κάποια μέρα θα καταπολεμήσουν ασθένειες όπως ο καρκίνος ή η νόσος του Πάρκινσον. Η κλωνοποίηση, λοιπόν, στο πλαίσιο της ιατρικής, της βιοτεχνολογίας και της μοριακής βιολογίας, είναι η παραγωγή οντοτήτων, ατόμων και πληθυσμών που είναι γενετικά πανομοιότυπες ή σχεδόν πανομοιότυπες με τον αρχικό οργανισμό ή μέρος ενός οργανισμού από τον οποίο προέρχονται. Στην αυθόρμητη μορφή του, η κλωνοποίηση είναι ο τρόπος με τον οποίο τα βακτήρια και ορισμένα φυτά και ζώα αναπαράγονται ασέξουαλ.

Ο πιο δραματικά αμφιλεγόμενος τομέας είναι η ανθρώπινη κλωνοποίηση για αναπαραγωγικούς σκοπούς, δηλαδή η παραγωγή μωρών που θα μεγαλώσουν σε ενήλικες και πλήρη μέλη της κοινωνίας τους. Η έρευνα για ανθρώπινα έμβρυα, συμπεριλαμβανομένης της κλωνοποίησης με πυρηνική μεταφορά, επιτρέπεται ευρέως δεκατέσσερις ημέρες μετά τη σύλληψη. και η επακόλουθη καλλιέργεια και επιστημονική και θεραπευτική χρήση ανθρώπινων εμβρυϊκών βλαστικών κυττάρων είναι αποδεκτή στις περισσότερες χώρες (όχι όλες). Η ανθρώπινη αναπαραγωγή βρίσκεται στο επίκεντρο του ζητήματος της κλωνοποίησης, ηθικά, με τις ιδέες του σχεδιασμού και το ιστορικά διαδεδομένο θέμα της βελτίωσης των ατόμων και της βελτίωσης του ανθρώπινου γένους.

Η τεχνητή κλωνοποίηση εκμεταλλεύεται τη δυνατότητα συγκεκριμένων, μη διαφοροποιημένων κυττάρων να διαφοροποιηθούν σε κύτταρα συγκεκριμένου τύπου υπό κατάλληλες συνθήκες. Αυτά τα κύτταρα ονομάζονται βλαστοκύτταρα. Βρίσκονται τόσο σε μικρούς αριθμούς στο σώμα ενός ενήλικα, για να αντικαταστήσουν εκεί τα ελλείποντα είτε νεκρά κύτταρα, και σε πρώιμα εμβρυϊκά στάδια, από περίπου την τέταρτη έως την έβδομη ημέρα μετά τη γονιμοποίηση. Μόνο τα εμβρυϊκά βλαστοκύτταρα μέχρι το στάδιο των οκτώ κυττάρων μπορούν ακόμη να εξελιχθούν σε όλους τους τύπους ιστών και συνεπώς σε έναν ολόκληρο οργανισμό. είναι παντοδύναμοι (= παντοδύναμοι). Αντίθετα, κανένας ολόκληρος οργανισμός δεν μπορεί να σχηματιστεί από όλα τα άλλα βλαστικά κύτταρα. Μπορούν να προκαλέσουν μόνο πολλούς διαφορετικούς τύπους κυττάρων ή μόνο έναν συγκεκριμένο τύπο κυττάρων, είναι πολυδύναμοι ή πολυδύναμοι.

Βιοϊατρική έρευνα και εφαρμογή

Οι κλώνοι των ανώτερων οργανισμών παρουσιάζουν μεγάλο ενδιαφέρον για τη βασική βιοϊατρική έρευνα καθώς και για την ιατρική έρευνα προσανατολισμένη στην εφαρμογή. Επί του παρόντος, συζητούνται τέσσερα βασικά πεδία εφαρμογής της κλωνοποίησης με βάση την πυρηνική μεταφορά για ιατρικούς σκοπούς. Μια πρώτη περιοχή είναι η λεγόμενη γονιδιακή φαρμακευτική αγωγή, δηλαδή η χρήση διαγονιδιακών ζώων για την παραγωγή θεραπευτικά χρήσιμων (ανθρώπινων) πρωτεϊνών, π.χ. στο γάλα. Στο άμεσο μέλλον, αυτή θα είναι μία από τις κύριες πιθανές εφαρμογές της κλωνοποίησης με βάση την πυρηνική μεταφορά, καθώς καθιστά την παραγωγή των αντίστοιχων διαγονιδιακών ζώων πιο αποτελεσματική και στοχευμένη σε σύγκριση με τις συμβατικές μεθόδους. Τα πλεονεκτήματα αυτών των δραστικών ουσιών που λαμβάνονται με βιογενετικές διαδικασίες παραγωγής, όπως ινσουλίνη ή παράγοντες αίματος ή άλλες ανθρώπινες ενδογενείς ουσίες, είναι ότι αυτές οι δραστικές ουσίες μπορούν να ληφθούν με πολύ καθαρότερο τρόπο από ό, τι στη συμβατική μέθοδο μέσω ενδιάμεσων ζώων και ανθρώπων. Εάν υπάρχουν τέτοια ζώα, μπορούν να παραχθούν δραστικές ουσίες σε μεγάλες ποσότητες και σχετικά φθηνά. Ωστόσο, υπάρχουν επίσης κίνδυνοι για τα ζώα λόγω του γενετικού (διαγονιδιακού) χειρισμού, της βιολογικής δραστηριότητας της πρωτεΐνης που παράγεται και της ίδιας της διαδικασίας κλωνοποίησης. Οι κίνδυνοι για τον άνθρωπο μπορεί να προκύψουν από αλλαγές στα προϊόντα καθώς και από πιθανή μετάδοση ασθενειών (παθογόνων), οπότε πρέπει να αποκλειστούν στο μέτρο του δυνατού με προσεκτική δοκιμή φαρμάκων.

Ένας άλλος τομέας στον οποίο θα μπορούσε δυνητικά να χρησιμοποιηθεί η κλωνοποίηση είναι η παραγωγή διαγονιδιακών ζώων ως ζωικών μοντέλων για ανθρώπινες ασθένειες. Ένα σημαντικό εμπόδιο στην περαιτέρω ανάπτυξη ζωικών μοντέλων έχει αποδειχθεί το γεγονός ότι μέχρι τώρα ήταν δυνατό μόνο σε ποντίκια να ενσωματώσουν γενετικά χειρισμένα κύτταρα στη γεννητική γραμμή ενός ζώου δέκτη με έναν τόσο σταθερό τρόπο ώστε οι γενετικές αλλαγές να να κληρονομηθεί. Ωστόσο, οι φυσιολογικές και ανατομικές διαφορές μεταξύ ποντικών και ανθρώπων είναι τόσο μεγάλες που τα συμπτώματα της γενετικής τροποποίησης που εισήχθη σε ποντίκια συχνά δεν αντιστοιχούν στην κλινική εικόνα που παρατηρείται στους ανθρώπους. Η κλωνοποίηση μέσω πυρηνικής μεταφοράς με τη χρήση σωματικών κυττάρων ανοίγει τη δυνατότητα πρόκλησης στοχευμένων γενετικών αλλαγών σε διαφορετικά είδη (στόχευση γονιδίων και νοκ -άουτ γονιδίων). Αυτό θα καθιστούσε επίσης δυνατή για πρώτη φορά τη δημιουργία μοντέλων ασθενειών σε διαγονιδιακά μεγάλα ζώα, τα οποία, ανάλογα με την ασθένεια που θα διερευνηθεί, θα μπορούσαν να είναι ανώτερα από τα προηγούμενα μοντέλα ποντικών από άποψη ανατομικών, φυσιολογικών ή γενετικών χαρακτηριστικών. Γενικά αναμένεται ότι μεσοπρόθεσμα αυτό θα συμβάλει στην καλύτερη κατανόηση των κλινικών εικόνων των γενετικά προκαλούμενων ανθρώπινων ασθενειών και, με βάση αυτό, στην ανάπτυξη αποτελεσματικών θεραπευτικών επιλογών. Η κλωνοποίηση θα μπορούσε επίσης να συμβάλει τεχνικά στη μεταμόσχευση αυτόλογου ιστού και στη λεγόμενη κυτταρική θεραπεία. Ο βέλτιστος ιστός μεταμόσχευσης είναι εύκολο να χαρακτηριστεί: τα κύτταρά του πρέπει να είναι όσο το δυνατόν πιο γενετικά όμοια με αυτά του λήπτη. Το ανοσοποιητικό σύστημα του ασθενούς δεν θα το αναγνωρίζει πλέον ως ξένο και κάθε πρόβλημα απόρριψης θα εξαλειφθεί. Επομένως, μια βέλτιστη λύση θα ήταν η δημιουργία γενετικά πανομοιότυπου ιστού αντικατάστασης. Τα αποτελέσματα της έρευνας υποδηλώνουν ότι αυτό θα μπορούσε τώρα να επιτευχθεί μέσω κλωνοποίησης με βάση την πυρηνική μεταφορά. Κατ ‘αρχήν, είναι πιθανός ένας άλλος τρόπος καλλιέργειας ανθρώπινου ιστού αντικατάστασης: Με τη βοήθεια της μεθόδου πυρηνικής μεταφοράς, θα δημιουργηθεί ένα πρώιμο έμβρυο, από το οποίο θα μπορούσαν να ληφθούν πολυδύναμα εμβρυϊκά βλαστοκύτταρα σε καλλιέργεια. Ωστόσο, δεν ήταν ακόμη δυνατό να ληφθούν τέτοια κύτταρα σε ανθρώπους, ακόμη και από έμβρυα που δημιουργήθηκαν in vitro. Επιπλέον, μια τέτοια διαδικασία θα απαιτούσε την ηθικά και νομικά εξαιρετικά προβληματική δημιουργία και χρήση ενός ανθρώπινου εμβρύου, εκτός εάν θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν ωοκύτταρα από ζώα ως αποδέκτες των κυτταρικών πυρήνων. Αλλά αυτή η εξέλιξη είναι ακόμη στα σπάργανα και περιλαμβάνει δικά της προβλήματα, ειδικά ηθικά προβλήματα που είναι επίσης σοβαρά.

Ένας τέταρτος τομέας στον οποίο είναι δυνατή η χρήση (διαγονιδιακών) κλωνοποιημένων ζώων είναι η ξενομεταμόσχευση (μεταμόσχευση ζωικών οργάνων σε ανθρώπους). Ωστόσο, για να κατασκευαστούν «ζώα δωρητές», θα πρέπει να τροποποιηθούν έως και δώδεκα περίπου γονίδια στους χοίρους, για παράδειγμα. Αυτό είναι πρακτικά αδύνατο με συμβατικές μεθόδους γενετικής τροποποίησης. Η κλωνοποίηση θα μπορούσε τώρα να καταστήσει δυνατή την πρώτη παροχή κυττάρων σε καλλιέργεια με τις επιθυμητές γενετικές αλλαγές προτού δημιουργηθεί ένα γενετικά τροποποιημένο ζώο από αυτά με τη βοήθεια κλωνοποίησης με βάση την πυρηνική μεταφορά. Αλλά ακόμη και αν το «ιδανικό» ζώο δότης μπορούσε να δημιουργηθεί με αυτόν τον τρόπο, τα θεμελιώδη προβλήματα της απόρριψης πιθανότατα θα παρέμεναν. Είναι επίσης αβέβαιο εάν το ξένο ζωικό όργανο θα εκπληρώσει πραγματικά τη λειτουργία του στον άνθρωπο δέκτη. Το πρόβλημα της προσαρμογής των ζωικών ιών στον άνθρωπο παραμένει επίσης, με πιθανή συνέπεια επιδημίες.

Νομικές πτυχές

Στο ερώτημα ποιοι κανονισμοί διέπουν την κλωνοποίηση ζώων στη Γερμανία (και στο εξωτερικό) και υπό ποιες συνθήκες η κλωνοποίηση είναι ή δεν είναι νομικά επιτρεπτή. Δεν υπάρχει ρητή εξέταση των τεχνικών κλωνοποίησης στην Ομοσπονδιακή Δημοκρατία στον νόμο για την προστασία των ζώων, για παράδειγμα. Ωστόσο, η κλωνοποίηση των ζώων θα μπορούσε να καλυφθεί από τις διατάξεις του Τμήματος 7 (1) του Νόμου για την Προστασία των Ζώων, καθώς αυτή η παράγραφος περιέχει διατάξεις για πειράματα σε ζώα και οι διαδικασίες κλωνοποίησης είναι κυρίως σε πειραματικό στάδιο. Ωστόσο, η εφαρμογή και ο αντίκτυπος αυτής της παραγράφου συζητούνται με πολύ διαφορετικούς τρόπους: Εάν κάποιος δεν θεωρήσει τον αποπυρηνισμό του ωαρίου ως γενετική τροποποίηση με τη νομική έννοια, η μεταφορά του ωαρίου δεν μεταδίδεται αποτελούν πείραμα σε ζώα. Ωστόσο, αν κάποιος καταλήξει στο συμπέρασμα ότι η κλωνοποίηση μέσω πυρηνικής μεταφοράς εμπίπτει στις διατάξεις του τμήματος 7, παράγραφος 1, πρόταση 2 του νόμου για την προστασία των ζώων, επειδή αυτό περιλαμβάνει παρεμβάσεις στο γενετικό υλικό και, επιπλέον, πειράματα κλωνοποίησης μπορεί να σχετίζεται με πόνο ή βλάβη για τα γενετικά τροποποιημένα ζώα (ή ζώα φορείς), τα πειράματα κλωνοποίησης μέσω πυρηνικής μεταφοράς θα υπόκεινται σαφώς σε άδεια.

Από συνταγματική άποψη, η απαγόρευση κλωνοποίησης στην Ομοσπονδιακή Δημοκρατία της Γερμανίας θα παραβίαζε τα θεμελιώδη δικαιώματα των ερευνητών και των επαγγελματιών σύμφωνα με το άρθρο 5 παράγραφος 3 (ελευθερία έρευνας) και το άρθρο 12 παράγραφος 1 GG (ελευθερία κατοχής). Η απαγόρευση κλωνοποίησης ή άλλοι περιορισμοί στην κλωνοποίηση θα συνιστούσαν επίσης καταπάτηση της συνταγματικά κατοχυρωμένης ελευθερίας της επιστήμης. Ένα συνταγματικό φράγμα που θα μπορούσε να δικαιολογήσει την καταπάτηση προφανώς δεν υπάρχει. Σύμφωνα με το άρθρο 12 παράγραφος 1 του βασικού νόμου, η απαγόρευση της κλωνοποίησης, για παράδειγμα, θα ήταν επομένως αντισυνταγματική, καθώς δεν θα ήταν συμβατή με το δημόσιο καλό και δεν θα καλυπτόταν από τη νομική επιφύλαξη του άρθρου 12 παράγραφος 1 πρόταση 2 του βασικού νόμου. Η κλωνοποίηση ζώων είναι επομένως επιτρεπτή κατ ‘αρχήν υπό τις σημερινές συνθήκες και υπόκειται μόνο σε περιορισμένους περιορισμούς σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ο «κρατικός στόχος της προστασίας των ζώων» δεν αποκλείει τη χρήση ζώων από τον άνθρωπο, αλλά αυξάνει τις απαιτήσεις για την απαραίτητη αιτιολόγηση.

Ηθικές πτυχές

Οι διαφορετικές θέσεις στην κοινωνική συζήτηση και αξιολόγηση της κλωνοποίησης των ζώων μπορούν εν μέρει να εντοπιστούν σε διαφορετικές βασικές υποθέσεις αξίας. Αυτά καθορίζουν επίσης εάν η κλωνοποίηση των ζώων θεωρείται ότι έχει νέα ποιότητα σε σύγκριση με τις συμβατικές ή άλλες νέες μεθόδους αναπαραγωγής ζώων. Ορισμένες θεολογικά θεμελιωμένες θέσεις θεωρούν την κλωνοποίηση, για παράδειγμα, ως παρέμβαση στη δημιουργία στην οποία οι άνθρωποι δεν έχουν κανένα δικαίωμα. Όσοι αποδίδουν μια «εγγενή αξία» ή μια «αξιοπρέπεια δημιουργίας» στα ζώα θα θεωρούν γενικά την κλωνοποίηση ζώων τουλάχιστον ηθικά προβληματική. Από ανθρωποκεντρική σκοπιά, το ζήτημα της ασφάλειας των προϊόντων που παράγονται με τη βοήθεια της διαδικασίας κλωνοποίησης και των οικολογικών (εξαθλίωση της γενετικής ποικιλομορφίας) και των κοινωνικών (βιομηχανική μαζική παραγωγή, συγκέντρωση κεφαλαίου, νέες σχέσεις εξάρτησης) και κινδύνους που ενδεχομένως σχετίζονται με η χρήση του είναι σε πρώτο πλάνο. Λόγω της δυσκολίας επίτευξης ηθικής συναίνεσης, είναι απαραίτητο να εξεταστεί ποιες ηθικές αρχές θα πρέπει να καθοδηγούν την πιθανή χρήση της κλωνοποίησης ζώων.

Κατά κανόνα, οι ηθικολόγοι θεωρούν ότι οι στόχοι στη βιοϊατρική έρευνα και εφαρμογή έχουν υψηλή προτεραιότητα εάν είναι ιδιαίτερα επείγοντες ή ακόμη και ζωτικοί όσον αφορά την ανθρώπινη υγεία και μπορούν να επιτευχθούν μόνο με τη βοήθεια της κλωνοποίησης από ανώτερα ζώα. Οι στόχοι στον τομέα της βασικής έρευνας μπορούν επίσης να θεωρηθούν υψηλής προτεραιότητας και να δικαιολογήσουν την κλωνοποίηση ανώτερων ζώων εάν δεν υπάρχουν διαθέσιμες εναλλακτικές μέθοδοι. Ωστόσο, εάν η κλωνοποίηση σχετίζεται με σημαντική ταλαιπωρία για το συγκεκριμένο ζώο, πρέπει να εξεταστεί εάν το απλό ενδιαφέρον των ανθρώπων για τη γνώση αποτελεί ήδη επαρκή λόγο αιτιολόγησης ή εάν οι αιτιολογήσεις είναι δυνατές μόνο για ορισμένους στόχους, δηλαδή όταν είναι αναγκαίο να αποφευχθούν σημαντικό ανθρώπινο πόνο. Οι στόχοι στον τομέα της κτηνοτροφίας συνήθως αναφέρονται ως δευτερεύοντες στους αναφερόμενους στόχους, εκτός εάν εξυπηρετούν ρητά την εξασφάλιση της τροφικής βάσης για τους ανθρώπους.

Συμπεράσματα και επιλογές δράσης

Στην εφαρμοσμένη έρευνα, η κλωνοποίηση με βάση την πυρηνική μεταφορά ανοίγει νέους τρόπους παραγωγής διαγονιδιακών ζώων. Μερικές θεραπευτικά αποτελεσματικές πρωτεΐνες μπορούν να παραχθούν φθηνά με αυτόν τον τρόπο. Η παραγωγή αυτόλογου ιστού αντικατάστασης φαίνεται να είναι ελπιδοφόρα από ιατρική και ηθική άποψη, και επομένως οι αντίστοιχες ερευνητικές δραστηριότητες αξίζουν ιδιαίτερα υποστήριξης. Δεν είναι σαφές εάν θα είναι δυνατή η δημιουργία καλύτερων μοντέλων εξέτασης για ανθρώπινες ασθένειες σε ζώα αγροκτήματος, αλλά λόγω της μη αμελητέας ιατρικής σημασίας, οι προσπάθειες θα πρέπει επίσης να ενταθούν και να υποστηριχθούν σε αυτόν τον τομέα. Συνολικά, το πιθανό όφελος της κλωνοποίησης με βάση την πυρηνική μεταφορά για τους τομείς της έρευνας και της ιατρικής φαίνεται να είναι σχετικά υψηλό.

Από ηθική άποψη, η αξιολόγηση της κλωνοποίησης των ζώων πρέπει κατ ‘αρχήν να βασίζεται στα ίδια κριτήρια που εφαρμόζονται (ή πρέπει να εφαρμόζονται) στην παραδοσιακή εκτροφή ζώων. Από αυτή την άποψη, η σύσταση μιας εθνικής επιτροπής ηθικής, η οποία θα πρέπει να ασχοληθεί με τα ηθικά-ηθικά ζητήματα της προόδου της βιολογικής και βιοϊατρικής τεχνολογίας στο σύνολό της ή με τις συνέπειες της προόδου στη βιολογία και την ιατρική στον μη ανθρώπινο τομέα , επίσης προβληματίζεται σε διάφορα σημεία. Το καθήκον του θα ήταν να συμβουλεύει τους υπεύθυνους λήψης πολιτικών αποφάσεων και να ενημερώνει το κοινό.

Δίκαιο και ηθική στον τομέα της περιβαλλοντικής βιωσιμότητας

Εισαγωγή

Η αρχή της βιωσιμότητας ή της αειφόρου ανάπτυξης αποτελεί αντικείμενο ευρέος φάσματος διεθνών, εθνικών και τοπικών δραστηριοτήτων, θεωρητικών προσπαθειών, νομικών και σχεδιαστικών μέτρων. Συνοδεύονται από μια σχεδόν ανεξέλεγκτη πληθώρα δημοσιεύσεων και τεκμηρίωσης. Ωστόσο, ουσιώδη ερωτήματα σχετικά με την ερμηνεία αυτής της αρχής παραμένουν αναπάντητα.

Η αρχή της βιωσιμότητας είναι ευρέως κατανοητή με βάση την έκθεση του 1987 της Παγκόσμιας Επιτροπής για το Περιβάλλον και την Ανάπτυξη (η λεγόμενη Έκθεση Brundtland), της οποίας ο ορισμός συχνά θεωρείται ως το πρότυπο: “Η ανθρωπότητα έχει την ικανότητα να κάνει την ανάπτυξη βιώσιμη – για να διασφαλιστεί ότι ανταποκρίνεται στις ανάγκες του παρόντος χωρίς να διακυβεύεται η ικανότητα των μελλοντικών γενεών να καλύψουν τις δικές τους ανάγκες. Το βασικό στοιχείο αυτής της αντίληψης είναι η προστασία του περιβάλλοντος από την άποψη της γενεάς και της διεθνούς δικαιοσύνης. Ωστόσο, η έκθεση περιέχει ένα δεύτερο, λιγότερο γνωστός ορισμός, ο οποίος δίνει έμφαση στις ριζικές κοινωνικές αλλαγές που απαιτούνται και τον χαρακτήρα της διαδικασίας της αειφόρου ανάπτυξης: «Η βιώσιμη ανάπτυξη είναι (…) μια διαδικασία αλλαγής στην οποία η εκμετάλλευση των πόρων, η κατεύθυνση των επενδύσεων, ο προσανατολισμός της τεχνολογικής ανάπτυξης , και οι θεσμικές αλλαγές γίνονται σύμφωνα με τις μελλοντικές αλλά και τις παρούσες ανάγκες.

Δέσμευση της Ευρώπης για βιώσιμη ανάπτυξη

Η αειφόρος ανάπτυξη βρίσκεται στο επίκεντρο της ευρωπαϊκής πολιτικής εδώ και πολλά χρόνια και οι Συνθήκες της Ευρώπης αναγνωρίζουν τις οικονομικές, κοινωνικές και περιβαλλοντικές διαστάσεις. Η οικονομική ευημερία, αποτελεσματικότητα, ειρηνικές κοινωνίες, κοινωνική ένταξη και υπευθυνότητα, με αξιοπρέπεια για όλους στο περιβάλλον τους, είναι η βάση της αειφόρου ανάπτυξης. Η βιώσιμη ανάπτυξη είναι συνεπώς ένα οριζόντιο ζήτημα που επηρεάζει όλα τα κράτη. Η Ευρώπη είναι συνεπώς υποχρεωμένη να καλύψει τις ανάγκες του παρόντος και δεν πρέπει να διακινδυνεύσει ότι οι μελλοντικές γενιές δεν θα είναι σε θέση να καλύψουν τις δικές τους ανάγκες.

Η διασφάλιση της βιωσιμότητας αποτελεί πρόκληση για την Ευρώπη, επειδή κυμαίνεται από την ανεργία των νέων, την κλιματική αλλαγή, τη ρύπανση, τις ενεργειακές και μεταναστευτικές πολιτικές έως τη γήρανση του πληθυσμού. Πρέπει να προετοιμαστούμε για τις τρέχουσες και μελλοντικές προκλήσεις και να ανταποκριθούμε στις γρήγορες και περίπλοκες παγκόσμιες αλλαγές και στις ανάγκες του αυξανόμενου πληθυσμού του κόσμου. Για να διατηρηθεί το ευρωπαϊκό κοινωνικό μοντέλο και η κοινωνική συνοχή, είναι απαραίτητο να επενδύσουμε στη νεολαία μας, να προωθήσουμε μια χωρίς αποκλεισμούς και βιώσιμη ανάπτυξη, να αντιμετωπίσουμε τις ανισότητες και να διαχειριστούμε τη μετανάστευση με σύνεση. Η βιωσιμότητα των συστημάτων υγείας και συνταξιοδότησής μας θα βελτιωθεί ακολουθώντας υπεύθυνες δημοσιονομικές πολιτικές και μεταρρυθμίσεις, διότι εάν θέλουμε να προστατεύσουμε το φυσικό μας κεφάλαιο, πρέπει να επιταχύνουμε τη μετάβαση σε μια ανταγωνιστική κυκλική οικονομία χαμηλών εκπομπών άνθρακα, ανθεκτικών στο κλίμα και αποδοτικών πόρων. Το Έτσι, απαιτείται ισχυρή δέσμευση για έρευνα και καινοτομία για να μετατραπούν αυτές οι προκλήσεις σε ευκαιρίες για νέες επιχειρήσεις και θέσεις εργασίας.

Ρύθμιση της περιβαλλοντικής συμπεριφοράς

Η κατανόηση της αρχής της βιωσιμότητας διαδίδεται ως πρότυπο από την έκθεση της Παγκόσμιας Επιτροπής Περιβάλλοντος και Ανάπτυξης που δημοσιεύθηκε το 1987: «Η ανθρωπότητα έχει την ικανότητα να καθιστά την ανάπτυξη βιώσιμη – να διασφαλίζει ότι ικανοποιεί τις ανάγκες του παρόντος χωρίς να θέτει σε κίνδυνο την ικανότητά του των επόμενων γενεών για να καλύψουν τις δικές τους ανάγκες ».

Η διαγενεακή και διεθνής δικαιοσύνη καθιστά την προστασία του περιβάλλοντος βασικό στοιχείο της ιδέας. Αλλά η έκθεση περιέχει έναν δεύτερο, λιγότερο γνωστό ορισμό, ο οποίος δίνει έμφαση στις απαραίτητες ριζικές κοινωνικές αλλαγές και τον χαρακτήρα της διαδικασίας της βιώσιμης ανάπτυξης: «Η βιώσιμη ανάπτυξη είναι ((…)) μια διαδικασία αλλαγής στην οποία η εκμετάλλευση των πόρων, η κατεύθυνση επενδύσεων, ο προσανατολισμός της τεχνολογικής ανάπτυξης και η θεσμική αλλαγή γίνονται συνεπείς με τις μελλοντικές αλλά και τις τρέχουσες ανάγκες».

Το λεγόμενο μοντέλο τριών πυλώνων είναι, ωστόσο, ο ορισμός που χρησιμοποιείται συχνότερα στο λόγο βιωσιμότητας: «Η βιωσιμότητα είναι η αντίληψη μιας μόνιμα βιώσιμης ανάπτυξης των οικονομικών, οικολογικών και κοινωνικών διαστάσεων της ανθρώπινης ύπαρξης. Αυτοί οι τρεις πυλώνες της αειφορίας αλληλεπιδρούν μεταξύ τους και απαιτούν ισορροπημένο συντονισμό μακροπρόθεσμα ».

Η βιωσιμότητα είναι προσανατολισμένη προς το μέλλον και ταυτόχρονα ουτοπική, δηλαδή είναι μια ουτοπία, αλλά όχι με την έννοια της «ψευδαισθητικής ανεμελιάς», αλλά μάλλον «ως έκφραση μιας αποχώρησης σε ένα μέλλον προσβλητικά προσανατολισμένο προς την απόκτηση νέων προοπτικών». άποψη της στένωσης των μελλοντικών επιλογών λόγω οικονομικών, οικολογικών και κοινωνικών προβλημάτων.

Η ΕΕ είναι συνεπώς δεσμευμένη για μια ανάπτυξη που ικανοποιεί τις ανάγκες του παρόντος χωρίς να διακινδυνεύει ότι οι μελλοντικές γενιές δεν θα είναι σε θέση να καλύψουν τις δικές τους ανάγκες. Μια ζωή με αξιοπρέπεια για όλους με τους διαθέσιμους πόρους σε αυτόν τον πλανήτη, που χαρακτηρίζεται από οικονομική ευημερία, αποτελεσματικότητα, ειρηνικές κοινωνίες, κοινωνική ένταξη και περιβαλλοντική ευθύνη, αποτελεί τη βάση της αειφόρου ανάπτυξης.

Όργανα

Μέσα για την επιβολή της περιβαλλοντικής πολιτικής (περιβαλλοντικός σχεδιασμός)

Η περιβαλλοντική πολιτική αναπτύχθηκε στις βιομηχανοποιημένες χώρες κυρίως ως αντίδραση σε υψηλή περιβαλλοντική ένταση της βιομηχανίας στις αρχές της δεκαετίας του εβδομήντα τον περασμένο αιώνα ως ειδική κυβερνητική υπηρεσία. Στην αρχή περιορίστηκε κυρίως στη δραστηριότητα του κράτους. Εν τω μεταξύ, όμως, όλο και περισσότεροι σχετικοί με το περιβάλλον πρωταγωνιστές (οι λεγόμενοι “ενδιαφερόμενοι”) καλούνται να λογοδοτήσουν για περιβαλλοντικά θέματα. Ειδικά η άμεση ευθύνη του παραγωγού (πιθανών) περιβαλλοντικών προβλημάτων παίζει ολοένα και μεγαλύτερο ρόλο. Υπάρχει επίσης η ανάγκη άσκησης οικοπολιτικών στόχων και στρατηγικών σε άλλα τμήματα: π.χ. στην ενεργειακή -μεταφορική -και τη βιομηχανία -γεωργική -ή την οικοδομική και κατασκευαστική πολιτική. Τα «σκληρά» οικοπολιτικά μέσα (ως νόμοι και κανονισμοί) βρίσκονται δίπλα στις «ήπιες» μεθόδους ελέγχου της συμπεριφοράς.

Εκτός από το περιβαλλοντικό δίκαιο, ο περιβαλλοντικός σχεδιασμός αποτελεί το κεντρικό σύνολο εργαλείων, στο βαθμό που η οικολογική πολιτική θέλει να εφαρμοστεί όχι μόνο ως ρυθμιστική αλλά και ως διαμορφωτική πολιτική. Ο περιβαλλοντικός σχεδιασμός μπορεί να θεωρηθεί ως η ανάπτυξη βιώσιμων περιβαλλοντικών στρατηγικών, οι οποίες θα διευκολύνουν την επίτευξη περιφερειακών ή/και τομεακών στόχων προστασίας του περιβάλλοντος εντός συγκεκριμένου χρονικού πλαισίου: π.χ. μείωση των εκπομπών CO2 κατά 25% μέσα στα επόμενα δέκα χρόνια. Στη δεκαετία του ογδόντα του περασμένου αιώνα, το πέρασμα των εθνικών περιβαλλοντικών σχεδίων στη Δανία, την Ολλανδία και τη Φινλανδία έπαιξε έναν πρωτοποριακό ρόλο σε αυτό. Ως εκ τούτου, θα επεκταθούμε πρώτα στις δυνατότητες του περιβαλλοντικού σχεδιασμού.

Για την επιβολή των αρχών και των στόχων της περιβαλλοντικής πολιτικής, δύο νομικά μέσα εφαρμόζονται στο νομικό πλαίσιο πολλών κρατών εντός της ΕΕ, που σημαίνει τους διαφορετικούς τύπους περιβαλλοντικού σχεδιασμού και τα διαφορετικά μέτρα για τη ρύθμιση της περιβαλλοντικής συμπεριφοράς. Ο περιβαλλοντικός σχεδιασμός αποτελεί σημαντικό μέσο προληπτικής προστασίας. Αυτός ο προγραμματισμός πραγματοποιείται ως διαδικασία πολλαπλών σταδίων, που περιλαμβάνει την καταγραφή της τρέχουσας κατάστασης, την πρόβλεψη μελλοντικών εξελίξεων και τη σύγκρουση στόχων και συμφερόντων. Τα σχέδια μπορούν να λάβουν τη μορφή νόμων, καταστατικών κανονισμών, καταστατικών, διοικητικών κανονισμών ή διοικητικών πράξεων, καθένα από τα οποία έχει διαφορετικές νομικές συνέπειες

Δύο μορφές περιβαλλοντικού σχεδιασμού είναι κυρίαρχες: Ο λεγόμενος «ολοκληρωμένος σχεδιασμός». Το καθήκον του συνολικού σχεδιασμού σχετικά με το περιβάλλον είναι να καθορίσει, κατά την άσκηση προνοητικότητας, τη χρήση γης για οικιστικούς, οικονομικούς και αναψυκτικούς σκοπούς για μια συγκεκριμένη περιοχή, ανεξάρτητα από οποιοδήποτε συγκεκριμένο έργο και δεν περιορίζεται σε κάποιο συγκεκριμένο τομέα. Και το δεύτερο είναι ο τομεακός σχεδιασμός: Αντίθετα, ο τομεακός σχεδιασμός αφορά το περιβάλλον και χρησιμεύει για την κατάρτιση σχεδίων προστασίας του περιβάλλοντος. Πρόκειται κυρίως για σχέδια τοπίου, σχέδια καθαρού αέρα, σχέδια μείωσης θορύβου, σχέδια διατήρησης νερού και σχέδια διαχείρισης απορριμμάτων, τα οποία απαιτούν πρόσθετα μέτρα επιβολής.

Ένα άλλο σημαντικό μέσο για την επιβολή των απαιτήσεων περιβαλλοντικής πολιτικής είναι η «εκτίμηση περιβαλλοντικών επιπτώσεων» (ΜΠΕ). Ο πρωταρχικός στόχος αυτού του μέσου είναι η έγκαιρη και ολοκληρωμένη ενημέρωση της διοίκησης για τις περιβαλλοντικές επιπτώσεις περιβαλλοντικά σημαντικών έργων. Η αξιολόγηση περιβαλλοντικών επιπτώσεων είναι ο εντοπισμός, η περιγραφή και η αξιολόγηση όλων των άμεσων και έμμεσων επιπτώσεων ενός προγραμματισμένου έργου στο περιβάλλον, συμπεριλαμβανομένων των οικολογικών αλληλεπιδράσεων, εγκαίρως, επιτρέποντας έτσι τη λήψη προληπτικών μέτρων, σε όλα τα μέσα και τους τομείς, καθώς και το κοινό.

Μέσα ρύθμισης της περιβαλλοντικής συμπεριφοράς

Η περιβαλλοντική συμπεριφορά είναι ίσως ο σημαντικότερος στόχος για την περιβαλλοντική πολιτική και εκπαίδευση. Υπάρχουν ορισμένα μέσα για τη ρύθμιση της περιβαλλοντικής συμπεριφοράς. Πρέπει να γίνει διάκριση μεταξύ άμεσων και έμμεσων μορφών ρύθμισης:

Η άμεση ρύθμιση της συμπεριφοράς αφορά νομικά μέτρα που έχουν σχεδιαστεί για να επηρεάζουν άμεσα την περιβαλλοντική συμπεριφορά. Το «κλασικό» όργανο αυτού του τύπου είναι το περιβαλλοντικό κανονιστικό δίκαιο, το οποίο προέρχεται από το αστυνομικό και κανονιστικό δίκαιο και γενικά τιμωρεί τη μη συμμόρφωση με την επιβολή κυρώσεων. κοινοποίηση, εγγραφή, αδειοδότηση, εξουσιοδότηση, έγκριση και άλλες διαδικασίες χορήγησης άδειας για την άσκηση μιας τέτοιας δραστηριότητας. Επιπλέον, η άμεση ρύθμιση ασκείται επίσης μέσω ρητής (απολύτως) απαγόρευσης ή απαίτησης ορισμένης συμπεριφοράς από το νόμο.

Αρχές για πολιτικά και νομικά μέτρα

Το σημαντικό είναι να διακρίνουμε και να εξηγήσουμε τις αρχές που διέπουν το περιβαλλοντικό δίκαιο τόσο σε εθνικό όσο και σε διεθνές πλαίσιο και να κατανοήσουμε την έννοια της «περιβαλλοντικής βιωσιμότητας» και της «βιώσιμης ανάπτυξης» στο πλαίσιο της προστασίας της φύσης Το σοβαρό και ουσιαστικό περιβαλλοντικό δίκαιο πρέπει να καθοδηγείται από ορισμένους αρχές υψηλού επιπέδου. Για πολλούς διεθνείς και εθνικούς κανονισμούς στον τομέα του περιβαλλοντικού δικαίου εντός της Ευρωπαϊκής Ένωσης (π.χ. στη Γερμανία), τέσσερις βασικές αρχές αποτελούν τη βάση για όλες τις διαδικασίες νομοθετικής περιβαλλοντικής νομοθεσίας σχετικά με την αρχή της προφύλαξης, την αρχή «ο ρυπαίνων πληρώνει», της αειφόρου ανάπτυξης (που αφορά την ενσωμάτωση της προστασίας του περιβάλλοντος και της οικονομικής ανάπτυξης) και την αρχή της συνεργασίας.

Συχνά αναφέρονται και άλλες αρχές, οι οποίες συμπληρώνουν τις τέσσερις βασικές αρχές ή τις ορίζουν με συγκεκριμένο τρόπο. Μερικά παραδείγματα είναι τα περιβαλλοντικά διαδικαστικά δικαιώματα, οι κοινές αλλά διαφοροποιημένες ευθύνες, η ισότητα διεθνών και γενεών, η κοινή ανησυχία της ανθρωπότητας και η κοινή κληρονομιά.

Αρχή προφύλαξης

Στην προέλευσή του, η αρχή της προφύλαξης είναι μάλλον πολιτική παρά φιλοσοφική και εισήχθη για πρώτη φορά ως «αρχή προφύλαξης» στη γερμανόφωνη περιοχή. Ενσωματώθηκε σε πολλά εθνικά νομικά κείμενα και διεθνείς συνθήκες ή δηλώσεις. Ο Per Sandin έδωσε έναν καλό ορισμό: «Το βασικό μήνυμα της αρχής της προφύλαξης είναι ότι σε ορισμένες περιπτώσεις, πρέπει να ληφθούν μέτρα κατά ενός πιθανού κινδύνου, ακόμη και αν τα διαθέσιμα στοιχεία δεν επαρκούν για να αντιμετωπίσουν την ύπαρξη αυτού του κινδύνου ως επιστημονικό γεγονός .. ” Ως εκ τούτου, μπορεί να δηλωθεί ότι η αρχή της προφύλαξης βασίζεται στην ανίχνευση κινδύνων και στην επιστημονική αβεβαιότητα. Κατά συνέπεια, το βάρος της απόδειξης (ότι μια ενέργεια μπορεί να προκαλέσει σοβαρή βλάβη στο κοινό ή το περιβάλλον) βαρύνει αυτούς που επικαλούνται μέτρα για την πρόληψη μιας τέτοιας βλάβης. Κάθε φορά που κάποιος μπορεί να προβλέψει εύλογη βλάβη για την κοινωνία ή το περιβάλλον, πρέπει να εφαρμόζεται η αρχή της προφύλαξης. Αλλά συχνά δεν είναι σαφές εάν μια προγραμματισμένη ενέργεια θα προκαλέσει βλάβη στο κοινό ή το περιβάλλον ή όχι, επειδή ο πιθανός αντίκτυπος των ανθρώπινων ενεργειών στο περιβάλλον ή την ανθρώπινη υγεία εξαρτάται συχνά από τη δυναμική των πολύπλοκων συστημάτων, οπότε οι πραγματικές συνέπειες των ενεργειών μπορεί να είναι απρόβλεπτο. Επομένως απαιτείται περαιτέρω επιστημονική έρευνα – αλλά και προσοχή εάν μια τρέχουσα δράση επεμβαίνει σε πολύπλοκα (ανθρώπινα ή φυσικά) συστήματα.

Σήμερα η αρχή της προφύλαξης έχει ενσωματωθεί σε πολλές ευρωπαϊκές και διεθνείς συμβάσεις και συνθήκες. Στην Έκθεση του 1976 για το Περιβάλλον, για παράδειγμα, η Γερμανική Ομοσπονδιακή Κυβέρνηση περιγράφει την αρχή της προφύλαξης ως εξής: Η περιβαλλοντική πολιτική δεν περιορίζεται στην αποφυγή επικείμενου κινδύνου και την αποκατάσταση ζημιών που έχουν ήδη συμβεί. Η προληπτική περιβαλλοντική πολιτική απαιτεί επιπλέον να προστατεύεται και να αντιμετωπίζεται με προσοχή το φυσικό περιβάλλον. Η αρχή της προφύλαξης ενσωματώνεται σε μια σειρά περιβαλλοντικών διατάξεων και περιλαμβάνει επίσης τη διατήρηση των πόρων εκτός από την προφύλαξη κινδύνου.

Η αρχή της προφύλαξης είναι ιδιαίτερα σημαντική σε νομικούς κανονισμούς και αποφάσεις σχετικά με πιθανούς κινδύνους για τη δημόσια υγεία, όπως η εμπορία γενετικά τροποποιημένων τροφίμων, η χρήση αυξητικών ορμονών στην εκτροφή βοοειδών ή τα μέτρα πρόληψης της ασθένειας της «τρελής αγελάδας».

Παρ ‘όλα αυτά, σε πραγματικές περιπτώσεις, οι υπεύθυνοι χάραξης πολιτικής συχνά αντιμετωπίζουν την έλλειψη έγκυρης επιστημονικής πληροφορίας ή τις ανεπανόρθωτες συγκρούσεις μεταξύ των συμφερόντων των διαφόρων ενδιαφερομένων. Μερικές φορές είναι πολύ δύσκολο να εκτιμηθεί ή να εκτιμηθεί η πιθανή ζημιά και να βρεθεί ένας αποδεκτός πολιτικός συμβιβασμός. Ωστόσο, η αυστηρή εφαρμογή της αρχής της προφύλαξης πρέπει να αποφεύγεται όταν δεν υπάρχει επαρκής γνώση για το εάν υπάρχει πραγματικός δυνητικός κίνδυνος από ένα καινοτόμο προϊόν ή μια δραστηριότητα ή όχι. Σε αυτήν την περίπτωση, η αρχή θα μπορούσε να ληφθεί άπειρα ως απόλυτη απαγόρευση όλων των ενεργειών – η οποία θα μπορούσε να σταματήσει κάθε τεχνολογική καινοτομία και πρόοδο.

Αρχή ρυπαίνων πληρώνει (έναντι αρχής κοινότητας πληρώνει)

Η αρχή «ο ρυπαίνων πληρώνει» αναφέρει ότι αυτός που προκαλεί περιβαλλοντικές επιπτώσεις θεωρείται κυρίως υπεύθυνος-υλικά και οικονομικά-για την προστασία του περιβάλλοντος και απαιτείται για την πρόληψη, διόρθωση ή οικονομική αντιστάθμιση αυτών των επιπτώσεων. Αλλά ένα πρόβλημα προκύπτει σε περιπτώσεις κληρονομικής ρύπανσης όπου τα υπεύθυνα μέρη συχνά δεν μπορούν να θεωρηθούν υπεύθυνα και – εάν κανένα άλλο μέρος δεν μπορεί να θεωρηθεί υπεύθυνο – το ευρύ κοινό πρέπει να αναλάβει το κόστος. Σε τέτοιες περιπτώσεις, η αρχή «ο ρυπαίνων πληρώνει» θα αντικατασταθεί από την αρχή «πληρώνει η κοινότητα».

Στο περιβαλλοντικό δίκαιο, η αρχή «ο ρυπαίνων πληρώνει» θεσπίζεται για να καταστήσει το υπεύθυνο μέρος για την παραγωγή ρύπανσης υπεύθυνο για την καταβολή των ζημιών στο φυσικό περιβάλλον. Θεωρείται ως γενικό έθιμο λόγω της ισχυρής υποστήριξης που έχει λάβει στις περισσότερες χώρες του Οργανισμού Οικονομικής Συνεργασίας και Ανάπτυξης (ΟΟΣΑ) και της Ευρωπαϊκής Κοινότητας (ΕΚ). Στο διεθνές περιβαλλοντικό δίκαιο αναφέρεται στην Αρχή 16 της Διακήρυξης του Ρίο για το Περιβάλλον και την Ανάπτυξη (1992).

Η αρχή «ο ρυπαίνων πληρώνει» αποτελεί σημαντικό στοιχείο της περιβαλλοντικής πολιτικής και επηρεάζει, για παράδειγμα, πολιτικά μέτρα για τη μείωση των εκπομπών αερίων θερμοκηπίου. Συχνά αυτή η αρχή θα εφαρμοστεί ως η λεγόμενη «εκτεταμένη ευθύνη για τους ρύπους» (EPR). Αυτή η ιδέα πιθανότατα διατυπώθηκε για πρώτη φορά από τη σουηδική κυβέρνηση το 1975. Για παράδειγμα, το EPR μπορεί να βοηθήσει στην μετατόπιση της ευθύνης για την αντιμετώπιση των αποβλήτων από τις κυβερνήσεις και τους φορολογούμενους στους πραγματικούς παραγωγούς των αποβλήτων. Ο ΟΟΣΑ ορίζει το EPR ως: μια έννοια όπου οι κατασκευαστές και οι εισαγωγείς προϊόντων θα πρέπει να φέρουν σημαντικό βαθμό ευθύνης για τις περιβαλλοντικές επιπτώσεις των προϊόντων τους καθ ‘όλη τη διάρκεια του κύκλου ζωής του προϊόντος, συμπεριλαμβανομένων των αντίθετων επιπτώσεων που είναι εγγενείς στην επιλογή των υλικών για τα προϊόντα, επιπτώσεις από τους κατασκευαστές «η ίδια η διαδικασία παραγωγής και οι μεταγενέστερες επιπτώσεις από τη χρήση και τη διάθεση των προϊόντων. Οι παραγωγοί αποδέχονται την ευθύνη τους όταν σχεδιάζουν τα προϊόντα τους για την ελαχιστοποίηση των περιβαλλοντικών επιπτώσεων του κύκλου ζωής και όταν αποδέχονται νομική, φυσική ή κοινωνικοοικονομική ευθύνη για περιβαλλοντικές επιπτώσεις που δεν μπορούν να εξαλειφθούν με σχεδιασμό.

Η αρχή της βιωσιμότητα (βιώσιμη ανάπτυξη)

Μια άλλη σημαντική αρχή είναι η αρχή της αειφόρου ανάπτυξης, η οποία μπορεί να θεωρηθεί ως παράδειγμα εφαρμογής της αρχής της προφύλαξης στους πόρους. Αυτή η αρχή είναι ένα πρότυπο χρήσης πόρων που στοχεύει στην κάλυψη των ανθρώπινων αναγκών διατηρώντας παράλληλα το περιβάλλον, έτσι ώστε αυτές οι ανάγκες να μπορούν να καλυφθούν όχι μόνο στο παρόν, αλλά και στις μελλοντικές γενιές. Για πρώτη φορά, ο όρος «βιώσιμη ανάπτυξη» χρησιμοποιήθηκε από την Επιτροπή Brundtland (1987), η οποία έδωσε τον πιο διάσημο ορισμό της βιώσιμης ανάπτυξης ως ανάπτυξη που «ικανοποιεί τις ανάγκες του παρόντος χωρίς να θέτει σε κίνδυνο την ικανότητα των επόμενων γενεών να ανταποκριθούν τις δικές τους ανάγκες »(Ηνωμένα Έθνη 1987).

Ο όρος «βιώσιμη ανάπτυξη» επιδιώκει να συνδυάσει τους πόρους και τις διαδικασίες των φυσικών συστημάτων με τις ανθρώπινες ανάγκες και τις οικονομικές δραστηριότητες των κοινωνικών συστημάτων. Δη στη δεκαετία του 1970 ο όρος «βιωσιμότητα» είχε χρησιμοποιηθεί για μια οικονομία «σε ισορροπία με βασικά συστήματα οικολογικής υποστήριξης». Με βάση την ιδέα της βιωσιμότητας και σύμφωνα με τις ανησυχητικές θέσεις του “The Limits to Growth” πολλοί οικολόγοι προσπάθησαν να δημιουργήσουν τη νέα έννοια της “σταθερής κρατικής οικονομίας”, ειδικά σε σχέση με περιβαλλοντικές ανησυχίες. Στο πλαίσιο αυτό, η «βιώσιμη ανάπτυξη» δεν αναφέρεται μόνο σε περιβαλλοντικά ζητήματα, αλλά λαμβάνει επίσης υπόψη κοινωνικές και οικονομικές εκτιμήσεις: την επίλυση συγκρούσεων μεταξύ διαφορετικών ανταγωνιστικών στόχων και ενδιαφερομένων και την εναρμόνιση της οικονομικής ανάπτυξης και της κοινωνικής ευημερίας με την περιβαλλοντική ποιότητα. Η έννοια της αειφόρου ανάπτυξης-τόσο της φύσης όσο και της κοινωνίας-επισημαίνει ότι η επιβίωση της ανθρωπότητας εξαρτάται ουσιαστικά από την επιβίωση της φύσης (ή του φυσικού περιβάλλοντος), επειδή η οικονομική και κοινωνικο-πολιτιστική ευημερία συνδυάζεται άμεσα με την ευημερία της φύσης- πόροι, φυτά, ζώα κλπ. Τελικά, η εκμετάλλευση και η υποβάθμιση της φύσης μπορεί να οδηγήσει στην αδυναμία διατήρησης της ανθρώπινης ζωής και ακόμη και στην εξαφάνιση της ανθρωπότητας. Η θεωρία της βιώσιμης ανάπτυξης βασίζεται επομένως στην υπόθεση ότι οι κοινωνίες πρέπει να διαχειρίζονται τρεις μορφές μη υποκατάστατου κεφαλαίου: το οικονομικό, το κοινωνικό και το φυσικό κεφάλαιο.

Μπορεί να βρίσκουμε τρόπους να αντικαταστήσουμε κάποιους φυσικούς πόρους, αλλά είναι απίθανο να μπορέσουμε ποτέ να αντικαταστήσουμε τις υπηρεσίες που παρέχει το οικοσύστημα: για παράδειγμα, για να μας προστατεύσει από την επικίνδυνη κοσμική ακτινοβολία με ένα άθικτο στρώμα όζοντος , ή να μας τροφοδοτήσει με αρκετό οξυγόνο όπως κάνουν τα τροπικά δάση ή τα φύκια των ωκεανών. Η πολυλειτουργικότητα πολλών φυσικών πόρων και επίσης η βιοποικιλότητα είναι αναντικατάστατες. Επιπλέον, η υποβάθμιση των φυσικών πόρων και η απώλεια φυσικών υπηρεσιών (π.χ. η απορρόφηση θρεπτικών συστατικών από μια λίμνη) είναι συχνά μη αναστρέψιμες διαδικασίες – όπως η απώλεια της εθνοτικής και πολιτιστικής πολυμορφίας (π.χ. γηγενείς γλώσσες). Συνεπώς, μόνο μια βιώσιμη ανάπτυξη μπορεί να εξασφαλίσει και τα δύο: την προστασία ενός λειτουργικού άθικτου περιβάλλοντος και την επιβίωση και ευημερία των ανθρώπων.

Αρχή της συνεργασίας

«Η αρχή της συνεργασίας υπογραμμίζει ότι η προστασία του περιβάλλοντος είναι ευθύνη όλης της κοινωνίας και όχι μόνο του κράτους: κατά συνέπεια, όλα τα μέρη της κοινωνίας και του κράτους καλούνται να συνεργαστούν» (Knopp 2008: 49) Η αρχή της συνεργασίας είναι η πιο αδύναμη τις τέσσερις περιβαλλοντικές αρχές, και δύσκολα μπορεί να θεωρηθεί ότι πληροί τις απαιτήσεις που απαιτούνται από μια κατευθυντήρια αρχή του δικαίου.

Άλλες αρχές στο εθνικό και διεθνές περιβαλλοντικό δίκαιο

Εκτός από τις τέσσερις βασικές αρχές, υπάρχουν πολλές άλλες που καθοδηγούν το εθνικό και διεθνές περιβαλλοντικό δίκαιο, όπως η «αρχή του παππού» ή η «αρχή ότι η δράση δεν μπορεί να οδηγήσει σε σημαντική επιδείνωση των περιβαλλοντικών συνθηκών». Τελευταίο αλλά όχι λιγότερο σημαντικό, θα πρέπει επίσης να αναφέρουμε την αρχή της διασυνοριακής προστασίας του περιβάλλοντος: αυτή η αρχή αντικατοπτρίζει τη διορατικότητα ότι τα περιβαλλοντικά προβλήματα δεν σταματούν στα εθνικά σύνορα. Για παράδειγμα, αυτή η αρχή στηρίζει μεγάλο μέρος της οδηγίας-πλαισίου για τα ύδατα της Ευρωπαϊκής Ένωσης, όπου καλύπτει τη διασυνοριακή διαχείριση των υδάτινων πόρων στις φυσικές λεκάνες απορροής ποταμών.

Οι εθνικοί καθώς και οι διεθνείς περιβαλλοντικοί νόμοι συχνά βασίζονται στις προαναφερόμενες αρχές, ιδίως στην αρχή των διασυνοριακών. Αυτό είναι σημαντικό, επειδή πολλά περιβαλλοντικά προβλήματα είναι προβλήματα διέλευσης συνόρων, για παράδειγμα, η κλιματική αλλαγή, το θαλασσινό νερό και η ατμοσφαιρική ρύπανση.

Ρύθμιση Περιβαλλοντικής Συμπεριφοράς

Μέσα για την επιβολή της περιβαλλοντικής πολιτικής (σχεδιασμός)

Η περιβαλλοντική πολιτική αναπτύχθηκε στις βιομηχανικές χώρες κυρίως ως αντίδραση στην ιδιαίτερα εντατική ανάπτυξη της περιβαλλοντικής βιομηχανίας στις αρχές της δεκαετίας του 1970 σε ειδικές κυβερνητικές υπηρεσίες. Στην αρχή η πολιτική περιορίστηκε κυρίως στη δραστηριότητα του κράτους. Με την πάροδο των ετών, ωστόσο, όλο και περισσότεροι πρωταγωνιστές με οποιοδήποτε ενδιαφέρον στον τομέα του περιβάλλοντος (τα λεγόμενα «ενδιαφερόμενα μέρη») καλούνται να λογοδοτήσουν σε περιβαλλοντικά θέματα. Ειδικότερα, η ευθύνη του παραγωγού (πιθανών) περιβαλλοντικών προβλημάτων γίνεται όλο και πιο σημαντική. Υπάρχει επίσης ανάγκη άσκησης οικοπολιτικών στόχων και στρατηγικών σε άλλα τμήματα, για παράδειγμα, στην πολιτική για την ενέργεια, τις μεταφορές και τη βιομηχανία, τη γεωργία και την οικοδόμηση και τις κατασκευές. Υπάρχουν «σκληρά» οικοπολιτικά μέσα (όπως νόμοι και κανονισμοί) παράλληλα με τις «ήπιες» μεθόδους ελέγχου της συμπεριφοράς (όπως η εκπαίδευση μηχανικών σχετικά με την περιβαλλοντική ευαισθητοποίηση), για παράδειγμα, στην περίπτωση έργων που αφορούν πολλά ιδιωτικά ενδιαφερόμενα μέρη ή το κοινό.

Εκτός από το περιβαλλοντικό δίκαιο, οι μορφές περιβαλλοντικού σχεδιασμού είναι ένα κεντρικό σύνολο εργαλείων στο βαθμό που η περιβαλλοντική πολιτική προσπαθεί να λειτουργήσει όχι μόνο ως ρυθμιστικό αλλά και ως διαμορφωτικό μέσο. Ο περιβαλλοντικός σχεδιασμός μπορεί να θεωρηθεί ως ανάπτυξη βιώσιμων περιβαλλοντικών στρατηγικών για τη διευκόλυνση της επίτευξης περιφερειακών ή τομεακών στόχων για την προστασία του περιβάλλοντος εντός συγκεκριμένου χρονικού πλαισίου, για παράδειγμα, τη μείωση των εκπομπών CO2 κατά 25% μέσα στα επόμενα δέκα χρόνια. Στη δεκαετία του 1980 η εφαρμογή εθνικών περιβαλλοντικών σχεδίων στη Δανία, τις Κάτω Χώρες και τη Φινλανδία έπαιξε έναν πρωτοποριακό ρόλο σε αυτό. Ως εκ τούτου, θα επεκταθούμε πρώτα στις δυνατότητες του περιβαλλοντικού σχεδιασμού.

Για την επιβολή των αρχών και των στόχων της περιβαλλοντικής πολιτικής, δύο νομικά μέσα εφαρμόζονται στο νομικό πλαίσιο πολλών κρατών εντός της ΕΕ, που σημαίνει διαφορετικούς τύπους περιβαλλοντικού σχεδιασμού και διαφορετικά μέτρα για τη ρύθμιση της περιβαλλοντικής συμπεριφοράς.

Ο περιβαλλοντικός σχεδιασμός παρέχει ένα σημαντικό μέσο προληπτικής προστασίας. Ο προγραμματισμός πραγματοποιείται ως διαδικασία πολλαπλών σταδίων, που περιλαμβάνει την καταγραφή της τρέχουσας κατάστασης και την πρόβλεψη των μελλοντικών εξελίξεων. Επιπλέον, πρέπει να λάβει υπόψη πιθανές συγκρούσεις συμφερόντων.

Τα σχέδια μπορούν να λάβουν τη μορφή νόμων, νόμιμων κανονισμών, καταστατικών, διοικητικών κανονισμών ή διοικητικών πράξεων, καθένα από τα οποία έχει διαφορετικές νομικές συνέπειες. Επιπλέον, ο περιβαλλοντικός σχεδιασμός μπορεί να περιλαμβάνει ολοκληρωμένο σχεδιασμό ή τομεακό σχεδιασμό. Δύο μορφές περιβαλλοντικού σχεδιασμού κυριαρχούν, ο ολοκληρωμένος σχεδιασμός. Το καθήκον του συνολικού σχεδιασμού είναι «να καθορίσει, κατά την άσκηση προνοητικότητας, τη χρήση γης για οικιστικούς, οικονομικούς και ψυχαγωγικούς σκοπούς για μια συγκεκριμένη περιοχή, ανεξάρτητα από οποιοδήποτε συγκεκριμένο έργο και δεν περιορίζεται σε συγκεκριμένο τομέα» και τον τομεακό σχεδιασμό. Αντίθετα, ο τομεακός σχεδιασμός χρησιμεύει για την κατάρτιση σχεδίων προστασίας του περιβάλλοντος για συγκεκριμένους τομείς, κυρίως τοπίο, καθαρό αέρα, μείωση θορύβου, εξοικονόμηση νερού και διαχείριση αποβλήτων, τα οποία απαιτούν πρόσθετα μέτρα επιβολής

Ένα άλλο σημαντικό μέσο για την επιβολή απαιτήσεων περιβαλλοντικής πολιτικής είναι η εκτίμηση περιβαλλοντικών επιπτώσεων (ΜΠΕ). Ο πρωταρχικός στόχος αυτού του μέσου είναι «η πλήρης και έγκαιρη ενημέρωση της διοίκησης για τις περιβαλλοντικές επιπτώσεις περιβαλλοντικά σημαντικών έργων» η ΜΠΕ χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό, την περιγραφή και την αξιολόγηση όλων των άμεσων και έμμεσων επιπτώσεων ενός προγραμματισμένου έργου στο περιβάλλον, συμπεριλαμβανομένων των οικολογικών αλληλεπιδράσεων, εγκαίρως, επιτρέποντας έτσι τη λήψη προληπτικών μέτρων σε όλα τα μέσα και τους τομείς, και τη συμμετοχή του κοινού.

Μέσα ρύθμισης της περιβαλλοντικής συμπεριφοράς

Η περιβαλλοντική συμπεριφορά είναι ίσως ο σημαντικότερος στόχος για την περιβαλλοντική πολιτική και εκπαίδευση. Υπάρχουν διάφορα μέσα για τη ρύθμιση της περιβαλλοντικής συμπεριφοράς, τα οποία μπορούν να διακριθούν ως άμεσες ή έμμεσες μορφές ρύθμισης: ως (1) άμεση ρύθμιση και (2) έμμεση ρύθμιση της συμπεριφοράς.

Άμεση ρύθμιση της συμπεριφοράς

Η άμεση ρύθμιση της συμπεριφοράς αφορά νομικά μέτρα που έχουν σχεδιαστεί για να επηρεάζουν άμεσα την περιβαλλοντική συμπεριφορά. Το παραδοσιακό μέσο αυτού του τύπου είναι το περιβαλλοντικό κανονιστικό δίκαιο, «το οποίο προέρχεται από το αστυνομικό και κανονιστικό δίκαιο και γενικά τιμωρεί τη μη συμμόρφωση με την επιβολή κυρώσεων». Κατά συνέπεια, οι ενέργειες με δυσμενείς περιβαλλοντικές επιπτώσεις υπόκεινται σε διοικητικό έλεγχο, ο οποίος χαρακτηρίζεται από νομικές απαιτήσεις κοινοποίησης, καταχώρισης, αδειοδότησης, εξουσιοδότησης, έγκρισης και άλλων διαδικασιών χορήγησης άδειας για την ανάληψη τέτοιας δραστηριότητας. Επιπλέον, η άμεση ρύθμιση ασκείται επίσης μέσω ρητής απαγόρευσης ή απαίτησης ορισμένης συμπεριφοράς από το νόμο.

Οι απόλυτες νομικές απαγορεύσεις (π.χ. στη Γερμανία σύμφωνα με τον Ομοσπονδιακό Νόμο για την Προστασία της Φύσης, 2002, §§ 23 [2], 42 [1] και [2]), απαγορεύουν άμεσα ορισμένες συμπεριφορές με δυσμενείς επιπτώσεις στο περιβάλλον. Ωστόσο, οι νομοθέτες σπάνια χρησιμοποιούν μέτρα αυτού του τύπου. Αντίθετα, οι διαδικασίες αδειοδότησης αποτελούν το βασικό μέσο στην τρέχουσα περιβαλλοντική κανονιστική νομοθεσία σε πολλά ευρωπαϊκά κράτη. Τα έργα που υπόκεινται σε άδεια απαγορεύονται αυστηρά χωρίς άδεια. «Η ανέγερση ή λειτουργία εγκατάστασης περιβαλλοντικής σημασίας, η χρήση περιβαλλοντικών μέσων ή η παραγωγή και διανομή ορισμένων προϊόντων ενδέχεται να υπόκεινται σε άδεια». Επομένως, η άδεια αποτελεί συστατική διοικητική πράξη, δεδομένου ότι παρέχει στον αιτούντα το δικαίωμα να ασκεί νόμιμα μια κατά τα άλλα απαγορευμένη δραστηριότητα. Το περιβαλλοντικό δίκαιο περιλαμβάνει μια σειρά από αποκαλούμενες περιβαλλοντικές υποχρεώσεις, εκ των οποίων οι βασικές υποχρεώσεις έχουν ιδιαίτερη σημασία. Επιβάλλουν ορισμένες υποχρεώσεις είτε σε όλους είτε σε μια συγκεκριμένη ομάδα ανθρώπων. Κανονικά, αυτές οι βασικές υποχρεώσεις περιλαμβάνουν προληπτικά και προληπτικά μέτρα, κυρίως τη διατήρηση πόρων (π.χ. νερό ή έδαφος). Εκτός από αυτές τις βασικές υποχρεώσεις, υπάρχουν «πολλές παράπλευρες υποχρεώσεις που μπορούν να ωφελήσουν το περιβάλλον, όπως υποχρεώσεις προώθησης και απόδοσης, υποχρεώσεις παρακολούθησης και προστασίας, υποχρεώσεις συνεργασίας και διαρκούς αποκάλυψης πληροφοριών, οργανωτικές υποχρεώσεις και υποχρεώσεις ανοχής ορισμένων ενεργειών.

Έμμεση ρύθμιση της συμπεριφοράς

Η έμμεση ρύθμιση της συμπεριφοράς δεν βασίζεται σε κανόνες που επιβάλλουν τη συμπεριφορά, αλλά στοχεύει να επηρεάσει τα κίνητρα: παρέχονται κίνητρα για φιλική προς το περιβάλλον συμπεριφορά αφήνοντας διακριτική ευχέρεια στον αποδέκτη. Τα μέσα έμμεσης συμπεριφοράς ρύθμισης περιλαμβάνουν κυρίως ενημερωτικά μέσα, οικονομικά μέσα, όπως πιστοποιητικά εισφορών και επιδοτήσεις.

Πληροφορίες, εκκλήσεις και προειδοποιήσεις, σημαίνει ότι σύμφωνα με τον γερμανικό νόμο για τις περιβαλλοντικές πληροφορίες (1994), η παροχή δωρεάν πρόσβασης σε περιβαλλοντικές πληροφορίες θεωρείται μέσο ενίσχυσης της ευαισθητοποίησης των πολιτών και των δημόσιων αρχών για την ανάγκη αποτελεσματικής προστασίας του περιβάλλοντος. Αυτά τα μέσα ευαισθητοποίησης για το περιβάλλον κυμαίνονται από πολιτικές και ηθικές εκκλήσεις έως προειδοποιήσεις, συστάσεις και άλλες μορφές πληροφοριών, όπως ετικέτες και πληροφορίες προϊόντων και χρήσης. Τα πιο σημαντικά μέσα για την έμμεση ρύθμιση της συμπεριφοράς είναι οι περιβαλλοντικές εισφορές. «Τοποθετούν ένα τίμημα στη χρήση του περιβάλλοντος και το αφήνουν στους συμμετέχοντες στην αγορά να αποφασίσουν εάν και πώς θα αντιδράσουν με βάση τις ατομικές αναλύσεις κόστους -οφέλους». Στην πράξη, η αδυναμία να επηρεάσει με ακρίβεια τη συμπεριφορά μέσω περιβαλλοντικών εισφορών μπορεί να δημιουργήσει πρόβλημα. Εάν είναι πολύ χαμηλά, οι ρυπαίνοντες θα επιλέξουν να πληρώσουν την εισφορά αντί να αλλάξουν τη συμπεριφορά που είναι επιβλαβής για το περιβάλλον. Εάν οι εισφορές καθοριστούν πολύ υψηλές, ενδέχεται να εμποδίσουν την οικονομική ανταγωνιστικότητα. Για παράδειγμα, οι ακόλουθες επιβαρύνσεις για το περιβάλλον επιβάλλονται στη Γερμανία το 2012, για παράδειγμα τέλη λυμάτων, αντισταθμιστικά τέλη βάσει του νόμου περί προστασίας της φύσης και τέλη προστασίας των δασών σε διάφορα γερμανικά κράτη, τέλη άντλησης νερού σε ορισμένα γερμανικά κράτη («δεκάρα νερού») και τα τέλη μεταφοράς αποβλήτων (καταναλωτικό δίκαιο).

Οι περιβαλλοντικές εισφορές μπορεί να επιβάλλονται ως φόροι, τέλη και εισφορές για παροχές που προκύπτουν, και ειδικές εισφορές. Η παροχή πλεονεκτημάτων στους χρήστες φιλικών προς το περιβάλλον προϊόντων σημαίνει «Οφέλη για χρήση», οι διατάξεις που χαλαρώνουν ή άρουν τους γενικούς περιορισμούς που επιβάλλονται στη χρήση επιβλαβών για το περιβάλλον προϊόντων στην περίπτωση προϊόντων που πληρούν πρότυπα που, αν και δεν απαιτούνται από το νόμο, θεωρείται επιθυμητό, ​​καθιστώντας έτσι ένα τέτοιο προϊόν πιο φιλικό προς το περιβάλλον από άλλα του ίδιου είδους. «Αν και αυτό το μέσο δεν περιλαμβάνει οικονομικά κίνητρα μεσοπρόθεσμα και μακροπρόθεσμα, ενδέχεται να αναμένονται αλλαγές στη συμπεριφορά των καταναλωτών που μπορεί να οδηγήσουν σε συσσώρευση περιβαλλοντικά πιο επιβλαβών προϊόντων εκτός αγοράς».

Or τις επιδοτήσεις, αυτό σημαίνει ότι η παροχή οικονομικής βοήθειας είναι μια μορφή έμμεσης ρύθμισης της συμπεριφοράς. Οι επιδοτήσεις είναι χρηματικές ή μη χρηματικές παροχές που χορηγούνται από το κράτος, χωρίς κανένα προϊόν ή υπηρεσία να παρέχεται ως αντάλλαγμα. Οι επιδοτήσεις αντιμετωπίζονται γενικά με σκεπτικισμό, καθώς θεωρούνται επιρρεπείς σε κατάχρηση και επιβαρύνουν το ευρύ κοινό το κόστος της προστασίας του περιβάλλοντος. Στην Ευρωπαϊκή Ένωση υπήρξε μια τάση περικοπής των επιδοτήσεων για την προστασία του περιβάλλοντος.

Και τέλος η ιδέα των περιβαλλοντικών πιστοποιητικών βασίζεται σε μια συμβατή με την αγορά μορφή ελέγχου ποσότητας από το κράτος. Τα συστήματα που βασίζονται σε πιστοποιητικά δεν λαμβάνουν τις τιμές ως αφετηρία, αλλά ορίζουν ένα αποδεκτό επίπεδο για μια μελλοντική ποσοτική χρήση του περιβάλλοντος, αφήνοντας το σχηματισμό της διαδικασίας στην αγορά. Το μέσο αυτό έχει χρησιμοποιηθεί για την προστασία του κλίματος σύμφωνα με το πρωτόκολλο του Κιότο. Τα κατανεμημένα δικαιώματα εκπομπών παρέχουν στον κάτοχο το δικαίωμα μόλυνσης του περιβάλλοντος μόνο σε ορισμένο βαθμό. Σε περίπτωση που ο κάτοχος μολύνει το περιβάλλον σε μικρότερο βαθμό από τον επιτρεπόμενο, ο κάτοχος μπορεί να πουλήσει τα αχρησιμοποίητα δικαιώματα ρύπανσης σε άλλον ρυπαίνοντα. «Οι επιχειρήσεις μπορούν έτσι να επιλέξουν είτε να μειώσουν τις εκπομπές από τις εγκαταστάσεις τους είτε να αποκτήσουν πρόσθετα δικαιώματα εκπομπής από άλλες επιχειρήσεις που μπόρεσαν να μειώσουν τις εκπομπές με χαμηλότερο κόστος». Η μελλοντική εμπειρία θα δείξει εάν αυτό το μέσο θα αποδειχθεί όντως επιτυχές στη μείωση των εκπομπών αερίων θερμοκηπίου. Τα οικονομικά μέσα αποκτούν αυξανόμενη σημασία ως συμπλήρωμα της περιβαλλοντικής κανονιστικής νομοθεσίας. Δεν υπάρχει ενιαία απάντηση στο ερώτημα ποια είναι στην πραγματικότητα η «σωστή» επιλογή μέσων για την επίτευξη επαρκούς ισορροπίας μεταξύ των διαφόρων συμφερόντων των χρηστών του περιβάλλοντος, των συμφερόντων των πληγέντων γειτόνων, των συμφερόντων του κοινού και της προστασίας των περιβάλλον. Ως εκ τούτου, οι νομοθέτες και οι διοικήσεις αναγκάζονται να βασίζονται σε δοκιμές και λάθη για να λάβουν την κατάλληλη απόφαση.

Η Πολυδιάστατη Στρατηγική της Βιωσιμότητας

Η κοινωνική δικαιοσύνη, η ευημερία και η ειρήνη, με τη φύση να ξεπερνά τις παγκόσμιες κρίσεις, θα θεωρηθούν ως τρεις αλληλένδετοι και εξίσου σταθμισμένοι στόχοι βιωσιμότητας. Αλλά παραμένει ασαφές πώς να καταστεί μια πολυδιάστατη στρατηγική βιωσιμότητας πολιτικά βιώσιμη σε μεμονωμένες χώρες καθώς και στην παγκόσμια κοινότητα. Υπάρχει όντως ένας μεγάλος κίνδυνος αυτή η πολλά υποσχόμενη κοινωνική στρατηγική να καταλήξει κοντά στην ουτοπία και την ευχή που βασίζεται μόνο σε ηθικούς κανονιστικούς λόγους.

Μια ολοκληρωμένη στρατηγική βιωσιμότητας με την ολοκληρωμένη έννοια αφορά πρώτα απ ‘όλα το συντονισμό των διαφορετικών κανονιστικά βασισμένων προοπτικών ζωής ατόμων, κοινωνικών ομάδων, εθνών, σημερινών και μελλοντικών γενεών. Στη διαδικασία αναζήτησης και διαμόρφωσης μιας παγκόσμιας βιώσιμης ανάπτυξης, θα πρέπει να επιτευχθούν αναρίθμητες συμφωνίες, τόσο εντός της κοινωνίας όσο και διεθνώς, οι οποίες θα πρέπει να είναι ηθικά παρακινητικές για όλους τους εμπλεκόμενους φορείς. Τόσο παρακινητικό, στην πραγματικότητα, που αυτές οι συμφωνίες θα μπορούσαν να αποκτήσουν ένα βαθμό δεσμευτικής ισχύος που θα επέτρεπε σε τυχόν παραβιάσεις των συμφωνιών να τιμωρούνται με κυρώσεις. Συνεπώς, η επίτευξη συναίνεσης υπερβαίνει τον απλό συντονισμό διαφορετικών, κανονιστικά βασισμένων προοπτικών: μάλλον, προϋποθέτει ένα γενικά αποδεκτό ηθικό πλαίσιο καθώς και αρχές και πρότυπα που ισχύουν ηθικά για όλους τους συμμετέχοντες. Με άλλα λόγια: Η αειφορία χρειάζεται μια ηθικά κατάλληλη, πολιτικά βιώσιμη και πλουραλιστική ηθική καθοδήγησης που είναι κοινωνικά και χωρικά και χρονικά υπερβατική, που έχει υψηλό επίπεδο αποδοχής συγκρίσιμο με τις θεμελιώδεις ελευθερίες, και που επιτρέπει να αναπτυχθούν λειτουργικά και στοχευμένα, λεπτομερή πρότυπα για οικολογικές, οικονομικές, κοινωνικές, πολιτικές και πολιτιστικές διαστάσεις βιωσιμότητας. Ωστόσο, αυτή η ηθική έλειπε μέχρι τώρα.

Ακριβώς λόγω της έλλειψης αποδεκτής ηθικής βιωσιμότητας, η αβεβαιότητα της διαμόρφωσης κανόνων κοινωνικής και οικονομικής βιωσιμότητας και αιτιολόγησης ηθικά συναινετικών βημάτων παραμένει πολύ υψηλή. Επιπλέον, η έλλειψη αποδεκτής και περιεκτικής ηθικής βιωσιμότητας ευνοεί την τρέχουσα κυριαρχία μονοδιάστατων, οικολογικο-οικονομικών προβληματισμών στη συζήτηση για τη βιωσιμότητα και ταυτόχρονα εμποδίζει το συντονισμό, τη συνεργασία και την αμοιβαία προσαρμογή των πολλά υποσχόμενων ουσιαστικά ολοκληρωμένων προσεγγίσεων βιωσιμότητας και αυτών αντίστοιχους στόχους.

Η συζήτηση για την ηθική, η οποία διεξήχθη αρχικά ανεξάρτητα από τη συζήτηση για τη βιωσιμότητα, δεν έχει δώσει ακόμη κάποια αποφασιστική ώθηση, αν και οι μη αναστρέψιμες συνέπειες της επιστημονικής και τεχνολογικής ανάπτυξης έχουν προκαλέσει μια ζωηρή ηθική συζήτηση σχετικά με την ευθύνη του παρόντος απέναντι στις μελλοντικές γενιές. Στη συζήτηση αυτή ακολούθησε η συζήτηση για την οικολογική δικαιοσύνη και, πιο πρόσφατα, για τη βιωσιμότητα. Όπως είναι κατανοητό, το πρώτο βήμα σε αυτήν τη συζήτηση είναι η εξέταση του βαθμού στον οποίο η προηγουμένως αποδεκτή ηθική δικαιοσύνης μπορεί να εφαρμοστεί στην οικολογική δικαιοσύνη. Το πενιχρό αποτέλεσμα αυτής της συζήτησης ήταν, ωστόσο, προ-προγραμματισμένο. Η κοινή ηθική δικαιοσύνης υποφέρει από τη μονοδιάστατη διάσταση του πλαισίου αναφοράς τους. Σε αυτά, η κοινωνική δικαιοσύνη αποτελεί παράμετρο κάποιου άλλου κυρίαρχου στόχου.

  • Στον ωφελιμισμό, η κοινωνική δικαιοσύνη εξαρτάται από τη μεγιστοποίηση της συνολικής χρησιμότητας.
  • Στον μαρξισμό, η κοινωνική δικαιοσύνη είναι δυνατή μόνο σε μια κομμουνιστική κοινωνία, δηλαδή όταν οι συνθήκες για την ισότητα όλων των ανθρώπων έχουν καθιερωθεί ιστορικά.
  • και στον φιλελευθερισμό, η κοινωνική δικαιοσύνη αποτελεί παράμετρο του στόχου των μεγαλύτερων δυνατών βασικών ελευθεριών.

Υπό αυτό το πρίσμα, αυτή η ηθική είναι ήδη ανεπαρκής για την αντιμετώπιση της κοινωνικής δικαιοσύνης ως ανεξάρτητου και άμεσου κοινωνικοπολιτικού στόχου. Οι ανεπάρκειές τους γίνονται ακόμη μεγαλύτερες και η δεσμευτική τους δύναμη για πολιτική γίνεται πιο αδύναμη, εάν παρέχουν επίσης ηθικά πρότυπα αξίας για πρόσθετες και ποιοτικά νέες διαστάσεις δικαιοσύνης, όπως η οικολογική, η διεθνής και η γενεακή δικαιοσύνη.

Ίσες ευκαιρίες ως καθολική ηθική παγκόσμιας ολοκλήρωσης της βιωσιμότητας

Επομένως, τίθεται το ερώτημα κατά πόσον είναι διαφορετική ηθική που λαμβάνει υπόψη τις απαιτήσεις της ενσωματωμένης βιωσιμότητας. Κατά τη γνώμη του συγγραφέα και με βάση τις μέχρι τώρα γνώσεις του, οι οποίες βέβαια έχουν προσωρινό χαρακτήρα, ίσες ευκαιρίες ως ανεξάρτητη οικουμενιστική ηθική θα μπορούσαν να καλύψουν το αποδεδειγμένα υπάρχον κενό προσανατολισμού. Ο πυρήνας των εκτιμήσεών του είναι ο ορισμός των ίσων ευκαιριών ως “ίσες συνθήκες εκκίνησης για άτομα, κοινωνικές ομάδες, λαούς διαφορετικού χρώματος, θρησκεία, πολιτισμό, γλώσσα, για άτομα διαφορετικών φύλων και για διαφορετικές γενιές για να καθορίσουν τις δικές τους ανάγκες, τρόπο ζωής. , και επιλογές, και να έχουν ίση πρόσβαση σε φυσικούς πόρους, αγαθά και θέσεις. Η ισότητα ευκαιριών είναι μια προϋπόθεση που πρέπει να αποκαθίσταται συνεχώς έναντι τόσο των ιστορικά εξελιγμένων όσο και των νεοεμφανιζόμενων τάσεων ανισότητας “.

Ωστόσο, πρέπει να υποστηριχθεί λεπτομερέστερα εάν και με ποιον τρόπο η ισότητα ευκαιριών, που εννοείται με αυτόν τον τρόπο ως μια καθολική ηθική προσανατολισμένη στη δράση, μπορεί να συμβάλει κεντρικά στην υπέρβαση των ελλειμμάτων που περιγράφονται παραπάνω για μια πολιτική αειφορίας χωρίς αποκλεισμούς. Ως αφετηρία λαμβάνονται οι ακόλουθες σκέψεις: Το συμπέρασμα της επικρατούσας φιλελεύθερης άποψης ότι η επίτευξη της ισότητας ευκαιριών “ακριβώς λόγω της αρχικής καθολικότητας της ατομικής αναφοράς δεν μπορεί να προσδιοριστεί ως προς το περιεχόμενο” και ότι “η μαγεία και η γοητεία , η σαγηνευτικότητα και η ασάφεια “καθιστούν αυτήν την έννοια” καθολικά και πανταχού χρησιμοποιήσιμη ως όρο πολιτικής μάχης “δεν είναι λογικά καθόλου επιτακτική. Κάθε οργανωμένη ατομικιστική κοινωνία πρέπει να ακολουθεί τους γενικούς κανόνες και κανόνες προς όφελος όλων των ατόμων. Η καθολικότητα της ιδέας της ισότητας των ευκαιριών έγκειται ακριβώς στο γεγονός ότι τα άτομα και τα δύο ζωοποιούν το ένα το άλλο σε αμοιβαίες αξιώσεις και αναλαμβάνουν υποχρεώσεις μεταξύ τους. Αντιστοιχεί στα ηθικά πρότυπα και στην εννοιολογική λογική της αρχής ότι κανένα άτομο δεν μπορεί να βλάψει τις ευκαιρίες των άλλων ατόμων εντελώς υπό την έννοια της κατηγορηματικής επιταγής του Καντ “με τέτοιο τρόπο ώστε το μέγιστο της θέλησής σας να μπορεί ταυτόχρονα ανά πάσα στιγμή” θεωρείται ως η αρχή μιας γενικής νομοθεσίας ». Επιπλέον, η ουσιαστική και απαραίτητη προϋπόθεση της ισότητας των ευκαιριών είναι η ισότητα των συνθηκών εκκίνησης. Αυτή η συνθήκη είναι ηθικά αλλά και λογικά αναπόσπαστη με την αρχή.

Ο αποκλεισμός ιστορικά αυξημένων ανισοτήτων, περιουσιών και θέσεων, που δεν προέκυψαν από την αξία του καθενός αλλά από κατανομή, αποκλείει την πραγματοποίηση της ισότητας ευκαιριών. Από αυτή την άποψη, η παραδοχή της ασάφειας και του πλήρους ανοίγματος της αρχής για την πολιτική πρακτική είναι αυθαίρετη και προκύπτει μάλλον από την αντίληψη της δικαιοσύνης του ίδιου του κλασικού φιλελευθερισμού. Η ισότητα ευκαιριών μπορεί να ερμηνευθεί όχι μόνο ενδογενετικά, αλλά και με γενετική έννοια καθολική ερμηνεία. Η κατηγορηματική επιταγή του Καντ, αυστηρά μιλώντας, γίνεται κανονικά συνεπής μόνο μέσω μιας ηθικής ίσων ευκαιριών, ξεπερνώντας έτσι τη φήμη του ως απλής τυπικής αρχής με την οποία δεν μπορούν να αιτιολογηθούν συγκεκριμένοι σκοποί ή αξιώματα. Όσον αφορά το γενετικά γενικό εύρος της μεταξύ γενεών, η ιδέα της ισότητας ευκαιριών λαμβάνει επίσης υπόψη το δίλημμα νομιμότητας που συχνά προβληματίζεται από τους ηθικολόγους αλλά δεν επιλύεται: Κάθε κοινωνία θα έχει τις δικές της ιδέες για ανάγκες και ευημερία. Οι σημερινές γενιές δεν θα έχουν το δικαίωμα να καθορίζουν τις ανάγκες των μελλοντικών γενεών και, επιπλέον, να τους καθορίζουν τις τεχνολογικές και κοινωνικές συνθήκες. Αυτή η ένσταση δεν μπορεί να αρνηθεί μια κατανοητή ηθική δικαιολογία.

Η θετική στροφή αυτής της αντίρρησης, ωστόσο, οδηγεί στα ηθικά αξιώματα δράσης για τις σημερινές γενιές που επιτρέπουν στις επόμενες γενιές ίσες ευκαιρίες να χρησιμοποιήσουν τη φύση σύμφωνα με τις ιδέες τους για ανάγκη, ευημερία και ευτυχία. «Η άγνοιά μας δεν πρέπει να χρησιμεύσει ως δικαιολογία για τον περιορισμό των πιθανών ζωής των επερχόμενων».

Επομένως, τα βαριά επιχειρήματα συμπυκνώνουν και στηρίζουν την άποψη ότι η ισότητα ευκαιριών μπορεί να γίνει γόνιμη ως θεμέλιο για μια κοινωνική θεωρία της ολοκληρωμένης βιωσιμότητας που υπερβαίνει το χώρο και το χρόνο σε όλους τους κλάδους. Οι ίσες ευκαιρίες ως καθολική ηθική και η ενσωματωμένη αειφορία ως πολυδιάστατο πλαίσιο δράσης απαιτούν μια διεπιστημονική (κοινωνικοοικονομική, οικολογική, πολιτική επιστήμη, κοινωνιολογική και φιλοσοφική) προσέγγιση.

Οι ακόλουθες αρχές, οι οποίες είναι ακόμη προκαταρκτικές, θεωρούνται θεμελιώδεις για τον προσδιορισμό και την επίτευξη ίσων ευκαιριών

  • Αρχή της ελευθερίας: Κάθε άνθρωπος έχει το ίδιο δικαίωμα στο πιο εκτεταμένο συνολικό σύστημα ίσων βασικών ελευθεριών που είναι δυνατό για όλους. Μια λιγότερο εκτεταμένη ελευθερία πρέπει να ενισχύσει το συνολικό σύστημα ελευθεριών για όλους (πρώτη αρχή του Rawls).
  • Αρχή της διαφορετικότητας: Κάθε άνθρωπος έχει το δικαίωμα να καλλιεργεί και να διατηρεί συγκεκριμένα δικά του χαρακτηριστικά, όπως την ικανότητα, τον τρόπο ζωής και τον προγραμματισμό της ζωής, και να τα χρησιμοποιεί με την έννοια της αυτοπραγμάτωσής του.
  • Αρχή αυτονομίας: Κάθε άτομο έχει το δικαίωμα στους καρπούς της δικής του εργασίας (η ιδέα της ιδιοκτησίας σύμφωνα με τον κλασικό φιλελευθερισμό και τον μαρξισμό).
  • Αρχή ελευθερίας πρόσβασης: Κάθε άτομο έχει το ίδιο δικαίωμα πρόσβασης στους φυσικούς πόρους και στις κοινωνικές θέσεις. Ένας περιορισμός αυτού του δικαιώματος πρέπει να οδηγήσει στην ενίσχυση του ίδιου για όλους τους ανθρώπους που ζουν στο παρόν καθώς και για τις μελλοντικές γενιές.
  • Αρχή φροντίδας: Όλοι είναι υποχρεωμένοι να φροντίζουν μειονεκτικά και εξαρτημένα άτομα. Ο περιορισμός της αυτονομίας που γίνεται αποδεκτός σε αυτή τη διαδικασία πρέπει να ενισχύσει το συνολικό σύστημα αυτονομίας για όλους. Ο ορισμός των ίσων ευκαιριών και η διατύπωση των αρχών του είναι προκαταρκτικοί. Μένει να επαληθευτεί σε ποιο βαθμό τόσο ο ορισμός της ίσης ευκαιρίας όσο και οι ατομικές αρχές του είναι πλήρεις, κάθε μεμονωμένη αρχή είναι συνεπής από μόνη της και αυτές μαζί μπορούν να ενσωματωθούν σε μια συνολική έννοια, και τέλος αν αυτές οι επιμέρους αρχές μπορούν επίσης να υποστηριχθούν ανθρωπογενώς.

Το ζήτημα της ιεραρχίας αυτών των αρχών πρέπει να παραμείνει προς το παρόν ανοιχτό. εάν μια αξιολογική ιεραρχία ή ισότιμη κατάταξη είναι ηθικά επιτακτική, απαιτεί λεπτομερή διερεύνηση, αν και υπάρχουν πολλά να προτείνουμε ότι αυτές οι αρχές θα πρέπει να βρίσκονται σε αδιάλυτη σχέση μεταξύ τους. Ωστόσο, υπάρχουν επαρκή στοιχεία για την υπόθεση ότι η ισότητα ευκαιριών πληροί τις απαιτήσεις μιας πολυδιάστατης ηθικής και της πολιτικής της ολοκληρωμένης βιωσιμότητας πολύ πιο έντονα από τη μέχρι τώρα γνωστή ηθική δικαιοσύνης. Θεωρείται ως μια ολοκληρωμένη περαιτέρω ανάπτυξη εκείνης της κοινής ηθικής δικαιοσύνης, στην οποία είτε η αρχή της ισότητας είτε η αρχή της ελευθερίας είναι απόλυτα κυρίαρχη. Η ελευθερία, η αυτονομία, η αυτοπραγμάτωση και η φροντίδα, η δικαιοσύνη επίτευξης και η δικαιοσύνη της ανάγκης δίνουν στην ισότητα ευκαιριών μια ηθική ικανότητα και πολιτική ικανότητα ύψιστης τάξης.

Test: LO8 Προχωρημένο επίπεδο

Βιβλιογραφικές αναφορές

  • Boldt et al. 2009. Synthetische Biologie – Eine ethisch-philosophische Analyse, p. 8.
  • Catenhusen WM. 2011. Simultanmitschrift der Tagung des Deutschen Ethikrates vom 23.11.2011, p. 85.
  • Charisius H., et al. 2012. Unser kleines Gen-Labor,
  • Cohen J. 2012. WHO Group: H5N1 Papers Should Be Published in Full, Science February 24, Vol. 335 no. 6071, pp. 899-900 DOI: 10.1126/science.335.6071.899.
  • Colussi IA. 2012. Synthetic biology, concerns and risks: looking for a (constitutionally oriented) regulatory framework and a system of governance for a new emerging technology, Trento.
  • Dederer HG. 2010. Neuartige Technologien als Herausforderung an das Recht – dargestellt am Beispiel der Nanotechnologie, in: Spranger/Tade, Aktuelle Herausforderungen der Life Sciences, p. 71 f.
  • Deutscher Ethikrat (German Ethics Council) (Friedrich, Bärbel 01/24/2010).
  • DFG – Deutsche Forschungsgemeinschaft (German Research Foundation) (2009): Synthetic Biology, Bonn.
  • Third Report of the Federal Government on Experience with the Genetic Engineering Act. .2008. Bt-Drs 16/8155, printed in: Eberbach et. al. (2012): Volume 2, Part I, B. I., p. 3.
  • Eberbach W. 2012. Gentechnik und Recht, in: Eberbach et al., Recht der Gentechnik und Biomedizin, 79th Ergänzungs – Lieferung, Vol. 1, Part A. I. p. 13 (12).
  • Engelhardt M. 2010. The Political Opinion, 493: 23.
  • Fouchier,RA. 2012. Airborne transmission of influenza A/H5N1 virus between ferrets. Science, 336 (6088): 1534-41.
  • Garfinkel MI, Endy D, Epstein GL, Friedmann RM. 2007. Synthetic genomics: options for governance. The J Craig Venter Institute, Rockville, Maryland, p. 38 ff.
  • Jarass HD. 2013. Charter of Fundamental Rights of the European Union.
    Kluth W. 2012. Wissenschaftsfreiheit vs. Sicherheitsinteressen http://www.academics.de/wissenschaft/wissenschaftsfreiheit _vs_sicherheitsinteressen_52504.html.
  • Krämer L. 2013. Genetically Modified Living Organisms and the Precautionary Principle, http://www.testbiotech.org/node/904
  • Luttermann C. 2011. Synthetic Biology: Building Blocks for Life and Jurisprudence. JZ, 195.
  • Mooney P. 2010. Next Bang! Wie das riskante Spiel mit Megatechnologien unsere Existenz bedroht, Munich.
  • Nouri A, Chyba CF. 2009. Proliferation-resistant biotechnology: an approach to improve biological security. Nature Biotechnology, 27: 234 – 236.
    Parliamentary Ethics Committee of 07/01/2009, 16/13780.
  • Presidential Commission for the Study of Bioethical Issues. 2010. New Directions. The Ethics of Synthetic Biology and Emerging Technologies, Washington, p. 140 ff.
  • Robienski J, Simon J, Paslack R. 2016. Legal Aspects of Synthetic Biology. In: Joachim Boldt (Hg.): Synthetic Biology, Bd. 493. Wiesbaden, pp. 123–140
  • Sauter A. 2011. Synthetische Biologie: Finale Technisierung des Lebens – oder Etikettenschwindel. TAB-Brief, 39: 23.
  • Schmidt M. 2011. Biosicherheit und Synthetische Biologie. In: Pühler, A., Synthetische Biologie – Die Geburt einer Technikwissenschaf, p. 112 f.
  • Schmidt M, Giersch G. 2011. DNA Synthesis and Security, In: Marissa J. Campbell, DNA Microarrays, Synthesis and Synthetic DNA, Chapter 6.
  • Security and Defense Research – Working Group (2010): Guidelines and Rules of the Max Planck Society On A Responsible Approach To Freedom Of Research And Research Risks, 19. 3., www.mpg.de/232129/researchFreedomRisks.pdf – (accessed 11/17/2020).
  • Statement of NSABB. 2012. Meeting of the National Science Advisory Board for Biosecurity to Review Revised Manuscripts on Transmissibility of A/H5N1 Influenza Virus, oba.od.nih.gov/…/biosecurity/…/NSABB_Statem… (accessed 12/27/2020).
  • The European Group on Ethics in Science and New Technologies to the European Commission (cit. EGE). 2009. Ethics of synthetic biology, Opinion No. 25, Brussels, 17. November, p. 27 f.
  • Then C, Hamberger S. 2010. Synthetische Biologie, Teil 1: Synthetische Biologie und künstliches Leben – eine kritische Analyse, Testbiotech, June 2010.
  • World Health Organization, Statement (2011): WHO concerned that new H5N1 influenza research could undermine the 2011 Pandemic Influenza Preparedness Framework (11/30/2011), www.who.int/entity/…/news/…/index.html
  • ZKBS. 2012. Zwischenbericht der Zentralen Kommission für die Biologische Sicherheit. Monitoring der Synthetischen Biologie in Deutschland, p. 8.
  • Nida-Rümelin J (Hg.). 1996. Angewandte Ethik. Die Bereichsethiken und ihre theoretische Fundierung. Ein Handbuch, Stuttgart
  • Nida-Rümelin J, Von der Pfordten D, Tierethik II. 1996. Zu den ethischen Grundlagen des Deutschen Tierschutzgesetzes. ni: Nida-Rümelin, pp. 484-509
  • Niemann H. 1997. Vermehrung genetisch identischer Tiere durch Klonen. Manuskript und Beantwortung des Fragenkataloges zur Anhörung im
  • Ausschuss für Ernährung, Landwirtschaft und Forsten des Deutschen Bundestages am 11.6.1997.
  • Podschun TE. 1999. Sie nannten sie Dolly – Von Klonen, Genen und unserer Verantwortung, Weinheim.
  • Thomson JA, Marshall VS. 1998. Primate Embryonic Stem Cell Lines. Curr. Top. Dev. Biol., 38: 133-165
  • Tinneberg HR, Ottmar C. 1995. Moderne Fortpflanzungsmedizin – Grundlagen, IVF, ethische und juristische Aspekte, Stuttgart
  • Travis J. Human Embryonic Stem Cells Found?, in: ScienceNewsOnline, Altner G. 1982. Grundlagen. In: Kalberlah, F., Michelsen, G. & Rühling, U. (eds), Der Fischer Öko-Almanach. Daten, Fakten, Trends der Umweltdiskussion, Frankfurt am Main, pp.13-50 (16).
  • Berkes F, Colding J, Folke C. 2003. Navigating social-ecological systems: building resilience for complexity and change, Cambridge University Press, Cambridge.
  • Bick H. 1987. Ökologie – Wissenschaft von den wechselseitigen Beziehungen zwischen Organismen und Umwelt. In: Calließ, J. &Lob, R.E. (eds), Handbuch Praxis der Umwelt- und Friedenerziehung. Vol. 1: Grundlagen, Düsseldorf, pp.16-27 (21).
  • Bückmann W, Leo YH, Simonis UE. 2003. Nachhaltigkit und das Recht, Bundeszentrale für politische Bildung, 1.7.2003, Aus Politik und Zeitgeschicht (B27/2003), Umwelt und Klimapolitik
  • Bundesregierung. 2002. Perspektiven für Deutschland. Unsere Strategie für eine nachhaltige Entwicklung, Berlin.
  • Enquete-Kommission des Deutschen Bundestages. 1994. Schutz des Menschen und der Umwelt, Die Industriegesellschaft gestalten. Perspektiven für einen nachhaltigen Umgang mit Stoff- und Materialströmen, Bonn.
  • Meadows DH, Meadows DL, Randers J, Behrens III, William W. 1971. The Limits to Growth; A Report for the Club of Rome’s Project on the Predicament of Mankind, New York.
  • Partelow S. 2018. A review of the social-ecological systems framework: applications, methods, modifications, and challenges. Ecology and Society, 23(4): 36.
  • Paslack R. 1991. Urgeschichte der Selbstorganisation. Zur Archäologie eines wissenschaftlichen Paradigmas. Vol. 32, in series: Wissenschaftstheorie: Wissenschaft und Philosophie. Braunschweig/Wiesbaden.
  • Paslack R. 2012. The challenge to environmental ethics, in: Vromans, K., Paslack, R., Isildar, G. Y., deVrind, R. & Simon, J. W. (eds), Environmental Ethics – An Introduction and Learning Guide. Greenleaf Publishing, Sheffield, pp. 65-82.
  • Sandin P, Peterson M, Hansson SO, Rudén C, Juthe A. 2002. Five charges against the precautionary principle. Journal of Risk Research, 5 (4): 287-299.
  • Stivers PE. 1976. The Debate Goes On: Science and Policy; Policy and Science, April 1.
  • UBA. 2002. Nachhaltiges Deutschland. Wege zu einer dauerhaft-umweltgerechten Entwicklung, Berlin 1997; auch in Englisch: Sustainable Development in Germany. Progress and Prospects, Berlin 1998; vgl. auch UBA, Nachhaltige Entwicklung in Deutschland. Die Zukunft dauerhaft umweltgerecht gestalten, Berlin.
  • Van den Belt H. 2003. Debating the Precautionary Principle: “Guilty until Proven Innocent” or “Innocent until Proven Guilty”? pp. 1122-1126.
  • Weidner H. 1995. 25 Years of Modern Environmental Policy in Germany. Treading a well-worn path to the Top of the International Field, Wissenschaftszentrum Berlin für Sozialforschung, pp. 1-99.
  • Boldt et al. 2009. Synthetische Biologie – Eine ethisch-philosophische Analyse, p. 8.
  • Catenhusen WM. 2011. Simultanmitschrift der Tagung des Deutschen Ethikrates vom 23.11.2011, p. 85.
  • Charisius H., et al. 2012. Unser kleines Gen-Labor,
  • Cohen J. 2012. WHO Group: H5N1 Papers Should Be Published in Full, Science February 24, Vol. 335 no. 6071, pp. 899-900 DOI: 10.1126/science.335.6071.899.
  • Colussi IA. 2012. Synthetic biology, concerns and risks: looking for a (constitutionally oriented) regulatory framework and a system of governance for a new emerging technology, Trento.
  • Dederer HG. 2010. Neuartige Technologien als Herausforderung an das Recht – dargestellt am Beispiel der Nanotechnologie, in: Spranger/Tade, Aktuelle Herausforderungen der Life Sciences, p. 71 f.
  • Deutscher Ethikrat (German Ethics Council) (Friedrich, Bärbel 01/24/2010).
  • DFG – Deutsche Forschungsgemeinschaft (German Research Foundation) (2009): Synthetic Biology, Bonn.
  • Third Report of the Federal Government on Experience with the Genetic Engineering Act. .2008. Bt-Drs 16/8155, printed in: Eberbach et. al. (2012): Volume 2, Part I, B. I., p. 3.
  • Eberbach W. 2012. Gentechnik und Recht, in: Eberbach et al., Recht der Gentechnik und Biomedizin, 79th Ergänzungs – Lieferung, Vol. 1, Part A. I. p. 13 (12).
  • Engelhardt M. 2010. The Political Opinion, 493: 23.
  • Fouchier,RA. 2012. Airborne transmission of influenza A/H5N1 virus between ferrets. Science, 336 (6088): 1534-41.
  • Garfinkel MI, Endy D, Epstein GL, Friedmann RM. 2007. Synthetic genomics: options for governance. The J Craig Venter Institute, Rockville, Maryland, p. 38 ff.
  • Jarass HD. 2013. Charter of Fundamental Rights of the European Union.
    Kluth W. 2012. Wissenschaftsfreiheit vs. Sicherheitsinteressen http://www.academics.de/wissenschaft/wissenschaftsfreiheit _vs_sicherheitsinteressen_52504.html.
  • Krämer L. 2013. Genetically Modified Living Organisms and the Precautionary Principle, http://www.testbiotech.org/node/904
  • Luttermann C. 2011. Synthetic Biology: Building Blocks for Life and Jurisprudence. JZ, 195.
  • Mooney P. 2010. Next Bang! Wie das riskante Spiel mit Megatechnologien unsere Existenz bedroht, Munich.
  • Nouri A, Chyba CF. 2009. Proliferation-resistant biotechnology: an approach to improve biological security. Nature Biotechnology, 27: 234 – 236.
    Parliamentary Ethics Committee of 07/01/2009, 16/13780.
  • Presidential Commission for the Study of Bioethical Issues. 2010. New Directions. The Ethics of Synthetic Biology and Emerging Technologies, Washington, p. 140 ff.
  • Robienski J, Simon J, Paslack R. 2016. Legal Aspects of Synthetic Biology. In: Joachim Boldt (Hg.): Synthetic Biology, Bd. 493. Wiesbaden, pp. 123–140
  • Sauter A. 2011. Synthetische Biologie: Finale Technisierung des Lebens – oder Etikettenschwindel. TAB-Brief, 39: 23.
  • Schmidt M. 2011. Biosicherheit und Synthetische Biologie. In: Pühler, A., Synthetische Biologie – Die Geburt einer Technikwissenschaf, p. 112 f.
  • Schmidt M, Giersch G. 2011. DNA Synthesis and Security, In: Marissa J. Campbell, DNA Microarrays, Synthesis and Synthetic DNA, Chapter 6.
  • Security and Defense Research – Working Group (2010): Guidelines and Rules of the Max Planck Society On A Responsible Approach To Freedom Of Research And Research Risks, 19. 3., www.mpg.de/232129/researchFreedomRisks.pdf – (accessed 11/17/2020).
  • Statement of NSABB. 2012. Meeting of the National Science Advisory Board for Biosecurity to Review Revised Manuscripts on Transmissibility of A/H5N1 Influenza Virus, oba.od.nih.gov/…/biosecurity/…/NSABB_Statem… (accessed 12/27/2020).
  • The European Group on Ethics in Science and New Technologies to the European Commission (cit. EGE). 2009. Ethics of synthetic biology, Opinion No. 25, Brussels, 17. November, p. 27 f.
  • Then C, Hamberger S. 2010. Synthetische Biologie, Teil 1: Synthetische Biologie und künstliches Leben – eine kritische Analyse, Testbiotech, June 2010.
  • World Health Organization, Statement (2011): WHO concerned that new H5N1 influenza research could undermine the 2011 Pandemic Influenza Preparedness Framework (11/30/2011), www.who.int/entity/…/news/…/index.html
  • ZKBS. 2012. Zwischenbericht der Zentralen Kommission für die Biologische Sicherheit. Monitoring der Synthetischen Biologie in Deutschland, p. 8.
  • Nida-Rümelin J (Hg.). 1996. Angewandte Ethik. Die Bereichsethiken und ihre theoretische Fundierung. Ein Handbuch, Stuttgart
  • Nida-Rümelin J, Von der Pfordten D, Tierethik II. 1996. Zu den ethischen Grundlagen des Deutschen Tierschutzgesetzes. ni: Nida-Rümelin, pp. 484-509
  • Niemann H. 1997. Vermehrung genetisch identischer Tiere durch Klonen. Manuskript und Beantwortung des Fragenkataloges zur Anhörung im
  • Ausschuss für Ernährung, Landwirtschaft und Forsten des Deutschen Bundestages am 11.6.1997.
  • Podschun TE. 1999. Sie nannten sie Dolly – Von Klonen, Genen und unserer Verantwortung, Weinheim.
  • Thomson JA, Marshall VS. 1998. Primate Embryonic Stem Cell Lines. Curr. Top. Dev. Biol., 38: 133-165
  • Tinneberg HR, Ottmar C. 1995. Moderne Fortpflanzungsmedizin – Grundlagen, IVF, ethische und juristische Aspekte, Stuttgart
  • Travis J. Human Embryonic Stem Cells Found?, in: ScienceNewsOnline, Altner G. 1982. Grundlagen. In: Kalberlah, F., Michelsen, G. & Rühling, U. (eds), Der Fischer Öko-Almanach. Daten, Fakten, Trends der Umweltdiskussion, Frankfurt am Main, pp.13-50 (16).
  • Berkes F, Colding J, Folke C. 2003. Navigating social-ecological systems: building resilience for complexity and change, Cambridge University Press, Cambridge.
  • Bick H. 1987. Ökologie – Wissenschaft von den wechselseitigen Beziehungen zwischen Organismen und Umwelt. In: Calließ, J. &Lob, R.E. (eds), Handbuch Praxis der Umwelt- und Friedenerziehung. Vol. 1: Grundlagen, Düsseldorf, pp.16-27 (21).
  • Bückmann W, Leo YH, Simonis UE. 2003. Nachhaltigkit und das Recht, Bundeszentrale für politische Bildung, 1.7.2003, Aus Politik und Zeitgeschicht (B27/2003), Umwelt und Klimapolitik
  • Bundesregierung. 2002. Perspektiven für Deutschland. Unsere Strategie für eine nachhaltige Entwicklung, Berlin.
  • Enquete-Kommission des Deutschen Bundestages. 1994. Schutz des Menschen und der Umwelt, Die Industriegesellschaft gestalten. Perspektiven für einen nachhaltigen Umgang mit Stoff- und Materialströmen, Bonn.
  • Meadows DH, Meadows DL, Randers J, Behrens III, William W. 1971. The Limits to Growth; A Report for the Club of Rome’s Project on the Predicament of Mankind, New York.
  • Partelow S. 2018. A review of the social-ecological systems framework: applications, methods, modifications, and challenges. Ecology and Society, 23(4): 36.
  • Paslack R. 1991. Urgeschichte der Selbstorganisation. Zur Archäologie eines wissenschaftlichen Paradigmas. Vol. 32, in series: Wissenschaftstheorie: Wissenschaft und Philosophie. Braunschweig/Wiesbaden.
  • Paslack R. 2012. The challenge to environmental ethics, in: Vromans, K., Paslack, R., Isildar, G. Y., deVrind, R. & Simon, J. W. (eds), Environmental Ethics – An Introduction and Learning Guide. Greenleaf Publishing, Sheffield, pp. 65-82.
  • Sandin P, Peterson M, Hansson SO, Rudén C, Juthe A. 2002. Five charges against the precautionary principle. Journal of Risk Research, 5 (4): 287-299.
  • Stivers PE. 1976. The Debate Goes On: Science and Policy; Policy and Science, April 1.
  • UBA. 2002. Nachhaltiges Deutschland. Wege zu einer dauerhaft-umweltgerechten Entwicklung, Berlin 1997; auch in Englisch: Sustainable Development in Germany. Progress and Prospects, Berlin 1998; vgl. auch UBA, Nachhaltige Entwicklung in Deutschland. Die Zukunft dauerhaft umweltgerecht gestalten, Berlin.
  • Van den Belt H. 2003. Debating the Precautionary Principle: “Guilty until Proven Innocent” or “Innocent until Proven Guilty”? pp. 1122-1126.
  • Weidner H. 1995. 25 Years of Modern Environmental Policy in Germany. Treading a well-worn path to the Top of the International Field, Wissenschaftszentrum Berlin für Sozialforschung, pp. 1-99.